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1、《生命的化学》2005年25卷1期·33·●小综述CHEMISTRYOFLIFE2005,25(1)文章编号:100021336(2005)0120033203辣根过氧化物酶的结构与作用机制洪伟杰张朝晖芦国营(浙江工业大学生物与环境工程学院,杭州310014)摘要:辣根过氧化物酶是一种重要的酶制剂,它已经有一个多世纪的研究历史了。近几年,有关它的结构、催化中间体、催化机制以及特殊氨基酸残基功能等又有了新的发现。关键词:辣根过氧化物酶;血红素;糖基化中图分类号:Q55辣根(horseradish)是一种长年生香草,在世界同时还含有一种含量丰富的过氧化物酶。这种酶含大部分温
2、和地区都有种植。它的根不但可以烹调,有血红素,能利用H2O2氧化许多有机及无机化合物。由于这种酶的商业用途广,例如:可作为临床诊收稿日期:2004211226断和免疫测定的一种试剂等,人们开始大量地从辣作者简介:洪伟杰(1980—),男,硕士生,E2mail:peter-hong@根的根部来提取这种酶。虽然这种酶常用“辣根过sina.com;张朝晖(1968—),男,博士,副教授,硕士生导师;芦国营(1980—),男,硕士生氧化物酶”(horseradishperoxidase)这个词来形容,粒,分别针对HBV基因组中的p、s、x、c、preS基因,量的siRNA观察到
3、非特异性抑制作用。以及重复序列DR1、DR2。将这些质粒分别转染十多年的临床实验证明,基因治疗总体上是安HepG2细胞后,筛选能够持续表达shRNA的细胞,全有效的。去年来,慢性乙型肝炎基因治疗的研究接着转染编码hbv基因组的质粒,结果使HBVDNA也取得了另人鼓舞的成绩,然而作为一种常规的治[14]拷贝数和RNA水平显著降低。Ying等人工合成疗方法应用于乙肝,仍存在很多问题,如疗效、所需针对HBVc基因的小分子干扰RNA(siRNA),转染费用、副作用等。随着理论和实践技术研究的深入,分别产生野生型和YMDD变异型HBV的细胞株这些问题会被逐步突破和改进。基因治疗应
4、用于乙HepAD38、HepAD79,结果使病毒DNA含量显著降肝,将会得到越来越多人的认可。低,且抑制效果在两种细胞株之间无明显区别。参考文献[15]Hamasaki等将带有SapⅠ黏末端的线性HBV[1]ZhangLetal.Bioelectrochemistry,2004,63(1-2):369—373DNA转染HuH7和HepG2细胞株,以起始HBV的[2]GregoriadisGetal.Vaccine,2002,20:B1—B9完整复制周期;将人工合成针对c基因的siRNA转[3]ChenLetal.IntImmunopharmacol,2004,4(3):
5、403—409染细胞,转染后2天培养液中HBeAg含量较对照组[4]ShaoHJetal.ActaVirol,2003,47(4):217—221[5]KwissaMetal.JMolMed,2003,81(2):91—101低4～5倍,而HBsAg无明显变化,3.5kbmRNA水[6]赵平等.生物化学与生物物理进展,2002,29(4):576—平显著降低,而2.4kb/2.1kbmRNA水平无明显变582化,表明这种抑制作用是特异性的。[7]WooPCetal.Vaccine,2001,19:2945—2954[16][8]DingCLetal.WorldJGast
6、roenterol,2003,9(7):1512—1515McCaffrey等将编码hbv基因组的质粒和能[9]HoeprichSetal.GeneTher,2003,10(15):1258—1267够体内生成shRNA的质粒转染免疫缺陷型和健全[10]PanWHetal.MolTher,2004,9(4):596—606型小鼠,从4个方面显示对HBV的抑制作用:(1)[11]MorrisseyDVetal.JViralHepat,2002,9:411—418血液中HBsAg的含量较对照组降低;(2)肝脏中hbv[12]沃健儿等.浙江大学学报,2003,23(2):11
7、2—115[13]YingCetal.BiochemBiophysResCommun,2003:398—404RNA含量明显下降;(3)检测不到肝脏中HBV[14]YingCetal.BiochemBiophysResCommun,2003(309):DNA;(4)肝脏中HBcAg含量也明显降低。Giladi482—484等[17]用针对s基因的siRNA和编码hbv基因组的质[15]HamasakiKetal.FEBSLett,2003(543):51—54[16]McCaffreyAPetal.NatBiotechnol,2003,2
