核酸的酶促降解

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1、第一节核酸的酶促降解第三节核苷酸的合成第二节核苷酸分解代谢第八章核酸的酶促降解和核苷酸代谢第一节核酸的酶促降解核酸酶核苷酸酶核苷酸磷酸化酶核酸核苷酸核苷碱基+戊糖磷酸一、核酸酶1、核酸酶的分类（1）根据对底物的专一性分为（2）根据切割位点分为核糖核酸酶(RNase)脱氧核糖核酸酶(DNase)非特异性核酸酶核酸内切酶核酸外切酶核酸内切兼外切酶1、外切核酸酶对核酸的水解位点5´ppppOHBpppp3´BBBBBBB牛脾磷酸二酯酶（5´端外切53）蛇毒磷酸二酯酶（3´端外切35）非特异性核酸酶，作用于DNA、RNA2、内切核酸酶对RNA的水解位点示

2、意图5´ppppOHPyPuPyPy1´pppGACUpppGA3´RNaseIRNaseIRNaseT1RNaseT1Pu：嘌呤Py：嘧啶牛胰核酸酶曲霉核酸酶特异性核酸酶，只作用于RNA或DNA3、脱氧核糖核酸酶5´ppppOHBpppp3´BBBBBBB牛脾脱氧核糖核酸酶（DNaseII）牛胰脱氧核糖核酸酶（DNaseI）特异性核酸酶，只作用于DNA原核生物中存在着一类能识别外源DNA双螺旋中4-8个碱基对所组成的特异的序列，并在此序列的某位点水解DNA双螺旋链，产生粘性末端或平齐末端，这类酶称为限制性内切酶（ristrictionendon

3、uclease）。限制性内切酶具有很强的专一性，有特异的识别位点，通常具有二重旋转对称性的回文序列限制性内切酶类型Ⅰ型：分子量大于105，多亚基，需S-腺苷蛋氨酸、ATP和Mg2+，识别位点与切割位点相差甚远，产物为异质，是限制与修饰相排斥的多功能酶。Ⅱ型：分子量小于105，需Mg2+，切割位点位于识别位点上，产物为专一性片段，不具修饰酶功能。现在分子生物学研究所用的限制性内切酶均为此类。Ⅲ型：识别位点为5-7bp的非对称序列，切割位点在顺序之外离识别序列5-10bp，切割双链，个别也切割单链。是限制与修饰相多功能酶。常用的DNA限制性内切酶的专

4、一性酶辨认的序列和切口说明‥‥AGCT‥‥‥‥TCGA‥‥‥‥GGATCC‥‥‥‥CCTAGG‥‥‥‥AGATCT‥‥‥‥TCTAGA‥‥‥‥GAATTC‥‥‥‥CTTAAG‥‥‥‥AAGCTT‥‥‥‥TTCGAA‥‥‥‥GTCGAC‥‥‥‥CAGCTG‥‥‥‥CCCGGG‥‥‥‥GGGCCC‥‥BamHIAluIBglIEcoRIHindⅢSalISmaI四核苷酸，平端切口六核苷酸，平端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口限制性内切酶的命名和意义EcoRI序号属名Escherichia种

5、名coli株名R例：EcoRI，是从大肠杆菌（E.coli）R菌珠中分离出的第一种限制性内切酶限制性内切酶是分析染色体结构、制作DNA限制图谱、基因体外重组等研究中不可缺少的工具，誉为“分子手术刀”，用来切割DNA分子。与连接酶（分子缝合针），修饰酶，聚合酶等被称为基因工程的工具酶第二节核苷酸分解代谢2、嘧啶的降解1、嘌呤的降解核苷酸酶核苷磷酸化酶（DNA、RNA）核苷酸核苷碱基+戊糖－1－磷酸磷酸核苷水解酶碱基+戊糖RNA腺嘌呤和鸟嘌呤要经过脱氨氧化转变为黄嘌呤再进行降解不同生物分解嘌呤的酶系不一样生物进化程度愈高，分解嘌呤的能力愈差嘌呤的分解

6、人、猿、鸟非灵长类哺乳动物硬骨鱼尿囊酸鱼类、两栖类尿素乙醛酸CO2NH3低等无脊椎动物关键酶：黄嘌呤氧化酶抑制剂－别嘌呤醇最终产物：尿酸正常人：血尿酸119-357μmol/L（2-6mg/dl）男267.7μmol/L（4.5mg/dl）女208.2μmol/L（3.5mg/dl）血尿酸>8mg/dl结晶沉积组织痛风（gout）嘧啶的分解脱氨基还原打破环内双键水解开环再水解第三节核苷酸的合成代谢一、核糖核苷酸的生物合成二、脱氧核糖核苷酸的生物合成三、单核苷酸转变成核苷二磷酸和核苷三磷酸（自学）四、各种核苷酸的相互转变一、核糖核苷酸的生物合成1、

7、嘌呤核苷酸的生物合成(1)从头合成途径(2)补救途径(自学)2、嘧啶核苷酸的生物合成(1)从头合成途径(2)补救合成途径(自学)从头合成(denovosynthesis)途径：利用氨基酸、磷酸戊糖等简单物质为原料，经过一系列酶促反应合成核苷酸。补救途径(或重新利用，salvagepathway)：利用体内游离的碱基或核苷（现成原料）合成核苷酸。1、嘌呤核苷酸的从头合成途径c、IMP转变为AMP和GMPa、嘌呤环上各原子的来源b、IMP的从头合成合成部位：胞液嘌呤的各个原子是在磷酸核糖焦磷酸（PRPP）的C1位上逐渐加上去的，逐步合成嘌呤环嘌呤环上

8、的N、C原子由氨基酸、甲酸和CO2提供合成过程不是先形成游离的嘌呤，然后生成核苷酸，而是直接形成次黄嘌呤（IMP），由IMP转变成AMP