感染性疾病病原体快速诊断

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1、感染性疾病病原体快速诊断概述感染性疾病：由某种病原体所致，通过不同方式引起人体发生感染并出现临床症状的疾病,主要表现为发热。病原体：细菌（含TB）、支原体、衣原体病毒真菌原虫等2WenenLIU感染的诊断依据临床表现：感染的全身中毒症状：畏寒、发热、皮疹等实验室常规检查：血常规：WBC、DC影像学检查：X-RAY、B超病原学检查：染色、培养血清学检查：抗原或抗体检测危重病人：临床表现、WBC+DC不典型3WenenLIU感染的分类按病原学分类细菌感染（包括结核）真菌感染病毒感染支原体、衣原体按部位分类局部感染全身感染4WenenLIU临床希望第一时间知道的信息感染或非感染细菌感染或非细菌感染

2、是结核感染或普通细菌感染酵母样真菌感染或丝状真菌感染白色假丝酵母或其他念珠菌感染曲菌感染或毛霉菌感染因为上述感染治疗方法不同5WenenLIU感染标志物细菌感染标志物白细胞计数与分类血沉C-反应蛋白（CRP）白介素-6降钙素元内毒素真菌感染标志物:G试验、GM试验结核感染证据：夹层杯、T-SPOT6WenenLIU内容提要临床常见细菌感染快速诊断技术结核分枝杆菌的快速诊断技术123临床常见真菌的快速诊断技术7WenenLIU临床常见细菌感染快速诊断技术降钙素原检测内毒素检测分子诊断8WenenLIU降钙素原(ProcalcitoninPCT)降钙素原是正常人血清中存在的含116个氨基酸组成的

3、糖蛋白，最初由甲状腺细胞产生，血清水平很低。在非感染或病毒性感染疾病时保持非常低的血清水平，在细菌性感染时含量升高，并与感染程度和预后呈正相关。PCT含量的变化稳定，并出现在疾病的早期（3-4h）。短半衰期(24h)国外把PCT作为最敏感的感染标志。正常血清水平:100-150pg/ml9WenenLIU降钙素原PCT:分子结构血清降钙素(CT)的前肽物质分子量：14.5kDa由116个氨基酸组成的糖蛋白质无激素活性11号染色体上的单拷贝基因转录甲状腺滤泡细胞降钙素原前体内源多肽酶降钙素原PCT分解细胞内特殊蛋白酶正常情况下降钙素10WenenLIULinscheidP,etalCritCa

4、reMed04;32:1715-21Endocrinology03;144:5578-84&05;146:2699-708在病毒感染时，大量产生的IFN-，将会抑制PCT的激活及产生.因此，病毒感染时，PCT的浓度将会保持在较低的水平BacterialInfection(e.g.Endotoxin)IL-6IL-611WenenLIU细菌感染后PCT快速升高KineticsofprocalcitonininiatrogenicsepsisBrunkhorstF.Metal,IntensCareMed1998,24:888-89212WenenLIUPCT来源LeftLane:正常组,在

5、不存在感染的情况下，甲状腺外CALCI表达被抑制，而主要局限于甲状腺和肺的神经内分泌细胞有一定程度的表达RightLane:脓毒症组,在细菌感染时可诱导全身各种组织多种类型细胞CALCI表达和PCT连续性释放13WenenLIUPCT动力学2-3h开始增加；6-8h快速升高；12h-48到达峰值；2-3d正常血浆浓度在＜0.05ng/ml-1000ng/ml半衰为15-20h左右,且不受肾功能影响14WenenLIUPCT检测方法快速半定量法（PCT-Q）全自动快速定量法（VIDAS)15WenenLIU快速半定量法（PCT-Q）样本：200µl血清/血浆结果：30min同胶体金免疫层析法，

6、即在标准品上结合有胶体金的小鼠单克隆抗降钙素抗体和绵羊多克隆抗降钙素抗体，待检标本加上后，示踪元素即与标本中的PCT结合，形成一个“三明治式”的复合物，然后通过发光比色判断PCT浓度当PCT浓度≥0.5μg/ml时，夹心复合物呈红色带，颜色深浅与样品中的PCT浓度成正比例，未结合的示踪物扩散到对照区，结合并产生了红色的对照带。16WenenLIU全自动快速定量法仪器：法国梅里埃公司VIDAS全自动酶联荧光分析仪及配套试剂标本要求：静脉抗凝血注意无菌操作，使用新鲜标本，如果4小时内不使用，应将标本放置-20℃保存。血浆中的PCT非常稳定，收集标本24h后，PCT浓度在室温下大约下降12％，在4

7、℃大约下降6％17WenenLIUPCT用于细菌感染和脓毒症诊断是一种非常有价值的标志物细菌感染/脓毒症诊断及严重程度判断脓毒症治疗效果监测及预后评估抗生素的有效管理18WenenLIU细菌感染诊断及严重程度判断脓毒性休克严重脓毒症系统性感染(脓毒症)局部感染正常值PCT的浓度随感染的扩散和感染严重程度的加重而升高19WenenLIU脓毒症患者治疗效果及预后监测(n=109)F.Stüber,Universi