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《耐高温α- 淀粉酶高密度高表达发酵的条件优化》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在学术论文-天天文库。
1、※生物工程食品科学2012,Vol.33,No.01219耐高温α-淀粉酶高密度高表达发酵条件的优化胡建恩1，曹茜1,2，杨帆1,2，房耀维2，王淑军2,*，吕明生2，葛亮3，李瑛4(1.大连海洋大学食品科学与工程学院，辽宁大连116023；2.淮海工学院海洋学院，江苏连云港222005；3.上海海洋大学食品学院，上海201306；4.江南大学生物工程学院，江苏无锡214122)摘要：通过摇瓶实验对产耐高温α-淀粉酶的重组菌E.coliBL21的高密度高表达发酵条件进行研究。考察不同培养基和不同发酵条件对该菌株产耐高温α-淀粉酶的影响，并利用正交试验进行优化。结果表明
2、：在葡萄糖0.5g/L，酵母粉15g/L，pH6.5，诱导时机为接种后发酵4h，诱导时间为6h，IPTG添加量为0.8mmol/L，接种量为体积分数3%的优化条件下，该重组菌发酵液菌体生物量为原来的1.29倍，酶活力达到8.754U/mL，是原来的1.55倍，目的蛋白的表达量也为原来的1.24倍。关键词：耐高温α-淀粉酶；大肠杆菌BL21；发酵培养基；发酵条件OptimizationofFermentationConditionsforHighCellDensityCultivationandHighHyperthermophilicα-AmylaseExpressi
3、oninRecombinantE.coliHUJian-en1，CAOQian1,2，YANGFan1,2，FANGYao-wei2，WANGShu-jun2,*，..LUMing-sheng2，GELiang3，LIYing4(1.CollegeofFoodScienceandEngineering,DalianOceanUniversity,Dalian116023,China；2.SchoolofMarineScience,HuaihaiInstituteofTechnology,Lianyungang222005,China；3.CollegeofFoodSc
4、ienceandTechnology,ShanghaiOceanUniversity,Shanghai201306,China；4.SchoolofBiothechnology,JiangnanUniversity,Wuxi214122,China)Abstract：Inordertoachievehigh-cell-densitycultivationandhighexpressionofrecombinantE.coliBL21producinghyperthermophilicα-amylase,themediumcompositionandshakeflask
5、fermentationconditionswereoptimizedusingorthogonalarraydesign.Theoptimalcultivationconditionsfortheproductionofα-amylasewereachievedbyusingapH6.5mediumcomposedof0.5g/Lglucoseand15g/Lyeastextractandaninoculumsizeof3%,andadding0.8mmol/LIPTGfor6hinductionafter4hoffermentation.Underthesecon
6、ditions,thebiomassofrecombinantE.coliBL21wasincreasedby1.29-fold,theα-amylaseactivityby1.55-fold(reaching8.754U/mL)andtheproteinexpressionlevelby1.24-foldcomparedtothepre-optimizationresults.Keywords：hyperthermophilicα-amylase；E.coliBL21；cultivationmedium；cultivationconditions中图分类号：O623
7、.54文献标识码：A文章编号：1002-6630(2012)01-0219-07α-淀粉酶作为淀粉酶的一种，是目前一类最重此如何能以最低投入，实现单位发酵液的最高目的蛋白要、最古老、应用范围最广的工业酶制剂之一，其中表达量，成为发酵工业生产中研究的重点。耐高α-淀粉酶凭借其热稳定上的优势经占据很大的市本研究室从海底热液口获得了一株超嗜热古菌场。用耐高温α-酶代替普通α-淀粉酶起到推动新工艺ThermococcussiculiHJ21，该菌株分泌的耐高温α-淀新技术的运用与研究，降低消耗、降低成本的作用。粉酶的最适作用温度为95℃，在100℃仍有60%
