核酸的酶促降解与核苷酸代谢

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1、11核酸的酶促降解和核苷酸代谢11核酸的酶促降解和核苷酸代谢1、核酸酶的类别和特点(一般介绍)2、核苷酸的生物合成(重点)3、核苷酸分解代谢(重点)核苷酸的分解代谢核苷酸的生物合成小结核酸的酶促降解概述本章重点食物中核酸的吸收利用：食物中的核酸通常以核蛋白的形式存在。核蛋白在胃中受胃酸作用，分解为核酸和蛋白质。核酸在小肠中由一系列的核酸酶催化水解，最后水解产生磷酸、戊糖和含氮碱基，被消化吸收利用同时，在生物体内，各种核苷酸还可以从头合成。因此，对于健康人来说，只要膳食结构合理，一般是不存在核酸缺乏症的。细胞内核酸的酶促降解：对外源DNA或RNA进行识别和降解；自

2、身遗传物质的代谢。概述11核酸的酶促降解和核苷酸代谢核苷酸的分解代谢核苷酸的生物合成小结概述核酸的酶促降解核酸酶（磷酸二酯酶）核苷酸酶（磷酸单酯酶）核苷水解酶(或核苷磷酸化酶)核酸核苷酸核苷磷酸核蛋白胃蛋白质进一步降解小肠小肠小肠嘌呤或嘧啶戊糖(戊糖-1-磷酸))食物中核酸的吸收利用示意图概述11核酸的酶促降解和核苷酸代谢核苷酸的分解代谢核苷酸的生物合成小结概述核酸的酶促降解概述③②11核酸的酶促降解和核苷酸代谢核苷酸的分解代谢核苷酸的生物合成小结概述核酸的酶促降解概述11核酸的酶促降解和核苷酸代谢核苷酸的分解代谢核苷酸的生物合成小结概述核酸的酶促降解11.1.

3、1核酸酶（1）按底物专一性分核糖核酸酶(RNase)脱氧核糖核酸酶(DNase)非特异性核酸酶（2）按切割位点分核酸内切酶核酸外切酶（3）按作用键分水解3’-磷酸酯键(生成5’-磷酸核苷)水解5’-磷酸酯键(生成3’-磷酸核苷)一、分类：11.1核酸的酶促降解核酸的酶促降解核酸酶核苷酸的分解代谢限制性内切酶核苷酸的生物合成小结概述11.1.1核酸酶二、外切核酸酶：外切核酸酶是非特异性的磷酸二酯酶外切核酸酶对核酸(DNA或RNA)的水解位点示意图OH5´ppppBppppBBBBBBB牛脾磷酸二酯酶（5´端外切5得3）,主要得3´-核苷酸。蛇毒磷酸二酯酶（3´端外

4、切3得5）,主要得5´-核苷酸。3´3´5´11.1核酸的酶促降解核酸的酶促降解核酸酶核苷酸的分解代谢限制性内切酶核苷酸的生物合成小结概述11.1.1核酸酶三、内切核酸酶：内切核酸酶是特异性的磷酸二酯酶内切核酸酶对RNA的水解位点示意图OHRNaseT1Pu：嘌呤purinePy：嘧啶pyrimidine5´ppppPyPuPyPypppGCCUpppGA3´RNaseI(牛胰核酸酶)RNaseIRNaseT1(曲霉中分离)3´5´11.1核酸的酶促降解核酸的酶促降解核酸酶核苷酸的分解代谢限制性内切酶核苷酸的生物合成小结概述四、脱氧核糖核酸酶：作用方式：内切酶(

5、切断单链或双链)外切酶(5´→3´切割或3´→5´切割)专一性：专一水解DNA目前还没有发现碱基专一性，但有序列专一性，即限制性内切酶。11.1.1核酸酶11.1核酸的酶促降解核酸的酶促降解核酸酶核苷酸的分解代谢限制性内切酶核苷酸的生物合成小结概述11.1.2限制性内切酶1979年，W.Arber,H.Smith和D.Nathans等发现某些细菌细胞内存在一类能识别一定序列并水解外源双链DNA的内切核酸酶，即限制性内切酶。概念：具有极高的专一性，能识别DNA双螺旋中4-8个碱基对所组成的特异的回文序列，并在此序列的某位点水解DNA双螺旋链，产生粘性末端或平末端，

6、这类酶称为限制性内切酶（ristrictionendonuclease）。11.1核酸的酶促降解核酸的酶促降解核酸酶核苷酸的分解代谢限制性内切酶核苷酸的生物合成小结概述11.1.2限制性内切酶分类：可分三类，Ⅰ类和Ⅲ类兼有限制和修饰功能，其中Ⅰ类切割位点和识别位点不同，目前在重组技术中基本不用。Ⅱ类只具有限制性切割活性，识别和切割位点相同且专一特定，在重组技术中应用广泛。11.1核酸的酶促降解核酸的酶促降解核酸酶核苷酸的分解代谢限制性内切酶核苷酸的生物合成小结概述11.1核酸的酶促降解核酸的酶促降解核酸酶核苷酸的分解代谢限制性内切酶核苷酸的生物合成小结概述常用的

7、DNA限制性内切酶的专一性酶辨认的序列和切口说明‥‥AGCT‥‥‥‥TCGA‥‥‥‥GGATCC‥‥‥‥CCTAGG‥‥‥‥AGATCT‥‥‥‥TCTAGA‥‥‥‥GAATTC‥‥‥‥CTTAAG‥‥‥‥AAGCTT‥‥‥‥TTCGAA‥‥‥‥GTCGAC‥‥‥‥CAGCTG‥‥‥‥CCCGGG‥‥‥‥GGGCCC‥‥BamHIAluIBglIEcoRIHindⅢSalISmaI四核苷酸，平端切口六核苷酸，平端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口六核苷酸，粘端切口EcoRI序号属名种名株名限制性内切酶的命名和意义命名：例：

8、EcoRI，大肠杆菌（E