常用培养基配方79119

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1、修改记录单版木时间简述A2003-11-15新发行1A2004-06-02品控部改为品质部1「…-…-一-一....染色法、培养基和（微生物检验）试剂配制作业指导书1目的对染色法、培养基和试剂配制方法作出明确规定，为检测结果的准确性提供最基本的保证。2范围适用丁微生物检验。3职责3.1微检人员负责培养基、试剂配制。3.2微检人员掌握微生物的染色方法。4培养基和试剂配制名称、用途名称用途4.1革兰氏染色液微牛物染色4.2营养琼脂细菌培养和细菌总数测定4.3孟加拉红培养基霉菌、酵母菌计数4.4乳糖胆盐发酵管大肠菌群，粪大肠菌群及人肠杆菌的测定4.5乳糖发酵管供大肠菌群证实试验用4.6三糖铁琼脂

2、肠杆菌科细菌的生化反应筛选4.7伊红美兰琼脂分离肠道致病菌。4.8缓冲蛋白腺水沙门氏菌检验屮的前增菌4.9四硫酸钠煌(TTB)绿增菌液沙门氏菌检验中的前增菌4.10GN增菌液志贺氏菌的前增菌4.11亚硒酸盐胱氨酸增菌液沙门氏菌选择性增菌培养4.12SS琼脂沙门氏菌、志贺氏菌的分离4.13V-P半固体琼脂细菌检验的V・P试验4.147.5%氯化钠肉汤金黄色葡萄球菌的增菌培养4.15Baird-Parker培养基金黄色葡萄球菌的检验4.16酸性肉汤酸性罐头食品商业无菌检验4.17尿索琼脂基础细菌检验中的尿索酶试验4.18赖氨酸脱竣酶培养基细菌检验中的赖氨酸脱竣酶试验4.19口引味培养基细菌靛基

3、质试验，亦称色氨酸肉汤4.20硝酸盐氧化钾培养基细菌检验中的硝酸盐还原试验和氧化钾试验4.21生理盐水检样的溶解与稀释5具体内容5.1革兰氏染色法5.1.1革兰氏染色液5.1.1.1结晶紫染色液成份：结晶紫l.Og95%乙醇20.0ml1%草酸鞍水溶液80.0ml5.1.1.2革兰氏碘液成份：碘l.Og碘化钾2.0g蒸憾水300.0ml5.1.1.395%乙醇5.1.1.4沙黄复染液成份：沙黄0.25g95%乙醇10.0ml蒸憾水90.0ml5.1.2染色法5.1.2.1将涂片在火焰上固定。5.1.2.2初染：滴加结品紫染色液，染lmin,水洗。5.1.2.3媒染：滴加革兰氏碘液，作用1m

4、in,水洗。5.1.2.4脱色：滴加95%乙醇脱色，水洗；或将乙醇滴满整个涂片，立即倾去，再用乙醇滴满整个涂片，脱色10s,水洗。5.1.2.5复染：滴加沙黄复染液，染lmin,水洗，待干，镜检。5.1.2.6结果判定：革工氏阳性菌呈紫色；革工氏阴性菌呈红色。5.2一般培养基和专用培养基5.2.1营养琼脂521」用途：用于一般细菌培养及细菌总数测定。5.222成份(g/L)：蛋白月东10.0牛肉粉3.0氯化钠5.0琼脂15.0PH7.3±0.15.2.2.3制法：称取各成份溶于纯水中，加热煮沸至完全溶解，分装，121°C15min高压灭菌备用。522.4注意事项：密封保存于阴凉干燥处。5.

5、2.2孟加拉红培养基522.1用途：用于粮食、食品、饮料中霉菌、酵母菌计数。522.2成份(g/L)：蛋白月东5.0葡萄糖10.0磷酸二氢钾1.0硫酸镁0.5孟加拉红0.03氯霉菌0」琼脂15.05.2.2.3制法：称取各成份溶于纯水中，加热煮沸至完全溶解，分装，121°C20min高压灭菌备用。522.4注意事项：保存于阴凉干燥处；密封、避光。5.2.3乳糖胆盐发酵管523.1用途：用于大肠菌群，粪大肠菌群及大肠杆菌的测定。523.2成份(g/L)：蛋白月东20.0胆盐3.0乳糖5.0混甲酚紫0.01PH7.4±0.1523.3制法：称取各成份溶于纯水中，加热煮沸至完全溶解，分装于有倒立

6、发酵管的试管中，115°C15min高压灭菌，双料乳糖胆盐发酵管除纯水外，其它成份加倍。523.4注意事项：密封保存于阴凉干燥处。5.2.4乳糖复发酵管524.1用途：供大肠菌群证实试验用。524.2成份(g/L)：蛋白月东20.0乳糖10.0漠甲酚紫0.01PH7・4±0.15.2.4.3制法：称取各成份溶于纯水中，加热煮沸至完全溶解，分装10ml于有倒立发酵管的试管中，115°C15min高压灭菌备用。524.4注意事项：密封保存于阴凉干燥处。5.2.5三糖铁琼脂5.2.5.1用途：主要用于肠杆菌科细菌的生化反应筛选。525.2成份(g/L)：蛋白月东20.0酚红0.025牛肉膏3.0

7、氯化钠5.0乳糖10.0硫酸亚铁^(6H2O)0.5蔗糖10.0硫代硫酸钠0.5琼脂12.0葡萄糖1.0PH7.4±0.15.2.53制法：称取各成份溶于纯水屮，加热煮沸至溶解，分装试管，115°C15min高压灭菌制成高层斜而备用。525.4注意事项：保存于阴凉干燥处，密封、避光。5.2.6伊红美兰琼脂526.1用途：弱选择性培养基，用于分离肠道致病菌。5・2・6・2成份(g/L)：蛋白#东10.0乳糖10.0磷酸氢二