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1、第十二章核酸的酶促降解和核苷酸代谢本章重点讨论核酸酶的类别和特点，掌握嘌呤、嘧啶环各元素的来源，对核苷酸的生物合成和代谢作一般介绍。第一节核酸的酶促降解第二节核苷酸的分解代谢第三节核苷酸的合成代谢核苷酸的作用核苷酸是核酸生物合成的前体核苷酸衍生物是许多生物合成的活性中间产物（UDP-葡萄糖和CDP-二脂酰甘油分别是糖原和磷酸甘油酯合成的中间物）ATP是生物能量中通用的高能化合物腺苷酸是三种重要辅酶（烟酰胺核苷酸、黄素腺嘌呤二核苷酸和辅酶A）的组分某些核苷酸是代谢的调节物质（cAMP和cGMP是多种激素引起生理效应的中间介质）第一节核酸的酶促降解核酸酶核苷酸酶核苷磷酸化酶核酸核苷酸核苷碱基
2、+戊糖-1-P一、核酸酶二、限制性内切酶磷酸磷酸二酯酶磷酸单酯酶核苷磷酸化酶分解核苷生成氮碱和戊糖的磷酸酯核苷水解酶分解核苷生成氮碱和戊糖说明核酸酶1、核酸酶的分类（按作用于多核苷酸链中的磷酸二酯键分类）⑴根据对底物专一核糖核酸酶(RNase)性行分为：脱氧核糖核酸酶(DNase)非特异性核酸酶⑵根据切割位点分为：核酸内切酶非特异性核酸内切酶特异性核酸内切酶核酸外切酶2、核酸酶的作用特点内切核酸酶对RNA的水解位点示意图5´ppppOHPyPuPyPy1´pppGACUpppGA3´RNAaseIRNAaseIRNAaseT1RNAaseT1Pu：嘌呤Py：嘧啶RNaseA作用于C和U位
3、点，产生-CP或CP；-UP或UPRNaseT1作用于G位点；RNaseT2作用于A位点外切核酸酶对核酸的水解位点3´5´ppppOHBppppBBBBBBB牛脾磷酸二酯酶（5´端外切5得3）蛇毒磷酸二酯酶（3´端外切3得5）GUAGUCCAPPPPPPP5‘POHRNaseARNaseT1RNaseT25’PMaseSpDaseVPDasepGp,Ap,2Up,Gp,2Cp,ApGpApUp,Up,GpCp,Cp，ApGp,ApUpUpGp,CpCpApGpAp,UpUpGp,CpCpA2Gp,Ap,2Cp,2Up,A2pG,2pA,2pU,2pC不同的核酸酶降解作用示意图T1AAAT
4、1A3’-OH限制性内切酶原核生物中存在着一类能识别外源DNA双螺旋中4-8个碱基对所组成的特异的具有二重旋转对称性的回文序列，并在此序列的某位点水解DNA双螺旋链，产生粘性末端或平末端，这类酶称为限制性内切酶.限制性内切酶是分析染色体结构、制作DNA限制图谱、进行DNA序列测定和基因分离、基因体外重组等研究中不可缺少的工具，是一把天赐的神刀，用来解剖纤细的DNA分子。几个定义回文序列：DNA序列180°旋转对称的结构，即DNA一条链上的核苷酸顺序旋转180°后，与其互补链上对应的一段核苷酸顺序相重复平末端：DNA限制性内切酶将DNA两条链交错切开后没有单链突出的DNA片段粘性末端：DN
5、A限制性内切酶将DNA两条链交错切开，形成单链突出的末端限制性内切酶的命名和意义EcoRI序号属名种名株名例：EcoRI，这是从大肠杆菌（Ecoli）R菌珠中分离出的一种限制性内切酶限制性DNA内切酶的特点有高度特异性的DNA内切酶2.专一识别并切割DNA上特定的碱基顺序3.产物仍然为双链DNA片段4.其5’端为磷酸基，3’端为羟基5.细菌利用此酶水解入侵的DNA，限制了外源DAN，对自己起保护作用6.细菌自身的DNA因有甲基化修饰而不会被降解7.限制酶的识别和切割位点通常是4-6bp组成的回文结构常用的DNA限制性内切酶的专一性酶辨认的序列和切口说明‥‥AGCT‥‥‥‥TCGA‥‥‥‥
6、GGATCC‥‥‥‥CCTAGG‥‥‥‥AGATCT‥‥‥‥TCTAGA‥‥‥‥GAATTC‥‥‥‥CTTAAG‥‥‥‥AAGCTT‥‥‥‥TTCGAA‥‥‥‥GTCGAC‥‥‥‥CAGCTG‥‥‥‥CCCGGG‥‥‥‥GGGCCC‥‥BamHIAluIBglIEcoRIHindⅢSalISmaI四核苷酸，平端切口六核苷酸，平端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口某些代表性核酸酶作用底物和产物第二节核苷酸的降解二、嘧啶的降解一、嘌呤的分解磷酸核苷酸酶核苷磷酸化酶核苷酸核苷碱基+戊糖-1-P核苷酶碱基+戊糖嘌呤的分解嘧啶的分解第三节
7、核苷酸的合成代谢一、核糖核苷酸的生物合成二、脱氧核糖核苷酸的生物合成三、单核苷酸转变成核苷二磷酸和核苷三磷酸（自学）四、各种核苷酸的相互转变全合成途径：生物体能够利用CO2、甲酸盐、Gln、Glu、Asp等前体物质，合成各种嘌呤核苷酸和嘧啶核苷酸，把这种利用简单前体物质合成核苷酸的过程称为全合成途径，也称为从头合成途径半合成途径：生物利用现有的嘌呤、嘧啶或核苷合成核苷酸，也称为补救合成途径核糖核苷酸的生物合成核糖核苷酸的生物合成(1
