专题一基因工程-于都中学

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1、于都中学高二生物选修三新授课导学案编写人：龙包海专题二细胞工程第2节动物细胞工程（2）【学习目标】1.熟记动物细胞融合与单克隆抗体的原理和应用。2.小组合作，共同探究，激情投入，实现目标3.全心投入，体验科技的力量，享受成功快乐【使用说明与学法指导】1.依据学习目标，认真预习课本至少15分钟，用红笔标重点和疑难点。2.用准确语言完成【基础落实】【自主探究】3.认真独立完成【预习自测】【基础落实】四、动物细胞融合和单克隆抗体㈠动物细胞融合1、概念：动物细胞融合也称，是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程。融合后形成的具有原来细胞遗

2、传信息的单核细胞，称为。2、结果：形成。3、原理：4、促融方法：物理法：；化学法：；生物法：。3、动物细胞融合的意义：突破了的局限，使成为可能。这一技术已经成为研究的重要手段。特别是利用细胞融合技术而发展起来的技术。4、应用：动物细胞融合技术最重要的用途是制备。5.动物细胞融合与植物体细胞杂交的比较：比较项目细胞融合的原理细胞融合的方法诱导手段用途植物体细胞杂交离心、电刺激、振动、聚乙二醇（PEG）诱导克服远源杂交不亲和，获得杂种植株动物细胞融合细胞膜的流动性用胰蛋白酶使细胞分散后诱导细胞融合制备单克隆抗体二、单克隆抗体的制备：1.制

3、备单克隆抗体原理：4于都中学高二生物选修三新授课导学案编写人：龙包海（1）效应B细胞的特点：每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，B淋巴细胞有体外、（能，不能）无限增殖（2）骨髓瘤细胞特点：能无限增殖（3）杂交瘤细胞特点：2、概念：用单个B淋巴细胞与能在体外大量增殖的细胞进行，形成，其就可能产生出化学性质、的抗体——单克隆抗体。3、优点：。4、制备过程：5．单克隆抗体的作用：（1）作为体外诊断试剂：由于单克隆抗体纯度高、特异性强，所以能准确识别各种物质的细微差异，并跟一定发生特异性结合，具有准确、高效、简易、快速的优点。利用标记的单克

4、隆抗体，在特定的组织中成像的技术，要定位诊断肿瘤、心血管畸形等疾病。（2）用于治疗疾病和运载药物：主要用于治疗。如果把抗癌细胞的单克隆抗体跟、或相结合，可制成“”，注入体内，借助单克隆抗体的导向作用，能将药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞。也有少量用于治疗其它疾病。【自主探究】1.为什么不用抗原反复刺激机体，再从动物血清中分离所需抗体？4于都中学高二生物选修三新授课导学案编写人：龙包海这种方法不仅产量低、纯度低，而且制备的抗体。2.制备单克隆抗体时，为什么要选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞？B淋巴细胞具有产生特

5、异性抗体的能力，但不能在体外增殖；骨髓瘤细胞能在体外培养条件下无限增殖，但不能产生抗体。因些把一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行细胞融合，产生，它会兼有两个亲本细胞的特性—在体外培养条件下能不断增殖，同时能产生某种特异性抗体。3.制备单克隆抗体的过程有两次筛选，两次筛选的目的是什么第一次用特定的选择培养基从融合的细胞中筛选出杂交瘤细胞，第二次需先在多孔培养板上，在每孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始培养，然后再筛选出能产生特异性抗体的细胞群。（如何进行杂交瘤细胞的抗体检测及克隆化培养？）融合后的细胞经选择性培养基培养后，能存活的细胞就是杂交

6、瘤细胞。但这些杂交瘤细胞并非都是能分泌所需抗体的细胞，通常用“有限稀释法”来选择。将杂交瘤细胞稀释，用多孔细胞培养板培养，使每孔细胞不超过一个，通过培养让其增殖（克隆）。然后检测各孔上清液中细胞分泌的抗体（常用酶联免疫吸附试验法），那些上清液可与特定抗原结合的培养孔为阳性孔，阳性孔中是所需杂交瘤细胞克隆得到的细胞群。挑选阳性孔的细胞继续进行有限稀释，一般需进行3～4次，该过程即为杂交瘤细胞的克隆化培养。4.给小鼠注射特定的抗原蛋白是为了使小鼠获得相应的免疫反应，从而获得相应的效应B淋巴细胞；诱导动物细胞融合以后，在相应的培养基上至少存

7、在种类型的细胞，即：。【问题反馈】：请将你在预习本节中遇到的问题写在下面【预习自测】1．只能使动物细胞融合的常用诱导方法是（）A．PEG　　B．灭活的病毒　C．电刺激D．离心4于都中学高二生物选修三新授课导学案编写人：龙包海2．科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A．经过免疫的B淋巴细胞B．不经过免疫的T淋巴细胞C．经过免疫的T淋巴细胞D．不经过免疫的B淋巴细胞3．（2004年，全国）用动物细胞工程技术获取单克隆抗体，下列实验步骤中错误的是（）A．将抗原注入小鼠体内

8、，获得能产生抗体的B淋巴细胞B．用纤维素酶处理B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞C．用聚乙二醇作诱导剂，促使能产生抗体的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体4、