GBT14702-1993 饲料中维生素B6测定方法.pdf

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1、中华人民共和国国家标准GB/T14702一93饲料中维生素B6测定方法MethodfordeterminationofvitaminB6infeed1主题内容与适用范围本标准适用于配合饲料，预混合饲料，浓缩饲料中所添加维生素B。的测定。测定范围为0.08-3.5pg/ml2原理用水提取，在pH7条件下，用荧光法测定维生素B-3试剂和溶液除特殊规定外，本标准所用试剂均为分析纯，水为蒸溜水或相应纯度的水。11pH7缓冲液称取29.3023g磷酸氢二钠(Na,HPO,·12H20,GB1263)和3.8115g柠檬酸(C,H,O·HBO,HG

2、B3296)于100mL容量瓶中，用煮沸后冷却的水，溶解并定容至刻度。混匀备用。3.2维生素B。标准贮备溶液称取40mg(中国药典参照标准)维生素Bs，或复合维生素(中国药典参照标准)B,40mg,B,100mg,B,50mg(精确至0.0001g)于100mL容量瓶中，加水溶解定容至刻度，此液1ml一含400pg的维生素Bso3.3维生素B。标准工作溶液吸取(3.2)贮备液1mL于100mL容量瓶中加水稀释至刻度，混匀，此液1ml含4pg的维生素B。4仪器设备4.1荧光分光光度计;4.2分析天平感量0.0001go4.3实验室用器皿容

3、址瓶1000mL,100mL,50ml,,25mLa刻度移液管10mL,5mL,lml。5分析步骤5门试样的选取和制备选取有代表性的试样，粉碎通过。.28mm孔筛，用四分法缩减至100g，密封保存，以防试样维生素B,变化或变质。5.2测定步骤国家技术监督局1993一11一06批准1994一06一01实施GB/T14702一935.2.1维生素B。的提取称取试样(配合饲料，浓缩饲料，预混合饲料)0.5-2g,(精确至。.0001g)于100ml容址瓶中，加水溶解后，定容至刻度，振荡1-2min,静置待沉清，或离心(400r/min)10m

4、in5.2-2试样的测定移取试样的上清液1mL(-<40pgVB,)于25mL容量瓶中，加入(3.1)pH7缓冲液至刻度，混匀，用1cm石英比色杯，置入荧光分光光度计内，于激发波长326nm、发射波长395nm测定其荧光强度同时做空白试验。5.2.3工作曲线的绘制取0.00,0.50,1.00,1.50,2.00,2.50mL维生素B,标准S作液(3.3)分别于25mL容量瓶中，加入pH7缓冲液(3.1)至刻度，混匀，用1cm石英比色杯，置入荧光分光光度计内，于激发波长326nm,发射波长395nm测定其荧光强度，以荧光强度为纵坐标，维

5、生素B。量为横坐标，绘制工作曲线。6分析结果计算和表述维生素B。的含量(mg/kg)按下式计算:VB,(mg/kg)=MXD/WX(1000/1000)=MXDIW式中:M—工作曲线上查得维生素B。含量，pg/mL;W—试样的质量，9;I)—试样的总体积，mLe了允许差7.1每个试样称取两份平行测定，取算术平均值为测定结果并保留两位小数。7.2维生素B6含量少于40mg/kg以下，平行测定结果相对差值不大于10%，维生素B。含量大于40m盯kg的平行测定结果相对差值不大于5%0附加说明:本标准由全国饲料工业标准化技术委员会提出。本标准由

6、国家饲料质量监督检验中心(北京)负责起草。本标准起草人刘素云、张瑜、赵兰芝。