资源描述：
《尿蛋白快速检查试纸的研究》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、尿蛋白快速检查试纸的研究广州医学院生化教研组广州化学试剂厂尿蛋白检查是各级医院中最大量生化检查项目之一,目前一般采用磺基水扬酸法。此法灵敏度较高(1.smg书)@@但非特异性@酮体、.尿酸可形成假阳性反应,尿中盐类结晶较多时也出现假阳性反应,须经加热才混浊消失¹¿。因此,按此法测定如属阴性则无需再行其它试验,如为阳性则应作加热醋酸法¹或试纸比色法(下称试纸法)进行对照¼并应以后者。,。结果为报告依据加热酷酸法虽准确性较高但缺点为操作步骤较复杂我们认为无论加热‘醋酸法和磺基水扬酸法均属比浊法,若尿标本原为混浊,则应先离心沉徒¹º,增加
2、操作手,。,,续而且浊度观察常各人掌握标准不一实践证明同一尿标本在不同实验室或在同一实验室不同检验员之间常得出不同结果,¹利用试纸法测定尿蛋白在美国1957年已开始使用,近十年来不断得到推广À。我国在大跃进的1958年已有尿蛋白试纸研制文章’发表,¹文化大革命以后,国内亦有过生产,但由_于所用指示剂(国内一般用澳酚蓝或澳酚蓝乙醋)灵敏度不够,当尿中蛋白质含量为微量时不易测出,故一直未能广泛使用。我们根据国外文献,,n等@¼À报导用作尿蛋白试纸的指示剂以四澳酚蓝为最灵敏于是采用Harde人所提出的合成方法,于一九七六年十一月合成尿蛋白
3、显色最灵敏指示剂四澳酚蓝(见本期四澳酚蓝的化学合成一文)成功,并以它为显色指示剂,制成尿蛋白—快速检查试纸,该试纸具有灵敏、快速、简易的特点,经在市内外医院作七百余病例的三方法(试纸法,加热醋酸法,和磺基水扬酸法)对比,符合率达97多以上,并与美国,西德同类产品比较证明已达国际水平,可推广使用。实‘验过程一、:试纸法测定尿蛋白的原理,各种酸硷指示剂(以下简称指示剂)都有一定的pH变色范围但当溶液中存在蛋白质,,时由于蛋白质离子对带相反电荷的指示剂离子的吸引以致引起溶液中指示剂的进一步解,因而发生指示剂颜色改变,,离(变色点改变)溶液
4、中蛋白质浓度愈大变色程度亦相应愈L,,,大这一现象称指示剂的蛋白误差早在1909年已由Sorensen所发现À以后发展成利用某些指示剂对含蛋白质体液的比色测定。试纸法测定尿蛋白原理为利用某些指示剂(通常是酸性指示剂,在溶液中产生指示剂阴离于)在一定的PH值下(此PH值应低于蛋白质等电一点)与溶滚!户蛋自质(此时蛋白质在溶液中呈阳离子)作用产生颜色变化,与标准色板比较测得结果。因此试纸中必须浸有指示剂,为维持一定PH值的缓冲剂以及表面活性物质等成分。我们曾对指示剂,缓冲剂及表面活性物质的性质和份量进行过研究,初步得出较适合的。处方、二
5、:指示荆的选择能产生蛋白误差的指示剂很多,但尿中的蛋白质主要为白蛋白,故能用于制造尿蛋白试、,,纸的指示剂据国内外报导大概有:四二下列数种嗅酚蓝¹¿一嗅酚蓝乙脂@四氯酚蓝,,。氯酚四澳磺酞四嗅酚酞乙脂Á一四澳酚蓝@一又据报导嗅酚蓝对白蛋白的灵敏度20m,,,,为g形¿@嗅酚蓝乙醋为10mg厂@四氯酚蓝为10mg四氯酚四嗅磺酞为smg,,。四酚澳酞乙醋报导不一可能由于处方不同有smg拓gmg多及10mg厂À四嗅酚蓝为。:,smg及Zmg我们曾以同一缓冲剂(柠檬酸加柠檬酸钠)用四种指示剂即澳酚蓝澳酚蓝乙醋,四澳酚酞乙醋及四澳酚蓝制成四种
6、尿蛋白试纸作测定比较,发现溟酚蓝,澳酚蓝,,,乙醋及四嗅酚酞乙醋灵敏度均较差尿蛋白含量10mg多(相当于士级)尚不易分辨而,5m。四嗅酚蓝灵敏度较高一般g形已能明显分辨我们亦试用过国产尿蛋白试纸(一般指,示剂都是用嗅酚蓝或嗅酚蓝乙醋的)也发现灵敏度较差蛋白含量10mg形(士级)不易分,m。辨要在30g多(十级)以上才显色明显而美国多联试条(N一multstix)中的蛋白试区,。(内含四澳酚蓝作指示剂柠檬酸加柠檬酸钠作缓冲剂)尿蛋白含量smg拓已呈色明显于,是我们选用四澳酚蓝为制造尿蛋白试纸的指示剂四澳酚蓝浸债液的浓度经试验以30mg
7、、36二,。g多为适当浓度过高反而会导致灵敏度降底、三缓冲剂的研究:据国内外文琳报导,·所用的缓冲剂多数为柠檬酸加柠檬酸钠,PH3左右,_但也有用唬泊,,,酸加巴比妥ÀÁ或柠檬酸加氨水的我们以四澳酚蓝为指示剂用这三组缓冲剂各制成试纸,作比较,发现琉拍酸,巴比妥组缓冲能力较弱,当天气较热,尿液浓缩尹则出现不同程。,度的假阳性柠檬酸加氨水组的缓冲能力较强但由于内含柠檬酸钱盐易吸水潮解试纸干燥后取出不久即有返潮现象,对保存不利。而柠檬酸加柠檬酸钠组既有缓冲能力强不出现假阳性,又有不易吸潮,保存稳定的优点。因此我们采用柠檬酸加柠檬酸钠的缓冲
8、系统。经研究、柠檬酸及柠檬酸钠的组成与浸渍用滤纸品种亦有关系,若用杭州新华纸厂中速定性滤纸,则缓冲剂浸渍液组成可为柠檬酸2克加柠檬酸钠10克/IOOml(溶液此时3,FH一左右)若用..3号厚滤纸则应用柠檬酸10克加柠檬酸钠79克/1
