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时间:2019-06-30
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1、Agela液相色谱介绍AgelaHPLC技术支持:郑晶提高分离度R,需要分别增大n,α,k值n:柱效,易受柱长、填料粒径的影响α:选择性,易受流动相和固定相影响;k:保留因子,受固定相和流动相的影响色谱分离基本方程HPLC柱的“色品”表达式柱效(n)对分离度(R)的影响以上两张谱图k,α值完全相同,仅仅由于柱效高低不同使得它们具有不同的分离度。“高富帅”分离选择性(α)对分离度(R)的影响α=1.04α=1.35α=1.50改变分离选择性α的方法改变固定相改变流动相pH值改用不同的流动相改变柱温容量因子(k)对分离度(R)的影响容量因子大于10,k/(k+1)的改变不大,而分析时间将大
2、大延长。因此,k的最佳范围是13、作用弱离子交换作用反相作用氢键作用弱离子交换作用-R-OH-O-H+甲醇/乙腈水缓冲盐溶液目标物A、B疏水部分(链烃和芳香烃)羟基、氨基离子化基团109876543210pHk’2486弱碱弱酸pH=pKORCOHORCOpH对分离的重要影响调节ph值对样品的分离非常有效色谱柱固定相稳定性400-6068-099www.agela.com.cn400-6068-099www.agela.com.cnAgela色谱柱最佳pH适用范围中等pH下使用C18VenusilMPC18(2),孔径110Å特点:亲水性、通用性、良好分离能力双层表面处理技术减低硅胶表面硅羟基的活性中等pH下良好的分离4、能力色谱柱:C18,5μm,4.6×250mm,样品:吗啡、可待因,脱氢吗啡的分离,流动相:乙腈-25mM乙酸钠缓冲液(pH3.5)=10:90,色谱柱A,硅羟基pH=3.5流动相pH=3.5,未能抑制硅羟基的活性二次保留严重VenusilMPC18(2),硅羟基pH=5.2流动相pH=3.5,能充分抑制硅羟基的活性抑制了二次保留效应400-6068-099www.agela.com.cn100%水流动相的兼容性样品:尿苷色谱柱:4.6*150mm,5μm流动相:100%水流速:1mL/min温度:30℃MPC18(2)pH2.6MPC18(2)pH5.8AtlantisT3pH2.65、AtlantisT3pH5.8碱性化合物阿米替林在不同pH下保留时间的变化YMCODS-AQpH2.6YMCODS-AQpH5.8HydroRPpH5.8HydroRPpH2.6中等PH值范围,碱性化合物没有三乙胺添加剂也可提供更好的峰型耐污染,高寿命,高耐受性的XBPC18(L)孔径:150Å杂质不易进入空隙而强保留表面积减小,减小极性小物质的保留时间色谱柱:5μm,4.6×250mm;样品:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄甲醚;流动相:甲醇:0.1%磷酸=80:20;波长:254nm;柱温:室温;流速:1.0mL/min高pH值流动相优势流动相pH对RPC保留的影响与样品类6、型(酸、碱、中性)的关系色谱柱:4.6*250mm,5μm,C18,流动相:0.025M磷酸盐、40%甲醇;样品:1水杨酸;2苯巴比妥;3非那西丁;4尼古丁;5甲基丙苯丙胺400-6068-099www.agela.com.cn核心技术-表面杂化技术宽泛的pH使用范围(2.0-12.0)低硅羟基活性高pH下拥有良好的寿命对碱性化合物有很大的载样量,适用于制备Durashell液相色谱柱:DurashellC18,C18(L),C8高pH条件首选老化条件流动相:甲醇:pH=12三乙胺溶液=40:60流速:1.0ml/min;柱温:40℃;色谱柱:4.6×150;5µm;200Å测试条件流7、动相:甲醇:水=85:15流速:0.8ml/min检测波长:254nm;柱温:30℃;进样量:1µL色谱柱:4.6×150;5µm;200Å样品:尿嘧啶、苯酚、硝基苯、萘250h后初始:0h强酸下使用的ASBC18色谱柱R=异丙基,防止键合相流失优势适用于pH0.8-4的流动相使得对pH较敏感的分离得到优化极低pH有较好的柱效和使用寿命酸性条件下的良好寿命酸性条件分离酸性物质亲水作用液相色谱柱VenusilHILIC与被分析物极性基团相互
3、作用弱离子交换作用反相作用氢键作用弱离子交换作用-R-OH-O-H+甲醇/乙腈水缓冲盐溶液目标物A、B疏水部分(链烃和芳香烃)羟基、氨基离子化基团109876543210pHk’2486弱碱弱酸pH=pKORCOHORCOpH对分离的重要影响调节ph值对样品的分离非常有效色谱柱固定相稳定性400-6068-099www.agela.com.cn400-6068-099www.agela.com.cnAgela色谱柱最佳pH适用范围中等pH下使用C18VenusilMPC18(2),孔径110Å特点:亲水性、通用性、良好分离能力双层表面处理技术减低硅胶表面硅羟基的活性中等pH下良好的分离
4、能力色谱柱:C18,5μm,4.6×250mm,样品:吗啡、可待因,脱氢吗啡的分离,流动相:乙腈-25mM乙酸钠缓冲液(pH3.5)=10:90,色谱柱A,硅羟基pH=3.5流动相pH=3.5,未能抑制硅羟基的活性二次保留严重VenusilMPC18(2),硅羟基pH=5.2流动相pH=3.5,能充分抑制硅羟基的活性抑制了二次保留效应400-6068-099www.agela.com.cn100%水流动相的兼容性样品:尿苷色谱柱:4.6*150mm,5μm流动相:100%水流速:1mL/min温度:30℃MPC18(2)pH2.6MPC18(2)pH5.8AtlantisT3pH2.6
5、AtlantisT3pH5.8碱性化合物阿米替林在不同pH下保留时间的变化YMCODS-AQpH2.6YMCODS-AQpH5.8HydroRPpH5.8HydroRPpH2.6中等PH值范围,碱性化合物没有三乙胺添加剂也可提供更好的峰型耐污染,高寿命,高耐受性的XBPC18(L)孔径:150Å杂质不易进入空隙而强保留表面积减小,减小极性小物质的保留时间色谱柱:5μm,4.6×250mm;样品:芦荟大黄素、大黄酸、大黄素、大黄酚、大黄甲醚;流动相:甲醇:0.1%磷酸=80:20;波长:254nm;柱温:室温;流速:1.0mL/min高pH值流动相优势流动相pH对RPC保留的影响与样品类
6、型(酸、碱、中性)的关系色谱柱:4.6*250mm,5μm,C18,流动相:0.025M磷酸盐、40%甲醇;样品:1水杨酸;2苯巴比妥;3非那西丁;4尼古丁;5甲基丙苯丙胺400-6068-099www.agela.com.cn核心技术-表面杂化技术宽泛的pH使用范围(2.0-12.0)低硅羟基活性高pH下拥有良好的寿命对碱性化合物有很大的载样量,适用于制备Durashell液相色谱柱:DurashellC18,C18(L),C8高pH条件首选老化条件流动相:甲醇:pH=12三乙胺溶液=40:60流速:1.0ml/min;柱温:40℃;色谱柱:4.6×150;5µm;200Å测试条件流
7、动相:甲醇:水=85:15流速:0.8ml/min检测波长:254nm;柱温:30℃;进样量:1µL色谱柱:4.6×150;5µm;200Å样品:尿嘧啶、苯酚、硝基苯、萘250h后初始:0h强酸下使用的ASBC18色谱柱R=异丙基,防止键合相流失优势适用于pH0.8-4的流动相使得对pH较敏感的分离得到优化极低pH有较好的柱效和使用寿命酸性条件下的良好寿命酸性条件分离酸性物质亲水作用液相色谱柱VenusilHILIC与被分析物极性基团相互
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