《疫学检查》ppt课件

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1、免疫学检查(Immunologictest)陕西中医学院诊断学教研室一、检查内容1.评估机体的免疫功能状态2.检测与自身免疫病相关的抗体或致敏T细胞3.检测与过敏性疾病相关的变应原或IgE抗体4.检测某些致病微生物的抗原或抗体5.检测某些肿瘤抗原、激素含量二、常用的免疫检查方法1.沉淀试验2.凝集试验3.补体结合试验4.中和试验5.荧光免疫技术6.酶免疫技术7.放射免疫技术8.发光免疫技术9.时间分辨荧光免疫技术10.流式细胞仪分析技术11.分子生物学分析技术三、机体免疫功能检查(一)非特异性免疫功能测定1

2、.血清蛋白区带电泳-+白蛋白α1、α2球蛋白β1、β2球蛋白γ-球蛋白血清蛋白区带电泳示意图谱2.外周血中性粒细胞计数，趋化、吞噬、杀菌功能测定①趋化功能降低：易反复感染、齿龈炎、中耳炎、Chediak-Higashi综合征、迟钝性白细胞综合征、有肌蛋白功能不全、高于IgE综合征等。②吞噬功能降低：中性粒功能异常综合征、补体所致调理缺陷症、膜糖蛋白缺陷症、慢性肉芽肿、肌动蛋白功能不全等。③杀菌功能降低：慢性肉芽肿、多发性骨髓瘤、巨球蛋白血症、慢性粒白血病、糖尿病等三、机体免疫功能检查3.血清总补体、C3

3、、C4、B因子、溶菌酶测定①补体降低：自身免疫病，易反复感染等②补体增高：风湿热急性期、结节性多动脉炎、皮肌炎、心梗、Reiter综合征等③B因子降低：表示补体旁路途径激活④溶菌酶：↑见于白血病、肾脏疾病；↓见于肿瘤患者三、机体免疫功能检查2.B淋巴细胞功能检查①血清IgG含量测定②特异性抗体产生能力的体内试验白喉类毒素、破伤风类毒素、肺炎球菌多糖抗原、流感嗜血杆菌多糖抗原接种后5~7天能检测到IgM型抗体，再次免疫后1周产生IgG型抗体。③特异性抗体产生能力的体外试验洗涤++→低倍镜下计数酶点数(抗体生成

4、细胞数)Ag吸附醋纤膜外周血单个核细胞5%CO237℃×6h生物素温育抗体洗涤酶复合物底物三、机体免疫功能检查3.淋巴结或组织活检浅皮质区——B细胞的居住地深皮质区——T细胞的居住地髓质——浆细胞(受抗原刺激)/髓索及髓窦(静止淋巴结)直肠粘膜固有层有丰富的浆细胞和IgA抗体分泌细胞常见与体液免疫功能缺陷的疾病1.性联无丙种球蛋白血症2.普通变异型免疫缺陷病3.高IgM综合征4.选择性IgA缺陷病5.IgG亚类缺陷症三、机体免疫功能检查(三)细胞免疫功能检查1.T细胞数量检查CD3+成熟T细胞(69.4±4

5、.86%)CD4+辅助T细胞、诱导T细胞、杀伤T细胞、单核吞噬细胞(41.17±5.28%)CD8+抑制T细胞、毒性T细胞、反抑制T细胞(24.58±4.02%)2.T细胞功能检查①T细胞转化试验(60%~80%)②抑制性T细胞功能检测(40%±10%)③T细胞介导细胞毒试验三、机体免疫功能检查3.mIL-2R细胞检测mIL-2R阳性细胞是T细胞活化的标志(正常人的PBMC静息状态为2%~6%，PHA诱导培养后为22%~39%)静息时过度表达提示有免疫病理损害诱导后表达率降低提示患者细胞免疫功能不全4.婴幼

6、儿侧位胸片若不见胸腺阴影，提示有T细胞缺陷5.淋巴结活检若皮质区和副皮质区界线不清，生发中心消失，提示有T细胞缺陷6.成人PPD5u,48~72h后红肿、硬结或直径<5mm，提示有细胞免疫功能不全。三、机体免疫功能检查(三)NK细胞活性检查C’PDAFDA*+活性降低：肿瘤、白血病、自身免疫病、对病毒、真菌易感活性增高：多发性骨髓瘤、骨髓移植、EBV、HSV、TB感染的早期，习惯性流产注PDA*：乙酰乙酸羧基荧光素，FDA*：羧基荧光素K562FDA*5%CO237℃×4hNKK562K562FDA*流式细

7、胞仪测定活的K562细胞的荧光来推知NK细胞的活性三、机体免疫功能检查1.ANAHep-2细胞做抗原片最敏感，荧光图像最清晰，若结合灵长类动物器官组织冷冻切片做抗原，能检出更多的自身抗体。均质型：抗组蛋白抗体，见于所有活动期SLE者周边型：抗ds-DNA，见于SLE，特别伴肾炎者核仁型：抗核糖体或抗U3RNP，见于SLE、SSc散在斑点型：抗着丝点抗体，见于Crest综合征斑点型：抗uRNP抗体(核糖核蛋白)，高滴度见于MCTD，SLE、SSc抗SM抗体(U族RNA)，见于30%~40%SLE抗Scl-7

8、0抗体(非组蛋白染色体蛋白)，见于15%~20%SSc抗SSA/Ro抗体(Y1-Y5RNP)，见于SLE、pSS抗SSB/La抗体(RNA聚合酶Ⅲ转录物)，见于pss、ssc抗K抗体(非组蛋白酸性核蛋白)，见于SLE、SSc四、自身抗体检查2.ENA(extractablenuclearantigen)是源于小牛胸腺、猪脾，在盐水中溶解的一部分核抗原，通过免疫印迹技术将不同分子量的抗原分开，可检出抗SM、抗uRN