血虚证小鼠模型造模方法及四物汤的干预作用

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1、血虚证小鼠模型造模方法及四物汤的干预作用2002207229刘鲁炯02医（七）摘要：血虚证是中医临床上常见证候，多由生血乏源、失血过多、肾精亏损、大病之后等引起。环磷酰胺、乙酰苯肼是对小鼠进行血虚证造模的常用方法。本实验旨在比较血虚证不同造模方法的优劣，评价中药复方四物汤的疗效。关键词：血虚证；造模；环磷酰胺；乙酰苯肼；四物汤1、材料与方法：1实验材料1.1药物或试剂乙酰苯肼（APH，为白色粉末状固体，用时配制成2％溶液）、环磷酰胺粉针剂：200mg×10支×1盒（用时配成10mg/ml溶液）、无水乙醇500ml×1瓶、0.9%氯化钠溶液50

2、0ml×1瓶或250ml×1瓶。Bouin氏液（自配）1.2仪器或设备50ml/100ml柱形小烧杯各2个，50ml/100ml量筒各1个，10ml刻度吸管2个，吸球2个，1ml、5ml一次性注射器数支，玻璃棒1根，标签纸，锡箔纸，小鼠灌胃针2支。75ml100ml柱形小烧杯各1个，SQF-EA体视显微镜，以及自制显微镜与数码相机接口；MP200B型电子天平或ACS-6A型计价电子秤；NIKONCoolpix4500数码相机；YLS-13A大小鼠抓力测量仪；自制光源装置：3200K-250W摄像专用光源;数字WMY-01型温度计；相机三脚架，

3、划有小方格的透明薄膜纸及改造的小鼠移动笼具等1.3实验对物：昆明种小鼠40只。体重(25±2)g，雄性，上海中医药大学实验动物中心提供。2、实验方法2.1．动物分组随机分为正常对照组A、环磷酰胺模型对照组B、乙酰苯肼模型对照组C、乙酰苯肼四物汤治疗对照组D等4组，每组10只。分笼饲养于内铺垫料的塑料笼。2.2.造模及给药方法造模时间及给药2007.3.14（第一天）2007.3.15（第二天）2007.3.17（第四天）组别腹腔注射生理盐水0.25ml腹腔注射生理盐水皮下注射生理盐水A皮下注射生理盐水0.21ml0.25ml0.225ml腹腔

4、注射10mg/ml环磷酰腹腔注射10mg/ml环磷皮下注射生理盐水B胺注射液0.25ml酰胺注射液0.25ml0.225ml皮下注射生理盐水0.21ml皮下注射2％乙酰苯肼溶腹腔注射生理盐水皮下注射2％乙酰苯肼C液0.21ml0.25ml溶液0.225ml腹腔注射生理盐水0.25ml皮下注射2％乙酰苯肼溶腹腔注射生理盐水皮下注射2％乙酰苯肼D液0.21ml0.25ml溶液0.225ml腹腔注射生理盐水0.25ml2.3、四诊检测3.14，3.17，3.21共观察3次，分别测量体重、腋温、爪尾r、抓力、饮水、摄食、旷场。2.4、病理组织切片的制

5、作12.5、舌苔，小肠、胃粘膜舌、胸腺、脾、胃、肝、十二指肠等6种脏器读片3、实验结果（1）四诊：体重、腋温、爪尾r、抓力、饮水、摄食、旷场外在表观：14号开始造模，16号开始乙酰苯肼组和四物汤小鼠爪尾肉眼可辨颜色变白，爪形变瘦。环磷酰胺组19号颜色变化仍不明显，但毛发稀疏。到21号环磷酰胺组爪尾才出现肉眼可辨的颜色变白，爪形变瘦。体重变化图摄食饮水35121230101025正常组8正常组8正常组20环磷酰胺组G环磷酰胺组环磷酰胺组乙酰苯肼6615组乙酰苯肼组乙酰苯肼组四物汤组四物汤组1044四物汤组252000147D摄食1摄食2饮水1饮

6、水2图1图2图3正常组、四物汤组前后3天体重均呈递增变化，前3天增幅大于后3天；正常组较四物汤组增幅大。乙酰苯肼组和四物汤组前3天体重增长比较一致，后3天体重增长低平；环磷酰胺组前3天体重增长低平，后三天增幅增大，但低于正常组。摄食、饮水曲线比较一致：后3天都较前3天下降，且环磷酰胺下降幅度大于其他三组。结论：环磷酰胺、乙酰苯肼对体重、摄食、饮水均有负面左右，且环磷酰胺负面作用大于乙酰苯肼。四物汤对抵抗体重下降有一定作用，对抵抗摄食、饮水下降未见明显作用。腋温爪R处理图尾R处理图38.51.051.04381.021137.5正常组正常组0.

7、98正常组0.95环磷酰胺组0.96环磷酰胺组度环磷酰胺组37摄氏乙酰苯肼组乙酰苯肼组0.94乙酰苯肼组四物汤组0.9四物汤组0.92四物汤组36.50.850.90.88360.80.8614714735.5DD147D图4图5图6图4：乙酰苯肼组、四物汤组后3天腋温均呈恢复变化，且较原始温度升高较大。环磷酰胺组后3天体温恢复不明显。结论：环磷酰胺、乙酰苯肼在前3天对腋温均有负面作用。后3天乙酰苯肼作用减退，体重恢2复比较明显。环磷酰胺作用比较持久，后3天体重仍然呈现低微下降趋势。图5－6：爪R、尾R变化曲线比较一致。为了更好看出趋势，对R

8、值进行处理。从处理图上可以看出：乙酰苯肼组、四物汤组变化曲线比较一致：前3天红色程度明显下降，后3天呈现恢复过程，至21号也未恢复至原来水平。环磷酰胺对爪、尾红色程