常见病原微生物的检测

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1、第六章常见病原微生物的检测禽流感病毒布鲁氏杆菌疯牛病病毒炭疽杆菌第一节禽流感病毒禽流感是禽流行性感冒（AvianInfluenza，AI）的简称，这是一种由甲型流感病毒的一种亚型引起的传染性疾病综合征，被国际兽疫局定为Ａ类传染病，又称真性鸡瘟或欧洲鸡瘟。一、生物学特性1、形态学特点禽流感病毒是正粘病毒，流感病毒属的一个成员。禽流感病毒具有A型抗原,属于A型流感病毒,列为禽流感病毒类。本病毒颗粒呈球形、杆状或长丝状,为多形性。其直径为80－120nm,表面有一层棒状和蘑菇状的纤突，有囊膜,囊膜下面有一层膜蛋白,紧紧地包裹着呈螺旋

2、状对称的核衣壳。2、禽流感病毒的分型流感病毒分为三个不同的抗原型,即A、B、C三型。其中B、C两型仅能对人致病,A型可对人、猪、马和禽致病。依据病毒表面的两种糖蛋白血凝素〈HA〉和神经氨酸酶〈NA〉可将A型流感病毒分成若干亚型。目前已有15种HA和9种NA。3、抵抗力对热的抵抗力较低，60℃10分钟，70℃2分钟即可致弱，普通消毒剂能很快将它杀死。低温冻干或甘油保存可使病毒存活多年。4、流行病学禽流感在家禽中以鸡和火鸡及某些野禽的易感性最高，并呈急性致死性传染病。鸭、鹅及其它水禽类的易感性较差，多为隐性感染或带毒，有时也能大批

3、死亡。鸽子可带毒，但很少自然发病。5、临床症状和病理变化禽流感的症状极为复杂.根据禽类的种类〈鸡、火鸡、鸭、鹅及野鸟等〉以及病毒的亚型类别的不同，表现各种各样的变化：有最急性、急性、亚急性及隐性感染等。潜伏期一般较短，通常为4－5天，体温急剧上升至43.3－44.4.c，精神沉郁、拒食、病鸡很快陷于昏睡状态，有些颈部出现向后扭转的神经症状。病鸡多呈急性死亡，有的也可能出现呼吸道症状，咳嗽、打喷嚏，气管出现咯音，流泪等症状，羽毛蓬松，产蛋率下降，死亡率高低不等。二、诊断1、病原的分离病原的分离和鉴定可以从活体或尸体分离病毒。用棉

4、拭子法常可从活体的气管和泄殖腔中分离到病毒，可用不同大小的棉拭子擦取气管或泄殖腔，然后将拭子放入灭菌的保存液〈25－50%甘油盐水、肉汤或1000u/ml青霉素和10mg/mL链霉素的细胞维持液〉中。病料的采取时间很重要,一般在感染初期或发病急性期采取。如转为后期则因机体已形成足够的抗体而不易分离到病毒.2、病毒分离通常用鸡胚来进行。接种9－10日龄鸡胚尿囊腔，继续孵育48－72h。如材料中含有病毒时，则接种48h鸡胚死亡，但在多数情况下初代分离时鸡胚多不死，为此需将经72h未死的鸡胚置冰箱内冻死后，收集尿囊液作第二代接种。如

5、第二代接种的鸡胚仍不死亡，即可判定分离病毒为阴性。三、介绍高致病性禽流感的其他知识鉴定高致病性禽流感的标准:最近国际上评价禽流感病毒致病力的经典方法是接种易感鸡。按照国际标准，能引起接种鸡死亡75％以上的分离株，是高致病性毒株。尽管接种鸡是确定致病的“黄金标准”，但它不能反应致死率小于75%的H5或H7亚型病毒的潜在致病力。因此0IE(国际兽疫局〉根据科学家的建议,推出新鉴定标准。1任何分离到A型流感病毒，用0.2mL1:10稀释的无菌尿囊液静脉或肌肉注射8只4－8周龄易感鸡,10天内的死亡率不低于75%。2.对所有低致病的H

6、5、H7毒株,血凝素切割位点的氨基酸序列与高致病性禽流感病毒一致。3.H5、H7以外的A型流感病毒,可以致死1－5只鸡,在缺乏胰蛋白酶的情况下,能在细胞上生长形成蚀斑。禽流感的传播途径是什么？禽流感的传播有病禽和健康禽直接接触和病毒污染物间接接触两种。禽流感病毒存在于病禽和感染禽的消化道、呼吸道和禽体脏器组织中。因此病毒可随眼、鼻、口腔分泌物及粪便排出体外，含禽病毒的分泌物、粪便、死禽尸体污染的任何物体，如饲料、饮水、鸡舍、空气、笼具、饲养管理用具，运输车辆、昆虫以及各种携带病毒的鸟类等均可机械性传播。健康禽通过呼吸道和消化道

7、感染，引起发病。如何防范禽流感禽流感被国际兽疫局定为Ａ类传染病，且变异后的病毒能威胁人类健康，但各国专家们说，及时、适当的预防措施可以使人类避免感染。1、避免直接接触病禽及其排泄物、分泌物等能有效防止感染病毒。2、饲养员、屠宰工人等经常与活禽密切接触的人，必须做好保护工作，包括穿防护服、佩戴防护用具、及时接种流感疫苗、工作前后彻底消毒等。3、注重自身健康、保持良好的免疫力也是避免感染禽流感病毒的有效措施。4、不要去疫区旅游。5、食用烹熟的家禽肉、蛋不会传染禽流感。禽流感与其他流感有什么关系？除禽流感以外，常见的流感还有人流感、

8、马流感和猪流感等。禽流感与人流感和人类健康的关系非常密切。由于猪与人的种间差异较小，禽流感病毒可以在中间宿主(猪)体内与人流感病毒杂交，并产生能感染人的新的流感病毒。禽流感病毒为何消灭不了？流感病毒为了生存而不断发生变异，以逃脱动物产生的特异性抵抗力。人们为了预防禽流感也研制