DNA粗提取与鉴定实验教学设计

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1、《DNA的粗提取与鉴定》实验教学设计年级组别高二班级高二1班审阅教师李建荣授课时间2014年6月20日课题DNA的粗提取和鉴定实验课型新授课课标要求掌握DNA提取和鉴定的原理和实验操作教学目标知识与能力能够说出DNA的提取、纯化与鉴定的实验原理过程与方法通过实验培养学生的动手能力与分析问题的能力情感、态度与价值观通过实验的学习,让学生了解到生物世界的奥秘教学重点提取和鉴定DNA的原理与实验操作教学难点提取和鉴定DNA的实验原理与实验操作教学方法讲授法、小组合作法、边讲边练教学程序设计教学过程及方法环节一明标自学过程设计二次备课【学习目标】1

2、、能够说出DNA的提取、纯化与鉴定的实验原理2、通过实验培养学生的动手能力与分析问题的能力3、通过实验的学习,让学生了解到生物世界的奥秘【新课导入】【自学指导】根据《导学案》自主阅读选修一内容,归纳提取DNA的原理1、实验原理【自学效果展示】一、DNA的提取1、提取DNA的原理:41)、DNA在NaCl溶液中的溶解度,是随着NaCl的浓度的变化而改变的。当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时,DNA的溶解度最低。利用这一原理,可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。2)、DNA不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。

3、利用这一原理,可以进一步提取出含杂质较少的DNA。鉴定DNA的原理:DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色,因此,二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。2、实验过程:师生共同学习以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取鸡血细胞做实验材料的原因①鸡血细胞核的DNA含量丰富,材料易得②鸡血细胞极易吸水胀破,而用动物肝脏细胞作实验材料常常需要匀浆和离心,对设备要求较高,操作繁琐,历时较长①柠檬酸钠作用及作用机理防止血液凝固。柠檬酸钠能与血浆中的Ca2+发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的Ca2+大大减少,血液就不会凝固②注意事项鸡血细胞破碎以后释放出的DN

4、A,容易被玻璃容器吸附,所以在提取过程中为了减少DNA的损失,最好使用塑料的烧杯和试管盛放鸡血细胞液讨论:提取鸡血中的DNA时,为什么除去血液中的上清液?答:血液分为两部分,一部分是血浆,一部分是血细胞,离心后除去的上清液是血浆3、过程(结合导学案边做边学)①提取鸡血细胞的细胞核物质②溶解细胞核内的DNA【合作释疑一】(1)为什么要加入蒸馏水?加入蒸馏水后细胞会有什么变化?答:让细胞内浓度大于周围溶液的浓度,细胞会吸水以至胀破(2)用玻璃棒搅拌有什么意义?答:用玻璃棒搅拌可以加速血细胞和细胞核的破裂。注意应沿一个方向快速搅拌,但也不能太快太

5、猛,防止打碎DNA(3)滤去的是什么物质?得到的是什么?答:过滤将滤去的是细胞膜和核膜等物质;得到的是与蛋白质等物质结合在一起的DNA4③析出含DNA的粘稠物④滤取含DNA的粘稠物⑤将DNA的粘稠物再溶解⑥过滤含有DNA的氯化钠溶液⑦提取含杂质较少的DNA【合作释疑二】(1)为什么要加50mL的冷酒精?答:因为DNA不溶于冷酒精,而其他物质可以溶解在酒精中,使含杂质较少的DNA丝状物可以析出,悬浮于溶液中(2)观察丝状物呈什么颜色?答:白色教学过程及方法环节二合作释疑环节三点拨拓展过程设计二次备课二、DNA的鉴定【讨论:】(1)比较两个试管

6、中溶液的颜色有什么不同?答:有丝状物的试管变成蓝色,另一试管还是原来颜色(2)这一鉴定结果说明什么问题?答:提取出的丝状物是DNA(3)DNA的直径约为20×10-10m,实验中出现的丝状物的粗细是否表示1个DNA分子直径的大小?答:DNA分子直径只有2nm。丝状物是多个DNA子聚在一起形成的【点拨拓展:】(1)此实验过程中有几次使用蒸馏水?几次过滤,几次析出,几次搅拌?分别在哪一步?答:整个实验共“两次蒸馏水,三次过滤,两次析出,六次搅拌”①两次蒸馏水第一次:细胞吸水胀破第一步第二次:使DNA黏稠物析出第三步②三次过滤第一次:DNA存在于

7、滤液里第一步第二次:DNA被留在纱布上第四步第三次:DNA存在于滤液里第六步过滤时使用的纱布层数与需用滤液或黏稠物有关,第二次要用其滤出的黏稠物有关,所以要使用多层纱布,第一次和第三次均要用其滤液,使用的纱布为1-2层③两次析出第一次:用0.14mol/L的NaCI溶液含杂质多第三步第二次:用冷却的95%的第七步④六次搅拌:第一、二、三、五、七步其中除第八步外,其余均要朝一个方向搅拌,在第三、五步搅动还要轻缓,玻璃棒不要直插烧杯底部,这样才能保证得到完整的DNA(2)为什么反复地溶解与析出DNA,能够去除杂质?4答:用高盐浓度的溶液溶解DN

8、A,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使DNA析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出DNA,就能够除去与DNA溶解度不同的多种杂质达标检测评价指南3教

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