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时间:2018-11-20
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1、四种血虚小鼠模型制备方法的比较论文焦立红,任雷鸣,赵寿康【关键词】血虚模型;,,四物汤;,.freelg/kg腹腔注射;乙酰苯肼350mg/kg皮下注射;环磷酰胺120mg/kg+乙酰苯肼200mg/kg腹腔注射及环磷酰胺160mg/kg腹腔注射+乙酰苯肼60mg/kg皮下注射四种方法制造小鼠血虚模型,取血测定小鼠外周血象、观察小鼠一般情况的变化。结果4种方法可造成不同程度的小鼠血虚状态,应用四物汤治疗后,环磷酰胺160ml/kg腹腔注射+乙酰苯肼60mg/kg皮下注射所造模型组小鼠血虚状态有显著改善。结论环磷酰胺160m
2、g/kg腹腔注射+乙酰苯肼60mg/kg皮下注射所造模型小鼠最能反映中医血虚证的主要特征。关键词:血虚模型;四物汤;环磷酰胺;乙酰苯肼血虚证是中医常见证,血虚模型是应用较广的中医动物模型,但目前制造模型的方法不一,作者首先采用环磷酰胺250mg/kg腹腔注射;乙酰苯肼350mg/kg皮下注射;环磷酰胺120mg/kg+乙酰苯肼200mg/kg腹腔注射三种方法制造小鼠血虚模型,并以四物汤对后两组进行治疗.freelg/kg腹腔注射+乙酰苯肼60mg/kg皮下注射制造小鼠血虚模型,以四物汤进行治疗获得成功。实验中,部分结果与文
3、献不尽相符。现报道如下。1仪器和药品1.1动物昆明种小鼠体重18~22g,雌雄各半,(河北医科大学实验动物中心)。1.2仪器SysmexF800型全自动血液分析仪(日本)1.3药物及试剂注射用环磷酰胺(CPA上海华联制药有限公司,批号020605);乙酰苯肼(APH上海三爱思试剂有限公司,化学纯,批号20010323);生理盐水(石家庄四药股份有限公司批号03021227)。四物汤汤剂于实验前一天配制成高浓度药液,生药含量为1.25g/ml,置4℃保存。临用前用蒸馏水稀释2倍得中浓度药液,生药含量为0.625g/ml;稀释
4、4倍得低浓度药液,生药含量为0.313g/ml(相当于临床有效量)。2方法2.1三种造模方法的比较实验动物按体重随机分为正常组、模型Ⅰ组、模型Ⅱ组、模型Ⅲ组,每组各10只。模型Ⅰ组于第4天腹腔注射CPA250mg/kg,第14天眼底静脉丛采血测血常规。模型Ⅱ组于1,4,7d皮下注射APH150,100,100mg/kg,第9天眼底静脉丛采血,测血常规。模型Ⅲ组于第4,8天腹腔注射CPA60mg/kg,第7、10天腹腔注射APH100mg/kg,第14天眼底静脉丛采血测血常规。正常组于4,7,8,10d腹腔注射生理盐水,第1
5、4天眼底静脉丛采血测血常规[2~5]。2.2四物汤对乙酰苯肼350mg/kg及环磷酰胺120mg/kg+乙酰苯肼200mg/kg所致血虚小鼠的补血作用实验动物按体重随机分为9组,每组12只。1组为空白对照组,2~5组为CPA+APH(模I)模型组,6~9组为APH(模II)模型组,其中2,6组为模型对照组,其余为高、中、低剂量组,分别给予高、中、低剂量的四物汤,3~5用药组连续灌胃给药13d,对照组给等容积煮沸消毒的自来水。7~9用药组连续灌胃给药9d。造模及采血方法同前[1]。2.3四物汤对环磷酰胺160mg/kg+乙酰
6、苯肼60mg/kg所致小鼠血虚状模型的补血作用实验动物按体重随机分为5组,每组12只。1组为空白对照组,2组为模型对照组,3~5组为给药组,分别给予高、中、低剂量的四物汤。各用药组连续灌胃给药13d,对照组给等容积煮沸消毒的自来水。2~5组分别于2,5d皮下注射APH20,40mg/kg,从第5天开始连续四日每日腹腔注射CPA40mg/kg,空白对照组小鼠同时注射等容量的生理盐水。末次给药后1.5h眼底静脉丛采血测血常规。2.4统计处理本实验采用±s表示实验结果。统计分析使用SPSS11.5软件。3结果3.1三种造模方法的
7、比较3.1.1小鼠一般情况动物于造模后,开始出现不同程度的懒动、毛色干枯、少食、及尾、耳、眼苍白,模型III组最为严重,第12天开始有动物死亡,共死亡2只,其他组没有动物死亡。3.1.2小鼠外周血象的变化各模型组小鼠的红细胞、血红蛋白、红细胞压积均有不同程度降低。模型Ⅲ组降低最为明显。各组动物的血小板变化不大,只有模型III组血小板上升39%(P0.05)。除模型Ⅰ组白细胞下降外,其余二组白细胞上升(模型Ⅱ组模型Ⅲ组)结果见表1。表1三种造模方法的检验结果(略)3.2四物汤对乙酰苯肼350mg/kg及环磷酰胺120mg/k
8、g+乙酰苯肼200mg/kg所致血虚小鼠的补血作用3.2.1小鼠一般情况CPA+APH模型小鼠于造模后出现懒动、闭目,尾、耳、眼苍白,各组有4~6只动物死亡,经x2检验无显著性差异。APH模型小鼠尾、耳、眼苍白,饮食、活动尚可,给药组与模型组无明显差别。3.2.2四物汤对环磷酰胺160mg/kg+乙酰苯
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