《基因工程的复习》PPT课件

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1、1、(2010年江苏卷)下表中列出了几种限制酶识别序列及其切割位点，图1、图2中箭头表示相关限制酶的酶切位点。请回答下列问题：(1)一个图1所示的质粒分子经SmaⅠ切割前后，分别含有______个游离的磷酸基团。(2)若对图中质粒进行改造，插入的SmaⅠ酶切位点越多，质粒的热稳定性越______。(3)用图中的质粒和外源DNA构建重组质粒，不能使用SmaⅠ切割，原因是______。(4)与只使用EcoRI相比较，使用BamHⅠ和HindⅢ两种限制酶同时处理质粒、外源DNA的优点在于可以防止____

2、__。(5)为了获取重组质粒，将切割后的质粒与目的基因片段混合，并加入______酶。(6)重组质粒中抗生素抗性基因的作用是为了______。(7)为了从cDNA文库中分离获取蔗糖转运蛋白基因，将重组质粒导入丧失吸收蔗糖能力的大肠杆菌突变体，然后在______的培养基中培养，以完成目的基因表达的初步检测。2.下列有关基因工程技术的正确叙述是()A．重组DNA技术所用的工具酶是限制酶、连接酶和运载体B．所有的限制酶都只能识别同一种特定的核苷酸序列C．选用细菌作为重组质粒的受体细胞是因为细菌繁殖快D．

3、只要目的基因进入了受体细胞就能成功实现表达C3、以重组DNA技术为核心的基因工程正在改善着人类的生活。请回答下列问题：（1）获得目的基因的方法通常包括__________和__________。（2）切割和连接DNA分子所使用的酶分别是_________和_________。（3）运送目的基因进入受体细胞的载体一般选用病毒或___________，后者的形状呈___________。（4）由于重组DNA分子成功导入受体细胞的频率_______。所以在转化后通常需要进行___________操

4、作。（5）将人胰岛素基因分别导入大肠杆菌与酵母菌，从两者中生产的胰岛素在功能和___________序列上是相同的。限制性核酸内切酶（限制酶）化学合成（人工合成）酶切获取（从染色体DNA分离/从生物细胞分离）DNA连接酶（连接酶）质粒小型环状（双链环状、环状）低筛选氨基酸五、基因工程的应用1．转基因植物：抗虫转基因植物、抗病转基因植物、抗逆转基因植物、改良植物品质。（见P17-19）2．转基因动物：提高动物生长速度、改善畜产品品质、用转基因动物作器官移植的供体.（见P20-21）3．其他应用：基

5、因工程药物、基因治疗。（见P20-21）六、蛋白质工程1．蛋白质工程崛起缘由：基因工程原则上只能生产____________的蛋白质。2．蛋白质工程的概念：蛋白质工程是指以______________结构规律及其与生物功能的关系为基础，通过基因修饰或基因合成，对______________进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产或生活需要。自然界原有蛋白质分子现有蛋白质3．蛋白质工程的基本内容目标：根据人们对蛋白质功能的特定需求,对蛋白质的结构进行分子设计。过程：预期功能→蛋白质三维结构

6、→氨基酸序列(多肽链)→基因→具有预期功能的蛋白质4、特例：教材P26见教材P275、蛋白质工程与基因工程的比较蛋白质工程基因工程区别过程预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列→基因→预期蛋白质获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定实质定向改造或生产人类所需的蛋白质定向改造生物的遗传特性，以获得人类所需的生物类型或生物产品结果可产生自然界没有的蛋白质只能生产自然界已有的蛋白质结果(1)蛋白质工程是在基因工程基础上

7、延伸出来的第二代基因工程(2)基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造6、前景：见教材P28习题反馈：见《创》P205（2010年天津卷)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tetR表示四环素抗性基因,ampR表示氨苄青霉素抗性基因,BamHI、HindIII、SmaI直线所示为三种限制酶的酶切位点。高考热点突破：据图回答：(1)图中将人乳蛋白基因插入载体，需用____________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在

8、含____________的培养基上进行。(2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是_______(填字母代号)。A．启动子B.tetRC．复制原点D.ampR(3)过程①可采用的操作方法是_______(填字母代号)。A．农杆菌转化B.大肠杆菌转化C．显微注射D.细胞融合(4)过程②可采用的生物技术是___________。(5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的_______性(6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用_______(填