GBT15673-1995 食用菌粗蛋白质含量测定方法.pdf

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1、中华人民共和国国家标准食用菌粗蛋白质含量测定方法GB/T15673一1995Methodfordeterminationofcrudeproteininediblefungi1主题内容与适用范围本标准规定了食用菌中粗蛋白质含量的测定方法。本标准适用于食用菌中粗蛋白质含量的测定。2弓}用标准GB12530食用菌取样方法GB12531食用菌水分测定3方法提要或原理采用半微量凯氏定氮法，即在加速剂存在下，以硫酸破坏样品中有机物，加碱蒸馏，滴定所释放的氨，计算出其含氮量。含氮量乘上换算系数6.25即得样品的粗蛋白质量。菇类可消化蛋白质是粗蛋白的70%左右，含氮量乘上4.38.即为可消化蛋白质

2、的含量。4试剂分析中，除另有说明，均限用分析纯试剂、蒸馏水或相当纯度的水。4.1硫酸(GB625):分析纯或化学纯，密度1.84g/mL,4.2盐酸(GB622):密度1.18g/ml。4.3氢氧化钠溶液浓度400g/L，用分析纯或化学纯氢氧化钠(GB629)配制。4.4硼酸(GB628)溶液浓度20g/1-，为蒸馏时的吸收液。4-5加速剂:将600g硫酸钾(HG3-920)和100g五水合硫酸铜(GB665CuSO,·5H,O)混匀，充分研磨后过40目筛，试剂瓶内密封保存。4.6盐酸标准溶液:浓度。.05moI/L或。.1mol/L，用无水碳酸钠或邻苯二甲酸氢钾标定其浓度，精确到小

3、数点后第四位。4.7甲基红一嗅甲酚绿混合指示剂:50mL浓度为2g/L的澳甲酚绿(HG3-1220)95%乙醇(GB679)溶液和10m1一浓度为2g/L的甲基红(HG3-958)95%乙醇溶液混合。5仪器、设备5，电热鼓风干燥箱5.2小型植物粉碎机:备有1mm孔径的金属筛网。5.3分样筛:备有孔径0.42mm(40目)和孔径0.84mm(20目)筛子。5.4玻璃研钵:备有研柞。国家技术监督局1995一08门7批准1996一01一01实施.www.bzxzk.com.GB/T15673一19955.5广口瓶:带磨口。5.6剪刀和小刀5.了分析天平:感量。.。。。19。5.8扭力天平。

4、5.9可调电炉:0-600C,5门0通风橱5门1消煮架:铁制，可使凯氏瓶在消煮时与垂直方向成300-45。角。5.12硬质凯氏瓶:容积100mLo5.13半微量凯氏定氮蒸馏装置。5.14半微量滴定管:10mL,5.15弯颈三角漏斗:直径25mm,5.16锥形瓶:250mLo6样品6.1取祥方法和数量6.1.1干制品(蘑菇干片、干香菇、黑木耳和银耳等)按GB1253。中规定要求进行。总量不得少于1009.6.1.2鲜菇在每批不同的地方随机取样作为原始样品，总量不得少于1000go6.2试样的制备6.2门干品直接用剪刀剪成小块，在80-100℃干燥箱中烘至发脆后冷却，立即用小型植物粉碎机

5、粉碎。弃去开始粉碎出的样品(约占总样十分之一)。粉碎过的祥品均需过40目筛。未能过筛部分再次粉碎或经研钵内研磨之后再过筛，直至全部样品过筛为止。银耳和木耳样品因质地关系经粉碎后大部分样品不能过40目筛，故要求全部样品过20目筛，过筛后的样品装入清洁的广口瓶内保存备用。样品密封后填写标签，注明品名、日期、交样单位和取样人等。6.2.2鲜菇取样后立即切成4mm厚度的菇片，鲜耳则用手撕成小块均匀地摊在干燥箱内垫有纱布的铁丝网上，50`C鼓风干燥6h以上。待样品半干后再逐步提高温度至80^-1叩℃。样品发脆之后冷却，立即用粉碎机粉碎。其他操作同干品。了分析步骤7.1称样:称取试样。.3-0.

6、5g(蘑菇、香菇、草菇和平菇等高蛋白质的样品为0.3g，木耳、银耳和获荃等低蛋白质含量的样品则为0.5g)，精确到。.0001g。同时按GB12531中规定的方法称样测定试样的含水量。7.2消煮:试样无损地倒入凯氏瓶中，加入加速剂粉末(4.5)3.5g,混匀，最后加人浓硫酸(4.1)5ml-,轻轻摇动凯氏瓶使试样完全湿润。消煮时利用消煮架将凯氏瓶斜放在电炉上加热。瓶口加弯颈三角漏斗。开始时缓慢地加热，待瓶内硫酸液沸腾后，调节电炉温度，防止泡沫冲到凯氏瓶颈上。经常旋转凯氏瓶，直至有机物完全炭化、泡沫消失为止。随后用猛火加热，使溶液不断处于沸腾状态。溶液变清呈绿色之后继续加热。.5h后结

7、束。整个过程在通风橱内进行。7.3蒸馏:装好半微量定氮蒸馏装置。使用前用蒸馏水冲洗干净。在蒸气发生瓶内加入2/33/4容积的蒸馏水。将冷凝管下端插入盛有10mL硼酸吸收液(4.4)的250mL锥形瓶液面下，吸收液中预先加入5-6滴混合指示剂(4.7)。通电加热，待蒸气产生后开始蒸馏。从加样口将凯氏瓶中消煮好的样品液倒入，并用蒸馏水冲洗凯氏瓶数次，确保样品全部加入。立即加入氢氧化钠溶液(4.3)20mL，使样品液呈强碱性。加样口盖塞封闭，通人蒸气，使反应室内