《生物技术实践》PPT课件

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1、第19单元生物技术实践1、培养基的成分一般都含有碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）、水和无机盐等营养物质；另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质，例如：生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物,如维生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。考点1微生物的利用一、微生物的实验室培养［课题1］2、培养基种类及用途划分标准培养基种类特点用途物理性质液体不加凝固剂工业生产半固体加凝固剂，如琼脂观察微生物的运动、分类鉴定固体微生物分离、鉴定、计数化学性质天然含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基成分明确分类

2、鉴定用途选择培养基中加入某种化学物质，以抑制不需要的微生物的生长，促进所需的微生物的生长培养、分离出特定微生物(如培养酵母菌和霉菌，可在培养基中加入青霉素)鉴别根据微生物的代谢特点，在培养基中加入某种指示剂或化学药品鉴别不同种类的微生物，如用伊红—美篮培养基鉴别饮用水或乳制品中是否有大肠杆菌P211课题1教材P26旁栏信息牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基，由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质，所以可供微生物生长繁殖。基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨、NaCl和琼脂。牛肉膏为微生物提供碳源、能

3、源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素，而NaCl提供无机盐。由于此培养基多用于培养细菌，因此要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性(7.0-7.2)，以利于细菌的生长繁殖。物质牛肉膏蛋白胨NaCl琼脂水重量5g10g5g20g定溶至100mL菊花的组织培养哺乳动物细胞培养培养基类型培养环境营养物质特殊物质温度pH光照气体选一P33选三P46MS固体培养基液体培养基无菌、无毒的环境葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等矿质元素：大量元素和微量元素；有机物：维生素、甘氨酸、烟酸、肌醇、蔗糖、琼脂；血清、血浆生长素和细胞分裂素多以36.5±0.5

4、℃为宜多数为7.2-7.495％空气+5％的CO25.8左右18-22℃每日光照12h不同植物对各种条件的要求往往不同煮沸消毒法：可以杀死微生物细胞和部分芽孢。巴式消毒法：可杀死牛奶中的微生物，不会破坏其营养成分。化学药剂消毒：用75%酒精擦手，用氯气消毒水源。3、无菌技术灭菌的方法：灼烧灭菌：各种金属用具直接在酒精灯火焰的充分燃烧层灼烧。干热灭菌：用于能耐高温的、需要保持干燥的物品。★高压蒸汽灭菌：主要用于能耐高温的物品，如金属器械、玻璃、橡胶及一些药物的灭菌。4、用牛肉膏蛋白胨培养基进行大肠杆菌纯化培养的基本操作程序计算称量溶化灭菌★倒平板★(1)制备牛

5、肉膏蛋白胨固体培养基高压蒸汽灭菌4、用牛肉膏蛋白胨培养基进行大肠杆菌纯化培养的基本操作程序(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基(2)纯化大肠杆菌微生物接种最常用的方法：平板划线法和稀释涂布平板法。1.平板划线法通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。在数次划线后可以分离到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的子细胞群体称菌落。平板划线法2.稀释涂布平板法将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单

6、个的菌落。稀释涂布平板法操作过程分两个步骤：即系列稀释操作和涂布平板操作。系列稀释操作涂布平板操作微生物接种的核心是防止杂菌的污染，保证培养物的纯度例、【名师P214跟踪训练2】在微生物的实验室纯化培养时，下列操作与杀灭细菌无关的是（　　）A.接种前用肥皂洗双手，再用酒精擦拭双手B.接种前用火焰灼烧接种针（环）C.培养基在50℃左右搁置斜面D.在酒精灯的火焰旁完成倒平板的操作【解析】培养基搁置斜面其实是增大接种面积，是在无菌处理后进行的步骤，与杀灭细菌无关。C例、【名师P214跟踪训练4】（双选）下列有关微生物的接种方法的叙述，正确的是（　　）A.微生

7、物接种方法只有平板划线法和稀释涂布平板法B.平板划线法是通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作C.稀释涂布平板法中的稀释是指将菌液进行一系列梯度的稀释D.平板划线操作时，接种环在一次灭菌后可以连续划线【解析】A.微生物接种的方法很多，题中的方法是最常用的两种方法，除此之外，还有斜面接种和穿刺接种等；D.在进行平板划线时，在操作的第一步及每次划线之前都要将接种环灼烧灭菌，且划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环。BC二、土壤中分解尿素细菌的分离与计数［课题2］1.筛选菌株的原理与方法(1)原理：微生物的选择培养(2)方法：根据目的菌株对生存环境的要求，到

8、相应环境去寻找。本实验提供的选择培养基(尿素是培养基