3、1菊花的组织培养

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1、专题三课题1菊花的组织培养指植物的离体部分（包括任何器官、组织、细胞或原生质体），在人工控制的培养基及环境条件（温度及光照）下，得以生长和分化成完整植株的一种无菌培养技术。又称：植物离体培养一、植物组织培养的概念（1）细胞的分化①概念：在个体发育中，相同细胞在形态、结构和生理功能上发生稳定性差异的过程.②原因：基因选择性表达的结果.（2）细胞的全能性概念：细胞的全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能。原因：是生物体的每一个细胞都含有该物种所特有的全套遗传物质B.脱分化：由高度分化的植物器官、组织或细胞产生愈伤组织的过程，又称去分化。C.再分化：脱分化产生的愈伤组织在培养过程

2、中重新分化根或芽等器官的过程D.愈伤组织:细胞排列疏松而无规则,是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞.（3）植物组织培养1、相关概念:A.外植体：用于离体培养的植物细胞、组织或器官.2、植物组织培养的基本过程二、影响植物组织培养的因素：1、外植体的选取不同植物的组织培养难度不同同一种植物的不同组织培养难度不同2、培养基的配制(MS培养基)大量元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等植物激素：生长素、细胞分裂素、赤霉素等未开花植物的茎上部新萌生的侧枝3、不同植物激素使用顺序使用顺序实验

3、结果先生长素，后细胞分裂素有利于细胞分裂但不分化先细胞分裂素，后生长素细胞既分裂也分化同时使用分化频率提高4、不同植物激素使用量生长素/细胞分裂素比值结果比值高时促根分化，抑芽形成比值低时促芽分化，抑根形成比值适中促进愈伤组织生长5、pH、温度、光照（菊花组培）pH=5.8温度控制在18—22℃每日光照12h6、消毒在培养的整个过程中，都需要是一个无菌环境制备MS固体培养基外植体消毒接种培养栽培三、实验操作移栽冲洗—酒精—无菌水冲洗—氯化汞—无菌水冲洗至少三次之上配制各种母液配制培养基灭毒结果分析与评价（一）对接种操作中污染情况的分析（二）是否完成了对植物组织的脱分化和再分化（三）

4、是否进行了统计、对照与记录（四）生根苗的移栽是否合格②③练习1、下图是植物组织培养的简略表示。据此回答：（1）①表示__________________，它能被培养成为④的根本原因是______________________________________。（2）②表示____________，它与①相比分化程度__________，全能性____________.（3）若想制成人工种子，应选用____________。（4）若①是花药，则④是____________，继续对其使用____________处理可获得____________正常植株，该过程称为__。（5）若①是胡萝

5、卜根尖细胞，则培养成④的叶片的颜色为____________，这说明____________。（6）若利用此项技术制造治疗烫伤、割伤的药物——紫草素，培养将进行到____________。④①脱分化②再分化③答案：（1）离体的植物组织或器官植物细胞具有全能性（2）愈伤组织低高（3）③（4）单倍体植株秋水仙素纯合体单倍体育种（5）绿色含有表达叶绿体的基因（6）②辣椒素作为一种生物碱广泛用于食品保健、医药工业等领域。辣椒素的获得途径如图。（1）图中①和②分别表示辣椒组织培养中细胞的_________和_________过程。（2）图中培养外植体的培养基中常用的凝固剂是________。

6、培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值______（填“高”或“低”）时，有利于芽的分化。对培养基彻底灭菌时，应采用的灭菌方法是__________。（3）图中外植体的消毒所需酒精的体积分数是_______。用酶解法将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是__________和纤维素酶。（4）提取辣椒素过程中，萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是_________。低再分化琼脂脱分化高压蒸汽灭菌70%果胶酶防止有机溶剂挥发