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时间:2019-07-06
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1、Order:010-59822688Toll-free:800-990-6057/400-810-6057TIANGENBIOTECH(BEIJING)CO.,LTD版本号:DP1304197.将吸附柱CA2放回收集管中,12,000rpm(~13,400×g)离心2min,尽量除尽漂洗液。将吸附柱CA2置于室温放置数分钟,彻底地晾干,以防止残留的漂洗液影响下一步的实TIANgelMidiPurificationKit验。普通琼脂糖凝胶DNA回收试剂盒注意:漂洗液中乙醇的残留会影响后续的酶反应(酶切、PCR等)实验。(离心柱型)8.
2、将吸附柱CA2放到一个干净离心管中,向吸附膜中间位置悬空滴加适量洗脱缓冲液EB,目录号:DP209室温放置2min。12,000rpm(~13,400×g)离心2min收集DNA溶液。注意:洗脱体积不应小于30μl,体积过少影响回收效率。洗脱液的pH值对于洗脱效率有很大影响。若后续做测序,需使用ddH2O做洗脱液,并保证其pH值在7.0-8.5范围内,pH产品内容值低于7.0会降低洗脱效率;且DNA产物应保存在-20℃,以防DNA降解。DNA也可以用DP209-02DP209-03产品组成缓冲液(10mMTris-Cl,pH8.0)
3、洗脱。为了提高DNA的回收量,可将离心得到的溶液重新(50preps)(200preps)加回离心吸附柱中,室温放置2min,12,000rpm(~13,400×g)离心2min,将DNA溶液平衡液BL(BufferBL)30ml120ml溶胶液PN(BufferPN)25ml100ml收集到离心管中。漂洗液PW(BufferPW)15ml50ml洗脱缓冲液EB(BufferEB)15ml30ml吸附柱CA2(SpinColumnsCA2)50个200个收集管(2ml)(CollectionTubes2ml)50个200个DNA浓度
4、及纯度检测回收得到的DNA片段可用琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度计检测浓度与纯度。DNA应在OD260处有显著吸收峰,OD260值为1相当于大约50μg/ml双链DNA、40μg/ml储存条件单链DNA。该试剂盒置于室温(15-25℃)干燥条件下,可保存12个月,更长时间的保存可置于OD260/OD280比值应为1.7-1.9,如果洗脱时不使用洗脱缓冲液,而使用ddH2O,比值会偏2-8℃。2-8℃保存条件下,若溶液产生沉淀,使用前应将试剂盒内的溶液在室温放置一段时低,因为pH值和离子存在会影响光吸收值,但并不表示纯度低。间,必要时可
5、在37℃水浴中预热10min,以溶解沉淀。本产品仅供科研使用。请勿用于医药、临床治疗、食品及化妆品等用途。产品简介本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAE或TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷酸引物等杂质,回收100bp-30kbDNA片段,回收率高达80%,每个离心吸附柱每次可吸附的DNA量为10μg。使用本试剂盒回收的DNA可适用于各种常规操作,包括酶切、PCR、测序、文库筛选、连接和转化等实验。产品特点快速:整个操作过程快速方便,几十分钟即可完
6、成回收工作。多样:可以回收单链、双链DNA片段以及环状质粒DNA。高效:独特的离心柱和精心配制的缓冲液,保证最大量回收到高纯度的目的DNA。注意事项请务必在使用本试剂盒之前阅读此注意事项。1.平衡液BL的加入能够改善吸附柱的吸附能力并提高吸附柱的均一性和稳定性,消除高温/潮湿或其他不良环境因素对吸附柱造成的影响。使用前请先检查平衡液BL是否出现浑浊,如有混浊现象,可在37℃水浴中加热几分钟,即可恢复澄清。2.电泳时最好使用新的电泳缓冲液,以免影响电泳和回收效果。3.如下一步实验要求较高,则应尽量使用TAE电泳缓冲液。4.所有离心步骤
7、均为使用台式离心机在室温下离心。5.切胶时,紫外照射时间应尽量短,以免对DNA造成损伤。6.如果回收率较低,可在胶充分溶解后检测pH值,如pH值大于7.5,可向含有DNA的胶溶液中加10-30µl3M醋酸钠(pH5.2)将pH值调到5-7之间。7.回收<100bp及>10kb的DNA片段时,应加大溶胶液的体积,延长吸附和洗脱的时间。8.回收率与初始DNA量和洗脱体积有关,初始量越少、洗脱体积越少,回收率越低。产品简介操作步骤本试剂盒采用可以高效、专一结合DNA的硅基质材料和独特的缓冲液系统,从TAE或使用前请先在漂洗液PW中加入无水
8、乙醇,加入体积请参照瓶上的标签。TBE琼脂糖凝胶上回收DNA片段,同时除去蛋白质、其它有机化合物、无机盐离子及寡核苷1.柱平衡步骤:向吸附柱CA2中(吸附柱放入收集管中)加入500μl平衡液BL,12,000rpm酸引物等杂质,回收1
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