《疫学检查》PPT课件

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1、免疫学检查复旦大学上海医学院诊断学系邹和建http://www.hjzou.comE-mail:mail@hjzou.com免疫学检查的应用范围1.感染性(传染性)疾病的诊断2.肿瘤免疫学检查3.免疫功能评价(免疫缺陷)4.自身抗体检测广泛用于疾病诊断、机理研究、疾病预防。免疫学检查的特点1.主要检测特异性或非特异性的抗原、抗体或免疫活性细胞,或参与免疫的其它成分。2.是疾病诊断的间接方法3.交叉性、延时性--正确解释结果4.正常值问题5.是一项具有广泛应用及发展前途的学科。临床免疫(免疫诊断) 的学习方法基本原理

2、:ELISA,凝集反应……每项检验的检测目标是什么如何评价检验结果常用血清学检验一、伤寒、副伤寒血清学诊断*1.肥达氏(Widal)试验原理:检验伤寒、副伤寒抗体O-菌体甲H-鞭毛乙H抗原Vi-体表丙评价:正常人有一定滴度凝集价(接种、交叉感染)TO>1:80TH>1:160甲、乙、丙H>1:80动态4倍以上延时性1周10%2周60%~70%4周90%阴性结果解释2.酶联免疫试验(ELISA)Enzyme-linkedimmunosorbantassay原理:间接ELISA检测IgM抗原:伤寒杆菌脂多糖、Vi抗原评

3、价:抗体出现较肥达氏反应早,1周正常人阴性或1:20以下Vi抗体阳性1:20以上,提示慢性带菌者。3.胶乳凝集试验原理:检测抗原抗Vi、O、H抗体+胶乳颗粒--胶乳抗体与血、尿中抗原反应,出现凝集反应。评价:正常人为阴性或O<1:80,H<1:160早期检测。二、斑疹伤寒血清反应Weil-Felix(外-斐氏反应)原理:检测抗体变形杆菌OX19、OX2、OXk与立克次体有交叉抗原性三、Brucellaceae菌病血清反应原理:检测特异性抗体用牛Brucellaceae菌作为诊断菌液凝集反应评价:*2周后出现抗体*3

4、~5周1:160以上四、抗链球菌溶血素“O”*原理:A族溶血性链球菌链球菌溶血素O(streptolysinO)红细胞破坏评价:*正常ASO<400U*感染后1周上升,4~6周80%阳性*高Ch、巨球蛋白血症、MM可增高五、C反应蛋白*原理:与肺炎双球菌C多糖体反应的急性时相反应蛋白。具有激活补体、促进吞噬、免疫调控的作用。方法:单向免疫扩散、胶乳法、ELISA法抗CRP与血清中CRP反应评价:非特异性指标,可见于化脓性感染、组织坏死、肿瘤、风湿活动等。六、嗜异凝集反应*原理:IgM嗜异性抗体凝集异种动物红细胞评价

5、:*正常人阴性或凝集价<1:8*发病后1周升高,2~3周达高峰*非特异性:Hodgkin、血清病七、冷凝集素试验原理:肺炎支原体感染后,血清中产生“寒冷红细胞”凝集素。自身红细胞或“O”型红细胞0~4℃凝集,37℃散开。评价:*2周后上升,1:32,4周后达高峰*流感、传单可呈阳性反应,但滴度低。八、冷球蛋白检查原理:草酸钠抗凝,分离血浆,分别置于4℃、37℃直立72小时,4℃中可见沉淀评价:*SLE15%~35%阳性提示疾病活动*非特异性九、流行性出血热血清学检查原理:感染出血热病毒肺癌传代H549细胞株+患者血

6、清+荧光标记抗IgG或IgM细胞浆中出现黄绿色荧光评价:抗IgM标记3~6天抗IgG标记2周十、梅毒血清学检查1.未灭活血清反应素试验(unheatedserumreagintest,USR)梅毒螺旋体破坏组织,产生心磷脂,生成反应素。牛心磷脂卵磷脂胆固醇血清(反应素)颗粒凝集+2.快速血浆反应素试验(rapidplasmareagintest,RPR)原理:RPR卡片(涂有类脂质抗原)十一、AIDS的血清学检验1.间接免疫荧光法原理:检测HIV抗体感染HIV的淋巴细胞+血清+荧光染色2.病毒检查法原理:分离感染

7、淋巴细胞培养上清液逆转录酶十二、肝炎病毒的检测甲肝病毒:RNA病毒HAV-Ag发病前二周即可从粪中检出,两周后消失HAV-RNA:对早期诊断具有特异性HAV-IgM:病毒衣蛋白抗体发病2周100%阳性,一年消失。对于急性期患者诊断有益十二、肝炎病毒的检测HAV-IgA:肠道粘膜分泌,粪中检出。早期诊断指标之一。HAV-IgG:病愈后可长期存在。感染过用于流行病学调查十二、肝炎病毒的检测乙肝病毒:DNA病毒HBsAg:外壳蛋白,本身无传染性,但常与DNA共存。潜伏期,发病时达高峰,3月不转阴有慢性倾向。病毒携带者

8、抗HBs:保护性抗体,发病后3-6月出现。也可见于疫苗注射后,注射抗HBs免疫球蛋白后十二、肝炎病毒的检测乙肝病毒:DNA病毒HBeAg:病毒核心颗粒中的可溶性蛋白。肝炎活动期,并有较强传染性。可垂直传播(90%)持续阳性:慢性化、肝硬化抗HBe:急性期出现,易进展为慢性慢活肝出现,易进展为肝硬化抗体、抗原同时存在,ALT升高-可进展为原发性肝癌还提示:复制

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