一株海洋光合细菌d25的分离与鉴定

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1、第50卷第16期湖北农业科学Vol．50No.16湖北农业科学2011年2011年8月HubeiAgriculturalSciencesAug．，2011一株海洋光合细菌D25的分离与鉴定刘天华，李乐乐，乔梦，解斐（山东大学威海分校海洋学院，山东威海264209）摘要：从威海近海采得的海洋沉积物中经过富集培养和分离筛选，得到一株紫色菌落的海洋光合细菌，编号为D25。利用梅里埃公司细菌鉴定系统对菌株的生理生化特征进行了检测，API20E检测结果共有ADH、CIT等4项检测项目呈阳性，ONPG、LDC等16项检测项目呈

2、阴性。经PCR反应得到16SrRNA基因序列，16SrRNA基因序列测定和分析结果显示该菌株为嗜硫小红卵菌（Rhodovulumsulfidophilum）。关键词：海洋；光合细菌；16SrRNA基因；生理生化中图分类号：Q93－331文献标识码：A文章编号：0439－8114（2011）16－3276-03IsolationandIdentificationofPhotosyntheticBacteriumD25LIUTian－hua，LILe－le，QIAOMeng，XIEFei（CollegeofMarine

3、Science，ShandongUniversityatWeihai，Weihai264209，Shandong，China）Abstract：ApurplestrainofmarinephotosyntheticbacterianumberedD25wasisolatedfromthemarinesedimentsofWeiHaioffshorethroughenrichmentculture，isolationandscreen．Thephysiologicalandbiochemicalcharacteris

4、ticsofstrainD25weretestedbyNewATB，theresultsofAPI20Etestshowthat4itemspresentpositivesuchasADHandCIT，16itemspresentnegativelikeONPGandLDC．The16SrRNAgenesequencewereclonedbyPCRtechnology，theresultsoftestingandanalyzingof16SrRNAgenesequenceidentifiedthestrainasR

5、hodovulumsulfidophilum．Keywords：marine；photosyntheticbacteria；16SrRNAgene；physiologicalandbiochemical光合细菌（Photosyntheticbacteria，PSB），是一行研究以及16SrRNA基因序列的测定和分析，经类在自然界中广泛存在的，能在厌氧条件下进行不鉴定该菌株为Rhodovulumsp．的Rhodovulumsulfi-放氧的光合作用并且能够利用光能自养生长，具有dophilum。复杂代谢功能的细菌的总

6、称。其具有固碳、固氮、脱1材料与方法氮、氧化硫化物等功能，是生命演化中的过渡类型，可作为光合作用机理和产氢固氮机理的研究材1．1材料料［1－3］1．1．1。由于光合细菌可以广泛利用多种有机物，具海洋沉积物海洋沉积物由威海近海海域有在不同的条件下进行多种方式的生长代谢的特采得。点，使其在有机废水处理中得以应用，和传统活性1．1．2培养基富集培养基：氯化铵1.0g，乙酸钠污泥法相比，利用光合细菌处理污水具有动力消耗2.0g，MgSO4·7H2O0．2g，酵母膏0．2g，蛋白胨0．2低、脱氮除磷效果好、设备规模小、占地面

7、积小、管g，EDTA1.0g，1000mL陈海水，pH值为7，灭菌后理简易等明显优势［1］加入碳酸氢钠1.0g，磷酸二氢钾0．2g。分离培养。此外，由于光合细菌具有净化水质和保护水环境的作用，加之其本身是活蛋白，基：蛋白胨5.00g，酵母粉1.00g，柠檬酸铁0．01g，营养丰富，在水产养殖方面可以促进生长，提高成琼脂18.00g，陈海水1000mL，pH值为7。活率和养殖效果，含有的抗病毒因子及多种免疫促1．2方法进因子可活化机体的免疫系统，因此其在水产养殖1．2．1海洋光合细菌的富集取海洋沉积物约3g，方面也得

8、到了广泛的应用［4］置于盛满富集培养基的250mL密闭富集培养瓶。对海洋沉积物中的一株光合细菌D25进行分离并对其生理生化特性进中，置于有恒定光源（25W白炽灯泡）的恒温培养箱收稿日期：2011－05－19作者简介：刘天华（1990-），女，山东济南人，2008级本科生，研究方向为生物技术，（电话）15163147267（电子信箱）liuth1990＠163