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《GBT 5009.23-1996 食品中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2的测定方法》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华人民共和国国家标准GB/'r5009.23---1996食品中黄曲霉毒素Bi,B2,Gi,G:的测定方法fG135009.2385MethodfordeterminationofaflatoxinsB=BZ,G=Gzinfoods1主题内容与适用范围本标准规定了各种食品中黄曲霉毒素B=B,G=G:的测定方法。本标准适用于各种食品中黄曲霉毒素B,,Bz,G=G:的测定。在薄层板上的最低检出量:黄曲霉毒素B=G，为0.004pg,Bi,G2为0.002pg。本方法的最低检出浓度:黄曲霉毒素Bl,、G,为5pg/kg,B
2、_Gz为2.5pg/kgo2引用标准G/T5009.22食品中黄曲霉毒素B，的测定方法第一篇薄层色谱法3原理样品经提取、浓缩、薄层分离后，在365nm紫外光下，黄曲霉毒素B=B:产生蓝紫色荧光，黄曲霉毒素G=G，产生黄绿色荧光，根据其在薄层板上显示的荧光的最低检出量来定量。4试剂4.1所用试剂同GB/T5009.22中3.1-3.13.4.2次氯酸钠溶液(消毒用):配制方法见GB/T5009.22中3.16,4.3苯一乙醇一水(46+35+19)展开剂:取此比例配制的溶液置于分液漏斗中，振摇5min,静置过夜。将I:下
3、层溶液分别置于具塞瓶中保存，上下层交界的溶液弃去不要。若溶液出现混浊，则在800C水浴上加热，待清晰后，即停止加热，取上层溶液作展开剂用。另取一定量的下层溶液置小血中，再放于展开槽内将薄层板放入展开槽内，预先饱和10min后展开。4.4硫酸(1+3).4.5黄曲霉毒素B=B,G=G:标准溶液。4.5.1单一标准溶液(10pg/mL):准确称取黄曲霉毒素B,G，标准品各1^-1.2mg，黄曲霉毒素B、G标准品各。.5-0.6mg，用苯一乙睛混合液作溶剂。配制方法、浓度及纯度的测定参照GB/T5009.22‘干，3.14黄
4、曲霉毒素B=B=G=G:的分子量及用苯一乙睛作溶剂时的最大吸收峰的波长及摩尔消光系数见卜表中华人民共和国卫生部1996一06-19批准1996一09一01实施GB/r5009.23-1996战曲8毒名称最大吸收峰波长，nm摩尔消光系数分子量801i;31631290Ii3483141035332820354:;130452各标礁使用液:以F各标准液均用苯一乙AN混合液配制。4.5.2.1鲜曲霉毒素混合标准使用液I:每毫升相当于。.2pg黄曲霉毒素B=G，及。.1pg黄曲霉毒索“、(，作定位用4.5.2.2黄曲霉毒素混合
5、标准使用液u:每毫升相当于0.04pg黄曲霉毒素B,,G，及。02pg黄曲霉毒索13=,C:.作最低检出ift用。5仪器HGB,T5009.22中4.1-4.96分析步骤6.1取样:同GB/T5009.22中5.1.6.2提取:f,flGB/T5009.22中5.2.6.3i'l!U定:6.3.1单向展开法6.3.1.1薄层板的制备:同GB/T5009.22中5.3.1.1,6.3.1.2点样:lalGB/T5009.22中5.3.1.2.滴加式样如下:第一点:10砂黄曲霉毒素混合标准使用液D。第屯点:201l，样液。
6、第一点:20川样液+10IL黄曲霉毒素混合标准使用液I,第四点:20川_样液+10KL黄曲霉毒素混合标准使用液工。6.3.1.3展开与观察黄曲霉毒素B;,B2,G=G:的比移值依次排列为B,>Bz>G,>G2a在展开槽内加10mL无水乙醚，预展12cm，取出挥干，再于另一展开槽内加10mL丙酮一三氯甲烷t8+92),展开10^12cm，取出。在紫外光灯下观察结果，方法如下。6.11.11由于样液点上加滴黄曲霉毒素混合标准使用液I或I，可使黄曲霉毒素B=B,G=G,分别‘拼羊液中的黄曲霉毒素B=B,G=G,荧光点重叠。如
7、样液为阴性，薄层板上的第三点中黄曲霉毒素B=h、(.、(;依次为0.0004,0.0002,0.0004,0.0002Wg，可用作检查在样液内黄曲霉毒素B1,B,G=G,的展低检出址是否正常出现。如为阳性，则起定位作用。薄层板上的第四点中黄曲霉毒素B1,B,G=G,依次为。.002.0.001,0.002,0.001Vg，主要起定位作用。6.31.3.2若第二点在与黄曲霉毒素B=B:的相应位置上无蓝紫色荧光点;或在与黄曲霉毒素G1,Gz的flIIw位Wil上无黄绿色荧光点，表示样品中黄曲霉毒素B=G，含量在5pg/kg
8、以下;B_G2含量在2.5fig,kg以「;如在相应位置上有以上荧光点，则需进行确证试验。631.4确证试验:6.3.1.4.1黄曲霉毒素与三氟乙酸反应产生衍生物，只限于B，和G,;B:和G:与三氟乙酸不起反应!，和G。的衍生物比移值为B,>G,。于薄层板左边依次滴加两个点第点:10PI_黄曲霉毒素混合标准使用液I。第点20川样液
