植物营养研究法6章其它研究法

《植物营养研究法6章其它研究法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、第六章植物营养的其它研究方法第一节植物营养的土壤酶学研究法一．酶的概念及类型酶：具有专性催化作用的蛋白质，活的生物体合成类型——国际酶学委员会分类1．氧化还原酶类2．转移酶类3．水解酶类4．裂解酶类5．异构酶类6．连接酶类二．土壤酶（一）土壤酶的种类目前已知的存在于生物体中的近2000种酶类中，约有50余处累积于土壤中。研究最多的是：氧化还原酶类、水解酶类研究较少的是：转移酶类、裂解酶类不曾涉及的是：异构酶、连接酶（二）土壤酶来源微生物产生的胞外酶植物根系溢泌的酶土壤动物溢泌的酶（三）存在部位胞外酶：土壤溶液、土壤固体、土壤有机体吸附土壤胞内

2、酶：微生物、根、动物中（四）土壤酶研究的应用1．评价土壤肥力水平和供肥能力土壤潜在肥力——酶活性）——植物有效养分三者关系密切。土壤肥力主要物质基础——土壤有机质，是土壤酶底物的主要给源。2．诊断植物营养元素丰缺土壤缺P——磷酸酶活性高土壤施P——磷酸酶活性低3．鉴别土壤类型1964年俄国科学家用脱氢酶鉴别钙质土，得出酶活性顺序为：黑钙土>栗钙土>棕钙土。4．净化土壤、减轻危害：氰氨化钙形成氰酸铵的分解——氰基酶；农药残留物控制脲酶，减少NO3、NO2积累。5．调控土壤酶活性，提高肥料利用率：脲酶活性——尿素分解快则氨挥发，慢则尿素淋失。三．

3、土壤酶的研究方法1．土样采集：代表性，根际内外酶活性不同2．土样贮藏：一般认为：新鲜土样酶活性大于风干样；土样一经风干，再延长存放时间，酶活性失活较小；恒温贮藏（4度）或冻藏（-5度——-40度）酶活性失活较小，冷冻最好；田间湿度条件下贮藏样品，酶活性更能反映实际。3．土样称量：一般1-5克，酶活低的10克。酶反应速度随土样称量呈现线性增加，过少测定不准确。（二）土壤样品微生物的纯化使土壤酶活性与微生物活性区分开来。理想方法是：有效抑制微生物增殖生长和生理过程，不破坏微生物的细胞，防止酶渗出，也不破坏土壤理化性质，常用以下两种途径：1．化学灭

4、菌剂：常用适当浓度的甲苯，其作用为抑制微生物增殖，导致某些微生物质壁分离或胞溶，也可能引起某些酶活性升高或降低。甲苯的适当浓度，土样重的20%，土壤悬浮液体积的5-10%其它灭菌剂：乙烯氧化物、苯、丙酮、醚、氯仿等。2．高能电离辐射：X射线或r射线，使微生物失去增殖能力，土壤理化性质改变甚微，土壤酶活性影响较小，是一种较好的灭菌法，但需特殊设备，代价较高。（三）酶作用基质与酶促反应环境1．基质：酶活性是用酶促基质转化的数量或产物的数量来表示种类：选择一种酶作用的底物，标准方法中每次测定选用同一底物，以便比较。加入基质以保证酶促反应期间基质转化

5、速度保持恒定为准，即反应结束时基质有一定剩余，但不能太多2．酶促反应环境：环境条件影响酶活性，为使测得酶活性最大，须使环境条件最适。（1）各种酶要求的pH条件不同，选择适宜pH缓冲体系。（2）温度：目前一般采用30-37度。一定温度范围内酶反应速度随温度升高而加快，超过一定温度，酶活性减弱或变性。（3）培养时间：一般几小时到几昼夜。原则：反应时间内酶种反应速度恒定过长：基质浓度下降，产物增加，酶本身变化过短：基质反应量少而无法测定。中国农科院：测定土壤蔗糖酶等一般以24小时为宜（四）对照的设置1．无酶对照：目的是校正土壤非酶促反应造成的影响，

6、土壤中某些可变价阳离子（Fe、Cu、Mn）可能引起无机催化剂的作用，尤其是氧化还原酶测定中。方法：干热处理：180度2-3小时湿热处理：2atm蒸煮1小时化学处理：化学抑制剂如重金属盐、氰化物等。2．无基质对照：消除土壤中本来存在的与基质或产物类似物质的影响。3．无土对照：消除基质自身分解的影响。（五）酶活性表示方法通常：单位时间单位土重，一定温度下酶促反应产物数量。第二节植物营养诊断方法一．养分供应量与产量关系二．植物营养诊断的主要方法（一）形态诊断：缺素时，形态上：失绿、色斑、坏死、畸形等。老叶、新叶、顶叶叶缘、叶肉、叶脉株高、叶片大小、

7、根系大小（二）化学诊断分析植物、土壤的元素含量与事先经过试验研究拟定的临界含量比较，或者以异常的与正常的直接进行比较而作出丰缺判断。比较：对植物而言，一般说，植物分析结果对作物营养状况的反映是最直接的，所以是判断营养丰缺的最可靠依据。对土壤分析：土壤分析结果，一般与作物营养状况有密切关系，但其相关程度不如植株分析结果高原因：作物营养的缺乏受多种因素影响；土壤养分含量；根系吸收养分的环境条件1．植物组织速测诊断采取对元素丰缺反应敏感的某种组织，利用化学的呈色反应作快速测定，结果一般分级：极缺、缺、一般、丰富应用：在生产者急于知道答案以便迅速采取

8、补救措施情况下，可以避免大部分凭臆测行事，以致贻误生产。对常规生产的细胞管理也有指导意义。2．叶片分析诊断：以叶片常规分析结果与事先制订的临界作比较，来判断营养元素