专题2微生物培养与应用

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1、新密二高课堂导学提纲编号：XXI0203A使用时间2018-03编制人：刘梅芳专题2微生物的培养与应用课题3　分解纤维素的微生物的分离班级：________姓名：_________小组：_________一．学习目标：1.简述纤维素酶的组成及作用。2.掌握从土壤中分离某种特定微生物的操作技术。3.探讨微生物的利用。二．学习重点：从土壤中分离分解纤维素微生物的操作技术。三．预习提纲：1．纤维素与纤维素酶(1)纤维素：①分布:是自然界中纤维素含量最高的天然产物，此外，、作物秸秆等也富含纤维素。②组成:由三种元素，由首尾相连而成的高分子化合物。③含量：地球上含量最丰富的物质。(

2、2)纤维素酶：①组成：一种酶，包括、、和。②作用：前两种酶使纤维素分解成，第三种酶将纤维二糖分解成。2．纤维素分解菌的筛选(1)方法：。(2)原理：①刚果红＋→形成复合物。②刚果红＋→不形成红色复合物。(3)现象：培养基中会出现以为中心的透明圈。(4)筛选：可通过判断是否产生来筛选纤维素分解菌。3．分离纤维素分解菌的实验设计(1)实验流程：土壤取样→(此步可省略)→梯度稀释→将样品涂布到鉴别的培养基上→挑选产生的菌落。(2)土壤取样采集土样时，可以选择的环境。(3)选择培养①目的：增加纤维素分解菌的，确保能够从样品中分离到所需要的。②选择培养：称取土样20g，在无菌条件下

3、加入装有30mL培养基的锥形瓶中，将锥形瓶固定在上，在一定温度下振荡培养1～2d，直至培养液变。也可重复选择培养。③挑选菌落a．刚果红染色法，挑选的菌落，一般即为分解纤维素的菌落。b．常用的刚果红染色法包括两种，一种是先，再加入进行反应，另一种是在时就加入刚果红。4．课题延伸(1)为确定得到的透明圈中的菌落是纤维素分解菌，需要进行的实验，纤维素酶的发酵方法有和两种。(2)纤维素酶的测定方法一般采用。四．重难点突破（一）纤维素分解菌的筛选原理：即可根据是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌。新密二高课堂导学提纲编号：XXI0203A使用时间2018-03编制人：刘梅芳（二）分离纤

4、维素分解菌的实验操作1．分离分解纤维素的微生物的实验流程：进一步鉴定2．分离得到的纤维素分解菌的鉴定：(1)鉴定原因：由于形成透明圈的菌落与其他微生物菌落出现混杂现象，而且产生透明圈的菌落可能是产生淀粉酶的微生物，也可能是降解刚果红的菌种。(2)原理：为确定得到的是纤维素分解菌，还需要进行发酵产纤维素酶的实验，纤维素酶的发酵方法有液体发酵和固体发酵两种。(3)纤维素酶的测定方法：一般是对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的葡萄糖进行定量的测定。3.对照组设置常设置两种对照实验：(1)判断某个选择培养基是否具有选择作用时，应设立基础培养基进行对照。(2)判断所使用的培养基灭菌

5、是否彻底，应设立不接菌种的该培养基进行空白对照。五、合作探究〖讨论1〗纤维素分解菌选择培养基属于培养基，原因是什么？〖讨论2〗培养基选择作用机制是什么？〖讨论3〗若设置一个对照实验说明选择培养的作用，应控制的变量是什么？〖讨论4〗由“选择培养”实验操作过程请你推测纤维素分解菌的异化类型是需氧型还是厌氧型？〖讨论5〗比较两种染色法的各自的优缺点染色法优点缺点方法一方法二六．提升总结尿素分解菌和纤维素分解微生物的分离和鉴定比较项目内容　　尿素分解菌纤维素分解微生物条件尿素为唯一氮源纤维素为唯一碳源鉴定方法及现象培养基中加入酚红指示剂，变红色在培养基上应用刚果红染色法，出现透明

6、圈鉴定原理细菌等微生物生成脲酶，将尿素中肽键断裂产生NH3，使pH升高，加入酚红变红色微生物产生纤维素酶，将纤维素分解为纤维二糖或葡萄糖，使纤维素—刚果红复合物降解而出现透明圈步骤差异土壤取样→制备培养基→样品梯度稀释→涂布平板→培养观察土壤取样→制备培养基→选择培养→梯度稀释→涂布培养→刚果红染色→挑取菌落→进一步鉴定七．课堂回扣练习新密二高课堂导学提纲编号：XXI0203A使用时间2018-03编制人：刘梅芳1.纤维素酶可以将下列哪种物质分解…………()A．牛肉片B．鱼片C．滤纸条D．塑料条2.在加入刚果红的培养基中出现透明圈的菌落是……………()A．分解尿素的细菌B

7、．硝化细菌C．分解纤维素的细菌D．乳酸菌3.下列关于纤维素酶的说法，错误的是A、纤维素酶是一种复合酶，至少包括三种B、纤维素酶可把纤维素分解成葡萄糖C、纤维素酶可用于去掉植物的细胞壁D、葡萄糖苷酶可把纤维素分解成葡萄糖4.有关选择培养正确的叙述是（）A、可以增加纤维素分解菌的浓度B、可以减少纤维素分解菌的浓度C、所用培养基是固体培养基D、所用培养基是平板培养基5.请选出土壤微生物分离的正确操作步骤()①土壤取样②称取0.5g土壤将其加入盛有50mL无菌水的锥形瓶中③吸取1mL进行平板涂布④依次稀释至10－3、10－4、10－5