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时间:2019-07-11
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1、1.红细胞形态检查:方法、正常及常见异常红细胞形态。2.血细胞比容测定:概念、测定方法、参考值及临床意义。3.网织红细胞计数:概念、计数方法、参考值及临床意义。红细胞形态检查方法先低倍镜:再用油镜:制备血涂片染色镜检检查区域:体尾交界处,细胞分布均匀,红细胞紧密排列但不重叠。估计细胞分布和染色情况,浏览全片是否存在异常细胞。观察红细胞形态。红细胞的形态检查1.正常形态2.大小异常3.染色异常4.形态异常5.结构异常双凹圆盘形,细胞大小相似,平均直径7.2μm(6~9.5μm),厚约2μm;瑞氏染色后呈淡粉红色,中央1/3为生理性淡染区;无核,胞质内无异
2、常结构。外周血正常红细胞形态红细胞大小异常红细胞大小不均(anisocytosis)小红细胞(microcyte):大红细胞(macrocyte):巨红细胞(megalocyte):直径小于6μm直径大于10μm直径大于15μm正常红细胞巨红细胞小红细胞正色素性(normochromic)红细胞染色异常低色素性(hypochromic)高色素性(hyperchromic)嗜多色性(polychromatic)红细胞形态异常球形红细胞椭圆形红细胞靶形红细胞镰状红细胞口形红细胞棘状红细胞半月形红细胞泪滴形红细胞染色质小体(Howell-Jollybody)
3、红细胞结构异常卡-波环(Cabotring)嗜碱性点彩红细胞(basophilicstipplingcell)有核红细胞(nucleatederythrocyte)红细胞在全血标本中所占体积的比值。一.概念二.常规测定方法Wintrobe法微量离心法红细胞间残留血浆较多,故结果偏高。快速,用血少,残留血浆较少。(首选常规方法)血细胞比容测定hematocrit,Hct,Ht,HCT(血液分析仪法)packedcellvolume,PCV(离心法)(一)原理(二)试剂(三)器材干燥EDTA-K2或肝素钠Wintrobe管(温氏管)离心机Wintrobe法
4、(温氏法)血细胞比容测定温氏管1.静脉血2ml加入抗凝瓶中,充分混匀。(四)方法2.吸取抗凝血插入温氏管底部,将血注入至刻度“10”处,塞紧瓶口。3.相对离心力2264g,离心30min,读数,再以同样速度离心10min,至红细胞层高度不再下降为止。4.读出红细胞层柱高的毫米数,乘以0.01,即为血细胞比容测定值。Wintrobe法(温氏法)血细胞比容测定离心后血液被分为5层:血浆层血小板层白细胞和有核RBC层还原红细胞层带氧红细胞层读数层Wintrobe法(温氏法)血细胞比容测定1.所用器材必须清洁干燥。(防溶血)(五)注意事项2.不能使用改变RBC
5、体积的抗凝剂。3.抗凝血应塞瓶口,防血浆蒸发。4.离心的条件必须恒定。Wintrobe法(温氏法)血细胞比容测定5.标本溶血或红细胞形态异常需注明。三.参考值Wintrobe法:男0.40~0.54女0.37~0.47微量法:男0.47±0.04女0.42±0.05血细胞比容测定四.临床意义1.与RBC测定的临床意义相似。2.全血粘度的主要因素之一。Hct增高可致全血粘度增加。3.用于红细胞平均值的计算。血细胞比容测定红细胞发育过程原红早幼红中幼红晚幼红网织红红细胞Ret是晚幼红脱核后到完全成熟红细胞间的过渡细胞,因其胞浆内残存嗜碱性物质,经煌焦油蓝或
6、新亚甲蓝等活体染色,呈蓝色的网状或颗粒状结构。网织红细胞概念(reticulocyte,Ret,RET)Ⅰ型:丝球型外周血中无Ⅱ型:网型外周血少见Ⅲ型:破网型外周血可见Ⅳ型:点粒型外周血多见网织红细胞形态与分型一.试剂5g/L新亚甲蓝N溶液10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液(试管法)10g/L煌焦油蓝乙醇溶液(玻片法)二.方法玻片法试管法网织红细胞手工法网织红细胞计数玻片法1.染液1滴置玻片一端,自然干燥备用。2.取血1滴至干燥的染料上,用推片角混匀,将两玻片粘合。3.5~10min后,推血片。方法评价:水分易蒸发,故不易涂片;染色时间短,结果偏低。网织红
7、细胞手工法网织红细胞计数4.油镜下计数至少1000个RBC中的Ret数。试管法1.染液2滴加入小试管,加血2滴,混匀。2.室温下染色15~20min。3.混匀,取1小滴制薄血片,干后计数。方法评价:水分不易蒸发;染色时间长;可重复推片复查。(手工法的推荐方法)网织红细胞手工法网织红细胞计数三.注意事项1.玻片法中,应待玻片上煌焦油蓝乙醇液中乙醇完全挥发后才能加血。2.染色时间必须充分。3.计数区域一般选择红细胞分布均匀的部位,兼顾边缘和尾部。4.试管法染液与血液以1:1为宜。网织红细胞手工法网织红细胞计数ABMiller窥盘(置于目镜中)计数小正方形中
8、的红细胞数,计数大正方形中的网织红细胞数。Ret%=×100%A格内的RBC数×9B格内的Re
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