《蛋白质的化学》PPT课件

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1、1.维持蛋白质的一级结构的化学键有_____和_____2.维持二级结构的化学键主要是____键3.维持三级结构和四级结构的化学键是___键,其中包括_____、____、____和__.4.蛋白质的二级结构最基本的有两种类型,它们是和。5.什么是蛋白质的一级结构?什么是蛋白质的空间结构?蛋白质的空间结构与其生物功能有何关系?空间结构决定生物功能,具有完整空间结构的蛋白才有生物功能,空间结构被破坏,其生物功能就会变化甚至丧失。8/12/202111、蛋白质一级结构的定义2、蛋白质二级结构的四种基本形式3、维持蛋白质一级结构的化学键4、维持蛋白质高级结构的化学键8/1

2、2/20212一、蛋白质的两性电离与等电点二、大分子亲水胶体性质三、蛋白质的变性四、蛋白质的沉淀五、蛋白质的颜色反应六、紫外吸收与定量第三节蛋白质的理化性质8/12/20213一般物理性质:无色晶体、有味(甜、鲜、苦)或无味,不同强度溶于水、稀酸、稀碱,但不溶于任何有机溶剂。8/12/20214一、蛋白质的两性电离与等电点1、两性电离:2、等电点:大多数人体蛋白质的pI(PH5.0)8/12/20215PI的用途:分离、纯化和鉴定蛋白质制剂当PH=PI时:溶解度最小,最易沉淀。当PH≠PI时:电泳:可以将蛋白质进行分离纯化。已知某蛋白的PI=5,电泳缓冲溶液的PH为

3、10,蛋白往哪一方向移动()A.正极B.负极C.不动8/12/20216电泳:指蛋白质在一定pH情况下带电荷,在电场中能由电场一极向另一极移动的现象。游动方向和快慢与蛋白质电荷的性质数目分子形状有关。8/12/20217二、大分子亲水胶体性质1、大分子:蛋白质分子直径1-100nm,蛋白质是分子量很大的生物分子.2、亲水:外裹电荷层、水化层3、胶体颗粒:丁达尔现象;不易透过半透膜,可用透析的方法纯化蛋白质。8/12/202188/12/202191、概念:蛋白质在某些理化因素的作用下,其空间结构受到破坏,从而改变其理化性质,并失去其生物活性,称为变性。2、因素:化学

4、因素:强酸、强碱、尿素、胍、去污剂、重金属盐、浓乙醇、三氯醋酸、苦味酸等等物理因素:加热(70-100℃)、剧烈震荡或搅拌、紫外线或X射线、超声波等三、蛋白质的变性8/12/2021103.变性的本质:次级键断裂,空间结构被破坏8/12/2021114.变性作用的特征:生物活性丧失;某些理化性质改变(溶解度降低,粘度增加,结晶能力消失,易被蛋白酶水解。)5.变性作用的应用举例:变性因素应用于消毒及灭菌,制备、保存蛋白质制剂需防止变性。8/12/2021126.复性:去除变性因素后,有些变性程度较轻的蛋白质仍可恢复或部分恢复其原有的构象和功能。许多蛋白质的变性为不可逆

5、变性。变性的蛋白质易于沉淀而沉淀的蛋白质不一定发生变性。8/12/202113核糖核酸酶复性变性8/12/202114四、蛋白质的沉淀⑴概念:蛋白质分子聚集而从溶液中析出的现象⑵关键:水化膜的破坏,电荷的消失⑶方法:a、盐析(saltingout):(NH4)2SO4、NaCl、Na2SO4低盐浓度可使蛋白质溶解度增加,称为盐溶作用。高盐浓度因破坏蛋白质的水化层并中和其电荷,促使蛋白质颗粒相互聚集而沉淀,称为盐析作用。盐析不会引起蛋白质发生变性。利用盐析可将不同蛋白质分离开来,称分级沉淀8/12/202115b、有机溶剂沉淀法:乙醇、甲醇、丙酮等c、生物碱试剂法:P

6、HPI时,Pb2+,Hg2+,Ag+,Cu2+8/12/202116一、蛋白质的两性电离与等电点二、大分子亲水胶体性质三、蛋白质的变性四、蛋白质的沉淀五、蛋白质的颜色反应六、紫外吸收与定量七、蛋白质的免疫学特性第三节蛋白质的理化性质8/12/202117五、蛋白质的颜色反应(1)茚三酮反应蛋白质+茚三酮试剂蓝紫色复合物8/12/202118(2)双缩脲反应:蛋白质与碱性硫酸铜作用,生成紫红色的复合物(3)酚试剂反应:酪氨酸、色氨酸的反应(还原反应)酚试剂:磷钼酸-磷钨酸生成蓝色物质。用比色法可对蛋白质定性和

7、定量测定8/12/202119六、紫外吸收与定量大部分蛋白质均含有带芳香环的苯丙氨酸、酪氨酸和色氨酸。这些氨基酸在280nm附近有最大吸收。因此,大多数蛋白质在280nm附近显示强的吸收。利用这个性质,可以对蛋白质进行定量鉴定。8/12/2021208/12/202121七、蛋白质的免疫学特性当一类外来的被称为抗原的物质,如多糖、核酸和蛋白质等侵入机体时即引起抗体的产生,这就是所谓免疫反应。抗体就是免疫球蛋白。8/12/202122立体结构模型8/12/202123一、蛋白质的两性电离与等电点二、大分子亲水胶体性质三、蛋白质的变性四、蛋白质的沉淀五、蛋白质的颜色

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