羊膜提取液对兔准分子激光术后haze的影响机制

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1、羊膜提取液对兔准分子激光术后haze的影响机制硕士研究生：杜娟导师：刘祖国教授中文摘要目的探讨羊膜提取液(amnioticextraction,AE)对准分子激光屈光性角膜切削术(photorefractivekeratectomy,PRK)后伤口愈合过程的影响及减轻PRK术后角膜上皮下雾状混浊（haze）的作用机制。方法健康无眼疾的27只新西兰大白兔（54只眼），采用完全随机分组设计方案，随机分为三组（实验组、激素组与空白组），每组9只兔（18只眼）。制造PRK动物模型（PTK模式下去除兔角膜上皮，PRK治疗模式下按-10D、6.5mm切削直径进行角膜切削）。术后实验组滴用AE，激素

2、组用0.1％磷酸地塞米松眼液，空白组用不含AE的赋形剂，术后每天观察眼部大体情况。于1、4、8W处死每组3只实验兔，取双眼角膜组织，采用光镜观察角膜切削区中央上皮的恢复情况，免疫荧光染色检测α-平滑肌肌动蛋白(alpha-smoothmuscleaactin,α-SMA)、CD11b，原位末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP缺口末端标记（TUNEL）检测角膜基质细胞的凋亡，并进行统计学分析。结果1、术后1W，光学显微镜下见，三组的角膜上皮细胞均已完全覆盖激光切削面，上皮基底细胞大小不均，上皮细胞层间排列极不规则，基质浅层有较多角膜基质细胞积聚。术后4W，激素组和空白对照组基质浅层内较多新

3、生胶原，排列不规则，失去板层结构，瘢痕形成。术后8W，三组角膜上皮仍未恢复至正常，角膜激素组和空白组基质浅层见大量新生胶原纤维，排列极不规则（图1－4）。2、术后1、4、8WCD11b在三组均未见明显阳性细胞表达。三组比较无统计学差异。3、术后1WTUNEL阳性细胞在三组均有表达，AE组较空白对照组、激素组的阳性细胞明显减少；术后4WTUNEL阳性细胞在空白对照组有表达，AE组、激素组未见明显的阳性细胞表达（p＜0.01）。术后8W三组均未见明显凋亡阳性细胞的表达。14、术后1、4、8Wα-SMA在空白对照组、激素组的角膜基质浅层均有阳性表达，且术后4W阳性表达的细胞数目较1W增高；术

4、后8W较4W的阳性细胞数目减少。术后1、4、8Wα-SMA在AE组的表达均为阴性（p＜0.01）。结论AE可以减少PRK术后haze的产生。其机制可能为AE能够减少细胞凋亡，减少肌成纤维细胞的产生与聚集从而减少胶原与瘢痕形成。关键词羊膜提取液;PRK;角膜上皮下混浊;机制;兔2EffectsofAmnioticExtractiononepithelialwoundhealingandstromalremodellingafterexcimerlaserkeratectomyinrabbitcorneaAbstractObjectiveWetrickledtheamnioticextra

5、ctionontheocularsurfaceoftherabbitcorneasaftertheexcimerlaserphotorefractivekeratectomyinordertodiscusstheeffectandmechanismoftheamnioticextractiononthehealingofthecornealwoundandexploreanewwaytoreducethehazeafterPRK.MethodEighteenNewZealandhealthywhiterabbitswithoutanyoculardiseaseweredividedin

6、tothreegroupsrandomly,Eachgrouphad6rabbits,12eyes.AndthentheywereundergonePRKinthesamewayusingthefifthmultiscanexciserlasertherapeuticapparantus.AfterremovingcornealepitheliuminPTKmode,awound6.5mmindiameterwithadepthof150µmwascreatedinthecentreofthecorneainPRKhealingmode.Alleyeswereallocatedrand

7、omlytobetreatedwithamnioticextraction,or0.1%dexamethasoneasnegativecontrol,orsteroidasblankcontrol.Eacheye’sgeneralconditionwasobservedpostoperativelyeveryday.Therabbitswerekilledrespectivelyat1、4and8weekspostoperatively.Bot