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《香菇木屑菌糠中5种饲用添加酶活性的测定与分析》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、32中国饲料2007年第2期添加剂香菇木屑菌糠中5种饲用添加酶活性的测定与分析湖南农业大学动物医学院张坚陈铁桥湖南省畜牧兽医研究所肖兵南[摘要]对香菇木屑菌糠中的纤维素酶、木聚糖酶、α-半乳糖苷酶、果胶酶、蛋白酶的活性进行研究。结果表明,纤维素酶和木聚糖酶的活性分别为16.56IU和13.86IU,α-半乳糖苷酶和果胶酶的活性较低,蛋白酶则没有活性。[关键词]菌糠;香菇;酶活性测定;酶制剂[中图分类号]S816.17[文献标识码]A[文章编号]1004-3314(2007)02-0032-04[Abstract]Theactivityofcellul
2、ase,xylanase,α-galactosidase,pectaseandproteinaseinculturalresidueofLentinusedodeswasstudied.Theresultsindicatedthattheactivityofcellulaseandxylanasewas16.56IUand13.86IU,theactivityofα-galactosidaseandpectasewaslow,andproteinasehadnoactivity.[Keywords]culturalresidue;Lentinused
3、odes;enzymeassay;feedenzymes菌糠是指以棉籽壳、锯木屑、稻草、玉米芯、甘剂均为分析纯。所用仪器为751型分光光度计、电蔗渣及多种农作物秸秆、工业废料(酒糟、醋糟、造热恒温水浴锅、离心机、电子天平等。纸厂废液等)为主要原料栽培食用菌后的废弃培需要配置的试剂有:DNS(3,5-二硝基水杨养基。上述原料经食用菌菌丝体分泌的各种酶作酸)显色液:称取酒石酸钾钠182g溶于500mL用,纤维素、半纤维素、蛋白质等大分子物质均已的蒸馏水中,于溶液中依次加入3,5-二硝基水杨被不同程度地降解。试验证明,菌糠较原培养基酸6.3g,氢氧化钠20
4、g,加热搅拌,使之溶解,再木质素可降解30%左右,粗纤维降低40%~加入重蒸酚5g,无水亚硫酸钠5g,搅拌使之溶70%,而粗蛋白质可提高25%~40%,菌糠氨基解,冷却后定容至1L,贮于棕色瓶中,放置1周酸含量为0.05%~0.06%,菌类多糖及Fe、Ca、后使用。Zn、Mg等矿物质含量也较丰富(刘晓牧等,2000)。福林试剂:于1000mL磨口回流装置内,加菌糠经适当加工处理,即可做成饲料或添加剂,替入钨酸钠(Na2WO4·2H2O)50g,钼酸钠(NaMoO4·代部分粮食,降低生产成本。随着食用菌生产的发2H2O)12.5g,水350mL,85%
5、磷酸25mL,浓盐酸展,菌糠已成为数量十分可观的重要饲料资源。本50mL,文火回流10h,加入硫酸锂(LiSO4)75g,试验从香菇菌糠中提取酶液,并测定和分析了其蒸馏水25mL,混匀取去冷凝器,加入几滴液体中几种酶的活性,从一个全新的角度,来探讨用菌溴,再煮沸15min,以驱逐残溴及除去颜色,溶液糠饲养动物的价值和效果,同时也为菌糠中的酶呈黄色。冷却后定容至500mL,过滤,置于棕色瓶在饲料中的开发应用提供试验依据。中保存。此溶液使用时加2倍蒸馏水稀释。1材料与方法pH4.6、0.1mol/L的醋酸-醋酸钠缓冲液:取1.1菌糠香菇木屑菌糠,为收菇后
6、从农户那里49mL0.1mol/L醋酸钠溶液和51mL0.1mol/L获得。醋酸溶液,混合均匀即可。pH5.5、0.05mol/L柠檬1.2仪器及试剂除另有说明外,试验中所用试酸缓冲液:分别称取柠檬酸3.125g,柠檬酸钠2007年第2期中国饲料3310.33g,用蒸馏水溶解,并定容至1L,4℃冰箱保1.4试验方法存。1.4.1标准工作曲线。1)葡萄糖标准曲线的绘制:1%纤维素酶(CMC)缓冲液:称取1.000g羧采用DNS法(堵苑苑,1998;Miller,1958)。取试管甲基纤维素钠,加入pH4.6的醋酸-醋酸钠缓冲6支,编号,按表1用吸管准确
7、吸取500μg/mL标液,水浴加热使之溶解,冷却后定容至100mL。准葡萄糖溶液与蒸馏水混匀,即得不同浓度的标0.5%木聚糖溶液、α-半乳糖苷溶液、果胶溶准葡萄糖液。另取试管6支,编号,用吸管分别吸液:分别称取0.500g木聚糖、α-半乳糖苷(棉籽取上述试管各种浓度的标准葡萄糖溶液2.5mL,糖)、果胶,加入pH5.5的柠檬酸缓冲液,水浴加对号加入各试管(“0”管内加入2.5mL蒸馏水),热使之溶解,冷却后定容至100mL,4℃冰箱保然后于各试管中加入DNS试剂2.5mL,摇匀,置存。于沸水浴中煮沸5min。取出置于冷水浴中冷却,1%酪蛋白溶液:称取
8、干酪素1.000g,加入用蒸馏水稀释3倍,在751型分光光度计上比色。0.1mom/L氢氧化钠20mL,在水
