低温胁迫对斑马鱼精子超低温冷冻影响的探究

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1、万方数据温州医科大学硕士学位论文3．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯243．2．1斑马鱼温度驯化处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯243．2．2斑马鱼鲜精UCP2蛋白的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯243．2．3斑马鱼鲜精UCP2基因表达的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯253．2．4斑马鱼鲜精MDA含量的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．263．2．5斑马鱼鲜精ROS检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯273．2．6斑马鱼鲜精ATP含量的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯273．2．7斑马鱼鲜精的线粒体膜电位的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯273．2．8斑马鱼鲜精的活力检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

2、283．2．9数据处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．283．3结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．283．3．1低温对鲜精UCP2蛋白的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯283．3．2低温对鲜精UCP2基因的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯293．3．3低温对鲜精MDA含量的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．293．3．4低温对鲜精活性氧(ROS)的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯303．3．5低温对鲜精ATP含量的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯303．3．6低温对鲜精线粒体膜电位的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯313．3．7低温对鲜精精子活力的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯313．

3、4分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯32第四章温度诱导斑马鱼精子UCP2表达及其对冻精的影响⋯⋯⋯334．1实验材料⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯344．1．1成鱼的养殖⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．34万方数据温州医科大学硕士学位论文4．1．2主要试剂⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．344．1．3主要仪器⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．344．2实验方法⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．354．2．1斑马鱼温度驯化及其精子冷冻⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯354．2．2斑马鱼冻精UCP2蛋白的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

4、⋯354．2．3斑马鱼冻精UCP2基因表达的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯364．2．4斑马鱼冻精MDA含量的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．374．2．5斑马鱼冻精ROS检测的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯一384．2．6斑马鱼冻精ATP含量的测定⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯384．2．7斑马鱼冻精的线粒体膜电位的检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯384．2．8斑马鱼冻精的活力检测⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯394．2．9数据处理⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯-394．3结果⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．394．3．1低温对冻精UCP2蛋白的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯394

5、．3．2低温对冻精UCP2基因的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯404．3．3低温对冻精MDA含量的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．404．3．4低温对冻精活性氧(ROS)的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯414．3．5低温对冻精ATP含量的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯4l4．3．6低温对冻精线粒体膜电位的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯424．3．7低温对冻精精子活力的影响⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯424．4分析与讨论⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯43参考文献⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．44万方数据温州医科大学硕士学位论文附录⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯

6、⋯48致谢⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯49综述⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯．．50独创性声明⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯57万方数据塑型垦型奎堂堡主兰篁笙茎———————————————————————————————————————_———————————————————————————一。中英文缩略语对照表缩写英文说明中文说明CASAComputerassistedspermanalysis计算机辅助精子分析系统systemTBAthiobarbituricacid硫

7、代巴比妥酸lINE4-hydroxy．2．nonenal4-羟基壬烯酸DMSODimethylsulfoxide二甲基亚砜HBSSHanks，balancedsaltsolutionHank’S平衡盐溶液UCPUncouplingprotein解偶联蛋白MFIMeanfluorescenceindex平均荧光强度ROSReactiveoxygenspecies活性氧MDAMalondialdehyde丙二醛MMPMitochondrialmembmnepotential线粒体膜电位DNP2,4．dinitrophe