毕业论文-- 头孢他啶对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响及其机制探讨

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1、头孢他啶对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响及其机制探讨本科生毕业论文院（系）学科、专业论文题目头孢他啶对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响及其机制探讨指导教师申请者姓名完成时间目录摘要和关键词3前言3头孢他啶对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响及其机制探讨1材料与方法41.1实验材料41.1.1菌株41.1.2主要试剂41.1.3主要仪器41.2实验方法41.2.1菌液培养41.2.2头孢他啶最低抑菌浓度（MIC）测定41.2.3抑制生物膜形成实验41.2.4清除生物膜实验51.2.5生物膜形成相关基因相对表达量检测52结果62.1抗生素实验浓度的确定62.2抑制生物膜形成实验62.2清除生

2、物膜实验83讨论9致  谢11头孢他啶对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响及其机制探讨头孢他啶对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响及其机制探讨【摘要】目的探讨头孢他啶在铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa，PA）生物膜形成过程中的抑制、清除作用及其作用机制。方法（1）通过96孔板结晶紫染色方法，定量分析头孢他啶对PA生物膜的抑制、清除作用。（2）通过realtime-PCR方法对生物膜形成相关基因的表达进行相对定量分析，来探讨头孢他啶对PA生物膜的作用机制。结果（1）未形成成熟生物膜时，头孢他啶对PA生长的抑制效果较好，而在有成熟生物膜形成时，头孢他啶不能有效抑制PA

3、的生长。（2）头孢他啶与PA生物膜形成相关基因的增多表达相关。结论头孢他啶能够促进PA生物膜形成相关基因的表达，临床上对于慢性PA感染患者的治疗应当避免使用头孢他啶。【关键词】铜绿假单胞菌；生物膜；头孢他啶EffectsandtheMechanismofCeftazidimeintheFormationofPseudomonasaeruginosaBiofilms[Abstract]ObjectiveToexploretheprocessofsuppressionofceftazidimeinPseudomonasaeruginosa(Pseudomonasaeruginos

4、a,PA)biofilmformation,scavenginganditsmechanism.Method(1)By96crystalvioletstainingmethod,quantitativeanalysisofceftazidimePAbiofilminhibitionandscavenging.(2)Byrealtime-PCRmethodfortheformationofbiofilmrelatedgeneexpressionrelativequantitativeanalysis,toexploreceftazidimePAbiofilmmechanism.

5、Results(1)donotformmaturebiofilms,ceftazidimePAgrowthinhibitionbetter,andinamaturebiofilmformation,ceftazidimecaninhibitthegrowthofthePA.(2)PAceftazidimeandincreasedbiofilmformationassociatedgenesexpression.ConclusionPAceftazidimecanpromotebiofilmformationassociatedgeneexpression,theclinica

6、ltreatmentofpatientswithchronicPAinfectionshouldavoidceftazidime.[Keywords]Pseudomonasaeruginosa;bioflim;ceftazidime铜绿假单胞菌（Pseudomonasaeruginosa，PA）是慢性呼吸道感染的常见条件致病菌，是位居第四位的医院获得性感染致病菌，与大约10%的医院获得性感染相关。积极有效的抗生素治疗能够改善PA感染患者的肺功能，提高患者生存质量。然而因其极易产生生物膜，导致对抗菌药物的耐药性也显著增加[1,2]。现代微生物学观点认为生物膜是PA感染的主要存在

7、形式[3]。因此，研究抗生素对于生物膜形成的相关作用，具有重要的临床价值。头孢他啶是传统的PA治疗抗生素，但其在慢性PA感染患者的治疗效果有限。本文在先前研究PA生物膜形成相关基因及调控的基础上[4,5]，探讨头孢他啶对PA生物膜的抑制、清除作用及其作用机制以及对临床治疗相关疾病的指导意义1材料与方法1.1实验材料头孢他啶对铜绿假单胞菌生物膜形成的影响及其机制探讨1.1.1菌株非黏液型PA标准菌株PAO1由美国德克萨斯A&M大学ThomasK.Wood教授惠赠；天津医科大学第二医院检验科保存菌株。1.1