反义RNA结构作用机制.ppt

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1、反义RNA英文名称：antisenseRNA反义RNA定义发现体内来源方式及功能mRNA互补的RNA分子，也包括与其它RNA互补的RNA分子反义RNA定义近年来，发现一些调节基因产生的RNA也可以有效地调控基因的表达。这些调控基因称反义基因。由于反义基因的转录出的mRNA称反义RNA。反义RNA以通过其碱基序列形成互补碱基对的方式来影响mRNA的翻译，从而调控相应于这种mRNA的基因的表达。反义RNA对基因表达的调控是非常专一的。反义snRNA(小核反义RNA)一些低拷贝的snRNA(104拷贝/每细胞)，它们的长度为10～21个核苷酸，并且能够与rRNA转录物

2、的特定序列互补，所以属于反义snRNA。这些snRNA与rRNA前体通过互补形成的RNA-RNA双链部分可作为pre-rRNA进行加工修饰的标志(图6-29)。反义RNA，你啥时候映入我们法眼？1983年Mizuno.和Kleckner同时发现反义RNA（antisenseRNA）最早是在E.coli(大肠杆菌)的产肠杆菌素的ColE1质粒中发现的许多起活性作用的成分。后来，实验证明在真核生物中也存在反义RNA。近几年来通过人工合成反义RNA的基因,并将其导入细胞内转录成反义RNA,即能抑制某特定基因的表达,阻断该基因的功能,有助于了解该基因对细胞生长和分化的作

3、用。反义RNA的发现反义RNA，对你又有❤认识啦！反义RNA，你从何而来？①反向转录的产物反义RNA是特定靶基因互补链反向转录产物,即产生mRNA和反义RNA的DNA是同一区段的互补链。反义RNA的来源ticRNA的基因的启动子可被cAMP-CAP复合物所激活，从CAPmRNA的转录起始位点上游3个核苷酸处开始，以CAPmRNA的模板DNA链的互补链为模板，合成ticRNA。ticRNA具体长度不清楚，但是它是5'端一段正好和CAPmRNA的5'端有不完全的互补，可以形成双链的RNA杂交体。而在CAPmRNA上紧随杂交区之后的是一段约长11bp的A，U丰富区。这

4、样的结构十分类似于ρ不依赖性的转录终止子的结构，从而CAPmRNA的转录刚刚开始不久后即迅速终止。从这个例子中我们可以看到CAP蛋白合成的自我调节作用。当CAP合成达一定量后，即可与cAMP结合成cAMP-CAP复合物。再激活ticRNA的启动子转录出ticRNA，反过来抑制CAP-mRNA的合成。反向转录例②来源是不同基因产物，如OMPF基因是大肠杆菌的膜蛋白基因，与透性有关，其反义基因MICFZE则为另一基因。RNAⅠ与RNAⅡ构成双螺旋反义RNA，你到何而去？Ⅰ类:反义RNA直接作用于其靶mRNA的SD序列和/或编码区，引起翻译的直接抑制(ⅠA类)或与靶m

5、RNA结合后引起该双链RNA分子对RNA酶Ⅲ的敏感性增加，使其降解(ⅠB类)。Ⅱ类:这类反义RNA与mRNA的SD序列的上游非编码区结合，从而抑制靶mRNA的翻译功能。其作用机制尚不完全清楚，可能是反义RNA与靶mRNA的上游序列结合后会引起核糖体结合位点区域的二级结构发生改变，因而阻止了核糖体的结合。反义RNA作用方式Ⅲ类反义RNA可直接抑制靶mRNA的转录如ticRNA是大肠杆菌中CAP蛋白(cAMP结合蛋白)的mRNA的反义RNA。ticRNA基因的启动子可被cAMP-CAP复合物所激活，从CAPmRNA的转录起始位点上游3个核苷酸处开始，以CAPmRNA

6、的模板DNA链的互补链为模板，合成ticRNA。ticRNA的具体长度不清楚，但是它的5＇端一段正好和CAPmRNA的5＇端有不完全互补，可以形成RNA双链杂合体。而在CAPmRNA上紧随杂交区之后的是一段约长11bp的A·U丰富区。这样的结构与ρ因子不依赖性的转录终止子的结构十分相似，可以使CAPmRNA的转录刚刚开始不久即迅速终止。这一例子是CAP蛋白合成的自我调节的最好说明。当CAP合成达到一定量之后，即与cAMP结合形成cAMP-CAP复合物，再激活ticRNA的启动子转录出ticRNA，反过来抑制CAP-mRNA的合成。调节水平反义RNA靶RNA分类功

7、能来源转录后水平micFRNAompFmRNA1AOmpF合成染色体oopRNAcⅡmRNA1B溶菌-溶源噬菌体sarRNAantmRNA1A溶菌-溶源噬菌体ouTRNA转位酶mRNAⅠA转位作用转位子finpRNAtraJmRNAⅠADNA转位sokRNAhokmRNAⅠA杀死作用copARNArepAmRNAⅡ复制质粒R1162RNArepⅠmRNAⅡ复制pT181RNArepCmRNAⅡ复制转录水平ticRNACAPmRNAⅢcAMP结合蛋白染色体复制前水平RNAⅠRNAⅡⅢDNA复制质粒反义RNA的分类和作用机制：下表总结了原核细胞内天然存在的11种反义

8、RNA。这些反义RNA按