香菇木屑菌糖中5种饲用添加酶活性的测定与分析

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1、万方数据中国饲料2007年第2期吞颤未屑菌糖审5神饲用暴加馥活悭曲测定与分辨湖南农业大学动物医学院张坚陈铁桥湖南省畜牧兽医研究所肖兵南【摘要】对香菇木屑茵糠中的纤维素酶、木聚糖酶、d一半乳糖苷酶、果胶酶、蛋白酶的活性进行研究。结果表明，纤维素酶和木聚糖酶的活性分别为16．56Iu和13．86Iu，o【一半乳糖苷酶和果胶酶的活性较低，蛋白酶则没有活性。[关键词】茵糠；香菇；酶活性测定；酶制剂【中图分类号]S816．17[文献标识码]A【文章编号]1004—3314(2007)02—0032—04【Abstract】Theactivityofcellulas

2、e，xylanase，o【一galactosidase，pectaseandpmteinaseinculturalresidueof￡em抚wedb如swasstudied．TheIesultsindicatedthattheactivityofcellulaseandxylanasewas16．56IUand13．86IU，theactivityof仪一#ralactosidaseandpectasewaslow，andproteinasehadnoactivity．[Keywords】cultumlresidue；Len￡in船edDdes；enzy

3、meas8ay；feedenzymes菌糠是指以棉籽壳、锯木屑、稻草、玉米芯、甘蔗渣及多种农作物秸秆、工业废料(酒糟、醋糟、造纸厂废液等)为主要原料栽培食用菌后的废弃培养基。上述原料经食用菌菌丝体分泌的各种酶作用．纤维素、半纤维素、蛋白质等大分子物质均已被不同程度地降解。试验证明，菌糠较原培养基木质素可降解30％左右，粗纤维降低40％～70％．而粗蛋白质可提高25％～40％，菌糠氨基酸含量为0．05％～0．06％，菌类多糖及Fe、Ca、Zn、Mg等矿物质含量也较丰富(刘晓牧等，2000)。菌糠经适当加工处理，即可做成饲料或添加剂，替代部分粮食，降低生产成

4、本。随着食用菌生产的发展．菌糠已成为数量十分可观的重要饲料资源。本试验从香菇菌糠中提取酶液，并测定和分析了其中几种酶的活性，从一个全新的角度，来探讨用菌糠饲养动物的价值和效果，同时也为菌糠中的酶在饲料中的开发应用提供试验依据。1材料与方法1．1茵糠香菇木屑菌糠。为收菇后从农户那里获得。1．2仪器及试剂除另有说明外，试验中所用试剂均为分析纯。所用仪器为751型分光光度计、电热恒温水浴锅、离心机、电子天平等。需要配置的试剂有：DNS(3，5一二硝基水杨酸)显色液：称取酒石酸钾钠182g溶于500mL的蒸馏水中，于溶液中依次加入3，5一二硝基水杨酸6．3g，氢

5、氧化钠20g，加热搅拌，使之溶解，再加入重蒸酚5g，无水亚硫酸钠5g，搅拌使之溶解，冷却后定容至1L，贮于棕色瓶中，放置1周后使用。福林试剂：于1000mL磨口回流装置内，加入钨酸钠(Na2W04·2H20)50g，钼酸钠(NaMoO。·2H20)12．5g，水350mL，85％磷酸25mL，浓盐酸50mL，文火回流10h，加入硫酸锂(LiS04)75g，蒸馏水25mL，混匀取去冷凝器．加入几滴液体溴，再煮沸15min，以驱逐残溴及除去颜色，溶液呈黄色。冷却后定容至500mL，过滤，置于棕色瓶中保存。此溶液使用时加2倍蒸馏水稀释。pH4．6、0．1mol

6、，L的醋酸一醋酸钠缓冲液：取49mLO．1moⅥ。醋酸钠溶液和51mL0．1mol，L醋酸溶液，混合均匀即可。pH5．5、O．05mol／L柠檬酸缓冲液：分别称取柠檬酸3．125g，柠檬酸钠万方数据2007年第2期中国饲料10．33g，用蒸馏水溶解，并定容至1L，4℃冰箱保存。1％纤维素酶(CMC)缓冲液：称取1．000g羧甲基纤维素钠，加入pH4．6的醋酸一醋酸钠缓冲液，水浴加热使之溶解，冷却后定容至100mL。0．5％木聚糖溶液、仪一半乳糖苷溶液、果胶溶液：分别称取0．500g木聚糖、仅一半乳糖苷(棉籽糖)、果胶，加人pH5．5的柠檬酸缓冲液，水浴加

7、热使之溶解，冷却后定容至100mL，4℃冰箱保存。1％酪蛋白溶液：称取干酪素1．ooOg，加入0．1mo“L氢氧化钠20mL，在水浴中加热使之溶解，然后用pH7．2磷酸缓冲液定容至100mL，4℃下保存。500¨∥mL标准葡萄糖溶液、标准木糖溶液、标准半乳糖溶液、标准半乳糖醛酸溶液：分别称取干燥至恒重的分析纯葡萄糖、分析纯木糖、分析纯半乳糖、分析纯半乳糖醛酸0．5000g，加蒸馏水溶解，稀释定容至1L。100斗{；，mL酪氨酸溶液：精确称取在105℃烘箱中烘至恒重的酪氨酸0．1g，逐步加入0．1mol／L盐酸使溶解，加蒸馏水定容至100mL，其浓度为10

8、00“∥mL。再吸取此液10ml，以蒸馏水定容至100mL，即配成100斗{；／