植物组织培养第三章植物器官和组织培养

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1、第四章植物的器官和组织培养陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5本章内容提要：一、器官和组织培养基本程序二、植物营养器官培养三、植物繁殖器官培养四、植物组织培养陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5概念什么是器官培养？是指对植物某一器官的全部或部分或器官原基进行离体培养技术分为：营养器官和繁殖器官培养。包括:根、茎、叶、花、果实、种子。什么是组织培养（即狭义的）？包括分生组织、表皮组织、薄壁组织等及产生的愈伤组织的培养陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5第一节器官和组织培养基本程序包括以下几方面：无菌外植体的获得初代培养物的建立形态发生和植株再生

2、培养物的观察记录。陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/51、茎尖、茎段、叶片的灭菌茎尖、茎段及叶片等的消毒：用清洁剂清洗75%酒精浸泡10-20min无菌水洗2-3次或Naclo或升汞泡10-15min无菌水洗3-4次2、根、块茎、鳞茎的灭菌（灭菌较困难）自来水冲洗纯酒精漂洗升汞浸5-10min或2%Naclo液浸10-15min无菌水洗3次，待用。一、无菌外植体的获得陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/53、花蕾的灭菌自来水冲洗70%酒精浸泡数秒钟无菌水洗2-3次漂白粉上清液浸10min无菌水洗2-3次，待用。4、果实、种子的灭菌果实和种子的消毒：自来水冲洗1

3、0-30min70%酒精漂洗2%Naclo液浸10min无菌水2-3次取出种子培养，待用。陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5二、初代培养物的建立1、无菌环境外植体处理：表面灭菌+抗生素环境要清洁。无菌的范畴：经过高温灼烧或蒸煮过后的物体，或经其它物理的或化学灭菌方法处理过后的物体，是无菌的。用于无菌操作的器械采用灼烧灭菌陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/52、规范操作3、条件合适培养基种类、激素种类与浓度、其他附加物、外植体类型等要合适。无菌操作陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5三、形态发生和植株再生体细胞胚外植体愈伤组织植株具根茎器官器

4、官分化单极器官先茎后根先根后茎陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5四、培养物的观察记录1、愈伤组织诱导率（%）产生愈伤组织的外植体数/外植体总数2、胚状体的诱导率（%）产生胚状体的外植体数/外植体总数3、芽的诱导率——芽分化率（%）产生芽的外植体数/外植体总数4、根诱导率（%）发根芽数/培养芽数陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5第二节植物营养器官培养一、根段培养是以根为外植体进行的离体培养1、根无性系的建立根的直接增殖根的数量增加，形成主根与侧根之分根的间接增殖愈伤组织植株再生根的形成过程以不定根的方式进行陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/

5、52、影响离体根发生和生长的因素a培养基的种类多采用MS，½MS，B5，White等基本培养基b生长调节剂多使用NAAIBAc植物材料同植物、不同基因型、不同部位、不同年龄d培养方式固体、固—液培养基e光照和温度fpH陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5二、植物茎段培养茎段培养指不带芽和带1个以上定芽或不定芽。包括：块茎、球茎在内的幼茎切段的无菌培养。主要目的：快繁；其次也可探讨茎细胞的生理特点，以及进行育种上的筛选突变体的过程。优点：培养技术简单易行，繁殖速度较快；芽生芽方式增殖的苗木质量好，且无病，性状均一；解决不能用种子繁殖的无性繁殖植物的快速繁殖问题等。陈传红制作w

6、ww.ecit.edu.cn2007/5植物的茎陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5茎段培养过程健康植株上选健壮的枝梢去叶片用自来水冲洗再生1%次氯酸钠0.1%升汞75%酒精1分钟MS培养基陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5茎段培养在适当条件下可能形成：单苗丛生芽愈伤组织完整植物茎段能否增殖受到以下情况影响：生长素/分裂素的比值高有形成愈伤组织的趋势低易形成丛生芽陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5月季花茎段培养陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5蝴蝶兰腋芽萌发陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5三、叶培养以

7、叶器官为外植体进行的离体培养。叶器官包括：叶原基、叶柄、叶鞘、叶片、叶肉、子叶。再生成植株的方式：直接诱导形成芽，先诱导形成愈伤组织，再经愈伤组织分化成植株。陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/51．叶形椭圆形扇形心形陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5叶的器官培养陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5陈传红制作www.ecit.edu.cn2007/5方法：1）外植体消毒：幼