YCT406-2011 烟用添加剂中马兜铃酸A的测定 高效液相色谱法.pdf

《YCT406-2011 烟用添加剂中马兜铃酸A的测定 高效液相色谱法.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、ICS65．160X85备案号：33251—2011中华人民共禾口Y口国烟草行业标准YC／T406—2011烟用添加剂中马兜铃酸A的测定高效液相色谱法DeterminationofaristoIochicacidAintobaccoadditives--Highperformanceliquidchromatographicmethod2011-08-02发布2011-09-01实施国家烟草专卖局发布刖置YC／T406—2011本标准按照GB／T1．12009给出的规则起草。请注意本文件的某些内容可能涉及专利。本文件的发布机构不承担识别这些

2、专利的责任。本标准由国家烟草专卖局提出。本标准由全国烟草标准化技术委员会烟用材料分技术委员会(SAC／TC144／SC8)归口。本标准起草单位：云南烟草科学研究院、红塔烟草(集团)有限责任公司、红云红河烟草(集团)有限责任公司。本标准主要起草人：张承明、陈永宽、缪明明、者为、王璐、孟昭宇、贺兵、夏建军、杨光宇、陆舍铭、宾婕。1范围烟用添加剂中马兜铃酸A的测定高效液相色谱法YC／T406—2011本标准规定了烟用添加剂(香精和料液)中马兜铃酸A的测定方法——高效液相色谱法。本标准适用于烟用添加剂(香精和料液)中马兜铃酸A的测定。2规范性引用文

3、件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB／T6682分析实验室用水规格和试验方法YC／T145．10—2003烟用香精抽样3原理采用含o．1％甲酸的甲醇一水混合溶剂萃取烟用添加荆中的马兜铃酸A，经高效液相色谱仪分离，以紫外检测器测定，外标法定量。4试剂与材料除特殊要求外，均使用分析纯试剂。4．1水，符合GB／T6682中一级水的要求。4．2乙腈，CHsCN。色谱纯。4．8甲酸，HCOOH。4．4甲醇，CH。oH。4．5马

4、兜铃酸A，C。，H。，NO，(CAS：313—67—7)，纯度>97％。4．6甲醇水混合溶剂，体积比9：1。4．7萃取溶剂：取1mL甲酸(4．35智'T1000mL容量瓶中，用甲醇一水混合溶剂(4．6)定容至刻度。4．8标准溶液4．8．1一级标准储备液称取100mg(精确至0．1mg)马兜铃酸A(4．5)，用萃取溶剂(4．7)溶解转移至100mL容量瓶中，定容至刻度并摇匀。在2℃～8℃下保存，有效期1个月。4．8．2二级标准储备液准确移取与．0mL一级标准储备液(4．8．1)至100mL容量瓶中，用萃取溶剂(4．7)稀释定容至刻度并摇匀。在

5、2℃～8℃下保存，有效期1个月。4．8．3标准工作溶液分别准确移取100,uL、300p-L、500,uL、1000pL、2000pL、4000pL二级标准储备液(4．8．2)至50mL容量瓶中，用萃取溶剂(4．7)定容至刻度，得到系列标准工作溶液。即配即用。1YC／T406—20115仪器设备常用实验仪器及下述各项：5．1高效液相色谱仪，配置柱温箱、梯度洗脱功能和紫外检测器。5．2分析天平，感量0．1mg。5．3振荡器，最大转速应不小于200r／min。5．4离心机，最大转速应不小于8000r／min。5．5有机相滤膜，0．45pm。6抽

6、样按照YC／T145．102003的规定抽取样品。7分析步骤7．1样品处理称取2g(精确到0．1rag)试样于100mI。具塞锥形瓶中，准确加入50mL萃取溶剂(4．7)，用150r／min振荡萃取10min。取3mL萃取液置于10mL具塞离心试管中，在5000r／min条件下离心10min，取1mL上清液过有机相滤膜(5．5)，滤液用高效液相色谱仪分析。若待测试样溶液的浓度超出标准工作曲线浓度范围，则对样品前处理适当调整后重新测定。7．2色谱条件以下分析条件可供参考，采用其他条件应验证其适用性。——c，8色谱柱，规格：填料粒径3．5／lm

7、，250mm(长度)×4．6mm(内径)——流动相A：0．1％的甲酸乙腈溶液(体积分数)；——流动相B：0．1％的甲酸水溶液(体积分数)；——柱温：35℃；——流速：1．0mL／min；——进样体积：10pL；——梯度洗脱程序见表1；——紫外检测器检测波长：A=393nm。表1梯度洗脱程序时间流动相A流动相Brain％O356518．0653523．O98226．098227．0356537．03565YC／T406—20117．3标准工作曲线制作按照色谱条件(7．2)测定标准工作溶液(4．8．3)，以马兜铃酸A浓度与响应峰面积绘制标准工作

8、曲线，工作曲线线性相关系数R2≥o．999。标准工作溶液色谱图参见附录A中的图A．1。每20次进样后加入一个中等浓度的工作标准溶液进行测定，如果测得值与原值的相对偏差超过5％，则