杏和李树上发生的类病毒种类鉴定与序列分析

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1、英文缩略词表英文全称Ampicin/nN·N’-MethylenebisacIylamideBasePairComplementan/DNACetylTriethylAmmoniumBromideEthidiumbromideEscherichiacoliEthylenediam/netetraaceticacidLuria-bertan/mediaMicrogramMicrolitreMessengerRNASodiumacetatePolyAcrylamideGelEIec/rophoresisP

2、olymeraseChainReac60nRev删tionpolymetascchainactionSod/umDodecylSulfate“蛐Ⅲn-PolyAcrylamideGelElectrophores/sTris-acetate-EIYrATri“BoricEDTAN,N,N’,N’-TetraMethylEneDiamineUn/tAmmoniumpersulphatePotatospindletuber“roJdC抽.y翻孵tJId棚堋vlroidCitrmexocort缸俩roidCo

3、coMtcadang-cadang订roidAmcado∞blotchvJroMHopstuntviroidPeachlatent_lⅫ缸viroidJ仞拓scarskinviroidColeusblumetviroidIV中文名称氨苄青霉素亚甲基双丙烯酰胺碱基对互补DNA十六烷基三乙基溴化铵溴化乙锭大肠杆菌乙二胺四乙酸LB培养基毫克微升信使RNA乙酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳聚合酶链式反应反转录聚合酶链式反应十二烷基磺酸钠正反向聚丙烯酰胺凝胶电泳Tris-乙酸电泳缓冲液Tfis—硼酸电泳缓冲液N,N,N’

4、,N’.四甲基乙二胺酶活单位过硫酸铵马铃薯纺锤形块茎类病毒菊花矮化类病毒柑橘裂皮类病毒椰子死亡类病毒鳄梨日斑类病毒啤酒花矮化类病毒桃潜隐花叶类病毒苹果锈果类病毒锦紫苏类病毒一娜.蛊卸一一Ⅱ一一Ⅱ畔札一~一腿一誊

5、一詈

6、誉

7、~u鹏~一一一~一~~一独创性声明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知,除了文中特别加以标注和致谢的地方外,论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果,也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志

8、对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。研究生签名:杉元致时间:≯唧年∥月,Z开关于论文使用授权的说明本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定,即:学校有权保魁送交论文的复印件和磁盘,允许论文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。同意中国农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名:永弓知葭导师答名:乏弘晦时『BJ:≯司年多月,阴帆a叼年厂月㈨中国农业大学硕士学位论

9、文第一章绪论类病毒是迄今为止发现的最小病原物,是一类无外壳蛋白、能在受侵染寄主植物中自我复制的单链闭合环状低分子量RNA分子.由246-475个核苷酸组成,无抗原性,依赖于寄主细胞的酶系统进行复制(Roteset4£。1997).有些类病毒病害可以引起严重的经济损失,例如:马铃薯纺锤形块茎类病毒(Potato印玩正ktuberviroid,PSTVd),菊花矮化类病毒(a唧Ⅻ诚aMmstund'4ro/d,CSVd)、柑橘裂皮类病毒(C/maexocort/s1,/to/d,CEVd)、椰子死亡类病毒

10、(Coconutcadang-cadangviroid,CCCVd)以及鳄梨日斑类病毒(Avocadosunb/otcht,'/ro/d,ASBVd)等,但有些表现为潜伏侵染.植物感染类病毒后一些常见的症状有:植株矮化;叶片卷曲,上翘;果实扭曲、褪色;茎叶坏死等,且因环境和寄主种类的不同而不同.1.1类病毒的特性1.I.1分子生物学特性20世纪印年代末到70年代初,在研究马铃薯纺锤形块茎病时发现了一种新奇的病原物,该病原物具有分子量小,无外壳蛋白、单链、闭合环状等特点(图1-1),1971年,美国Di

11、ener将其称为类病毒(viroid).大多数类病毒RNA可分为五个功能区,即左手末端区(TL),致病区(P),中央保守区(C)。可变区(v)和右手末端区(TR).TL和TR的保守序列有利于复制酶的结合,与类病毒的复制起始有关,且TL和TR在类病毒之间可以互换,因此它的基因重组在类病毒进化中扮演着重要角色(Hammond,1994;Manlatakiaa/.,2003),TL与决定类病毒致病性的构造因子有关(Sam甜a/.A992),TR是通过控制类病毒

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