《现代分子生物学》PPT课件

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1、第一章绪论知识要点分子生物学发展历史分子生物学研究范围重要名词分子生物学基因中心法则第二章染色体与DNA知识要点染色体DNA结构DNA复制DNA修复DNA转座染色体染色体是遗传物质的载体，DNA是遗传物质染色体上的蛋白质包括组蛋白和非组蛋白染色体的基本结构单元是核小体组蛋白的类别和特性原核生物与真核生物基因组的差别C值矛盾DNA结构DNA的一级结构DNA的二级结构——双螺旋模型影响DNA二级结构稳定的因素DNA的高级结构——正超螺旋和负超螺旋DNA复制半保留复制半不连续复制复制的起点、方向和速度DNA聚合酶：原核真核原核生物和真核生物DNA

2、复制的差别DNA修复引起DNA损伤的因素DNA修复方式错配修复碱基切除修复核苷酸切除修复直接修复DNA转座转座子的定义转座子的分类和结构特征原核、真核转座作用的遗传效应第三章生物信息的传递（上）知识要点RNA转录过程和转录后加工启动子与增强子、终止与抗终止原核生物与真核生物mRNA的特征比较RNA转录过程不对称转录原核生物RNA聚合酶：核心酶＋因子真核生物RNA聚合酶：分类、特征、转录产物起始（启动子）、延伸、终止（终止信号）原核与真核启动子的特征增强子的概念和作用特点终止和抗终止RNA转录后加工前体mRNA5’加帽子（m7G），3’端加

3、尾（polyA）RNA剪切：intron和exon的交界序列、选择性剪切RNA编辑原核与真核mRNA的比较原核生物mRNA：半衰期短、多顺反子形式存在、无帽子和尾巴真核生物mRNA：有帽子和尾巴、单顺反子帽子和尾巴的功能第四章生物信息的传递（下）知识要点三联体遗传密码tRNA的结构与功能核糖体的结构与功能蛋白质合成机制蛋白质转运机制遗传密码遗传密码的破译遗传密码的特性：无逗号、不重叠、通用性、简并性、起始密码和终止密码tRNA的结构与功能tRNA的二级结构：三叶草型——四环四臂tRNA的三级结构：倒L型tRNA的功能：密码子与反密码子的配

4、对tRNA种类：起始tRNA与延伸tRNA、同工tRNA、校正tRNA、氨酰tRNA合成酶核糖体结构与功能核糖体组成rRNA序列特征：SD序列原核与真核核糖体结构的差异活性中心蛋白质合成氨基酸的活化肽链的起始肽链的延伸：进位、转位、移位肽链合成的终止蛋白质合成抑制剂蛋白质转运机制翻译——转运同步机制：信号肽的结构特征翻译后的转运机制：细胞膜受体核定位蛋白的转运机制：核定位序列蛋白质的降解：蛋白酶水解、N端氨基酸影响半衰期第五章分子生物学研究方法知识要点分子克隆技术的过程分子杂交的概念PCR反应步骤分子克隆步骤目的基因的获得：cDNA文库、R

5、ACE目的基因与载体分子连接：RE、ligase重组DNA分子导入寄主细胞：细菌转化重组体克隆的筛选：蓝白斑筛选、抗生素cDNA文库构建步骤高质量mRNA的制备反转录生成cDNA与载体分子相连接转入寄主细胞酵母双杂交系统用于分离能与已知靶蛋白质互作的基因基本原理：真核生物的转录因子大多有两个结构分开、功能上独立的结构域组成：DNA结合域（BD）和转录激活域（AD），只有两者在空间上相互靠近才能起始转录。第六章基因的表达与调控（上）知识要点基因表达调控的基本概念操纵子模型原核生物的转录后调控基因表达调控的基本概念组成性表达、诱导和阻遏表达顺式

6、作用元件、反式作用元件操纵子模型操纵子概念Lacoperon：负调控和正调控Trpoperon：弱化调节Araoperon：自身反馈调节原核生物转录后调控翻译起始调控：mRNA二级结构稀有密码子对翻译的影响重叠基因对翻译的影响Poly(A)对翻译的影响翻译的阻遏魔斑核苷酸水平对翻译的影响：严禁反应第七章基因的表达与调控（下）知识要点真核生物基因组的特点和表达调控特点真核生物基因表达调控的多个层次顺式因子和反式因子真核生物基因组的特点单顺反子DNA与蛋白质结合存在大量的非转录和非翻译序列转录的调节区较大RNA转录与蛋白质合成存在空间间隔须经过

7、成熟和剪切过程才能翻译成蛋白质真核生物基因表达调控层次DNA水平：染色质结构变化、甲基化转录水平：顺式因子和反式因子互作转录后水平：剪切翻译水平：5‘帽子结构的识别等翻译后水平：切割、水解、化学修饰顺式因子和反式因子顺式因子：启动子、增强子、沉默子反式因子：转录因子转录因子分为BD和AD两个区域BD：HTH、zincfinger、bZIP、bHLH等蛋白质磷酸化与基因表达受cAMP调控的A激酶受Ca2+调控的C激酶CaM激酶和MAP激酶酪氨酸蛋白激酶激素调节、热激蛋白调节、金属蛋白调节第八章疾病与人类健康知识要点癌症发病机制癌基因概念和分类

8、基因治疗的概念癌基因的概念和分类癌基因：体外引起细胞转化，体内诱发肿瘤。分为v-onc（HIV和HBV）和c-onc两类诱发癌症的因素：物理、化学、生物（点突变、启动子插入、甲基