猫瘟热病毒胶体金快速检测试纸的研究.pdf

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1、第15卷第2期经济动物学报Vo1.15No.22011年6月JournalofEconomicAnimalJune2011猫瘟热病毒胶体金快速检测试纸的研究燕永彬,孙静,艾有为,田丽红(东北林业大学野生动物资源学院,哈尔滨150040)摘要:利用双抗体夹心和胶体金免疫层析技术的原理,在玻璃纤维膜、硝酸纤维膜的检测线(T)和对照线(C)上分别喷上胶体金与猫瘟热病毒(FPV)单克隆抗体(3C4)的偶联物、FPV多克隆抗体和羊抗鼠IgG单克隆抗体,制成检测FPV抗原的猫瘟热病毒胶体金快速检测试纸,对临床

2、26份虎粪便样本进行检测,并与PCR检测法及韩国(ASANPHARM.CO.,LTD.SeoulKorea)的金标试纸检测法进行比对。结果表明:该试纸具有较高的敏感性、特异性和可重复性,检出率与韩国的金标试纸接近,但低于PCR检测法。3种方法总体符合率为92.3%,可以应用于临床检测。关键词:猫瘟热病毒;单克隆抗体;胶体金;免疫层析中图分类号:$852.65文献标识码:A文章编号:1007.7448(2011)02—0082—03引文格式:燕永彬,孙静,艾有为,等.猫瘟热病毒胶体金快速检测试纸的研

3、究[J].经济动物学报,2011,15(2):82.84.87.ColloidalGoldStripforDetectionofFelinePanleukopeniaVirusYANYong—bin,SUNJing,AIYou—wei,TIANLi—hong(CollegeofWildlifeResources,NortheastForestryUniversity,Harbin150040,China)Abstract:Basedontheprincipleofcolloidalgoldlabe

4、lingtechniqueanddoubleantibodysandwichim—munoassay,thecouplingproductfromcolloidalgoldandFPVMcAb(3C4)weresprinkledontheglass—fiberfilm.FPVpolyclonalantibodyandmonoclonalantibodies(goatanti—mouseIgG)weresprinkledonthedetectionlineandcontrollineinnitroc

5、ellulosemembrane,colloidalgoldstripwasexecutedtodetectFPVantigenquickly.Thecontrastdetectionofthe26faecessamplesoftigersshowedthatthedetectionratebycolloidalgoldstripofFPVwashigher.andtheresultwasclosetothatbycolloidalgoldstrip(ASANPHARM.CO.,LTD.Seoul

6、Korea),butlowerthanthatbyPCR.Thetotalcoincidencerateofthethreedetectingmethodswas92.3%bydetecting26faecessamplesoftigers.Keywords:felinepanleukopeniavirus;monoclonalantibodies;colloidalgold;immunochromatographyassay猫瘟热病毒(FelinePanleukopeniaVirus,FPV)有

7、重大意义。又名猫泛白细胞减少症病毒,在自然条件下可感本研究利用快速免疫层析测定原理,采用双染虎、豹、狮、水貂、浣熊等野生动物,是目前严重抗体夹心法,将硝酸纤维素膜作为包被载体,胶体危害国家I级保护动物虎、狮、熊猫、金钱豹等大金作为标记载体,在试纸条上进行抗原抗体反应,型野生动物的病原之一。由于该病的发病率和死建立了检测猫瘟热病毒的胶体金免疫层析法,制亡率很高,且康复动物也可能长期带毒成为潜在备了猫瘟热胶体金诊断试纸条,为FPv的特异诊隐患,严重威胁圈养及野生重要保护动物的养殖断和流行病学调查提供了

8、一种快速、有效的检测和保护_l4j。因此,对猫瘟热病毒进行快速检测具工具。*基金项目:东北林业大学大学生创新实验项ill(101022511),国家林业局野生动植物保护管理项目(2011)作者简介:燕永彬(1989一),男,主要从事野生动物疾病防控研究。孙静,艾有为同为第一作者。收稿日期:2011—03-02*通讯作者:田丽红。Email:tianlihongl122@sina.COB第15卷第2期燕永彬等:猫瘟热病毒胶体金快速检测试纸的研究磷酸盐缓冲液(PB)重悬过夜,1万r/r

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