聚苯乙烯荧光微球的制备及性能考察_聂微

《聚苯乙烯荧光微球的制备及性能考察_聂微》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、第30卷第5期沈阳药科大学学报Vol.30No.52013年5月JournalofShenyangPharmaceuticalUniversityMay2013p.329文章编号:1006-2858(2013)05-0329-06聚苯乙烯荧光微球的制备及性能考察122211*聂微，王颜红，张红，林桂凤，李娟，赵春杰(1.沈阳药科大学药学院，辽宁沈阳110016;2.中国科学院沈阳应用生态研究所，辽宁沈阳110011)摘要:目的制备一种应用于流式细胞术的绝对计数试剂。方法以乙醇为分散介质，聚乙烯吡咯烷酮(polyvinylpyrrolidone，PVP)为分散剂，偶氮二

2、异丁腈(azodiisobutyronitrile)为引发剂，采用分散聚合法，制备聚苯乙烯(polystyrene，PS)微球。以三氯甲烷和异丙醇为溶胀剂，吖啶橙(acridineor-ange，AO)和罗丹明101(rhodamine101，R101)为荧光素，通过溶剂逐渐挥发法对PS微球染色。结果制备了粒径范围在1～5μm的单分散PS微球，染色后的微球在荧光显微镜下可观察到被激发出红、绿、蓝等多种颜色的荧光。结论制备的PS荧光微球荧光发射光谱宽，能满足流式细胞仪对不同荧光微球的检测。关键词:分散聚合;聚苯乙烯;荧光微球;流式细胞仪中图分类号:R94文献标志码:A流

3、式细胞技术(flowcytometry，FCM)是一种粒径均一的聚苯乙烯微球，采用溶剂逐渐挥发法［12］对快速直线流动状态中的单列细胞或生物颗粒进对微球染色。该染色方法与其他染色方法相行逐个，多参数，快速的定性、定量分析或分选的比，解决了荧光素容易泄露的问题，且荧光素吸附技术。具有检测速度快、测量参数多、采集数据量效率高，易制备高亮度的荧光微球。大、分析全面、分选纯度高、方法灵活等特点，已经荧光微球分子技术是近年来化学材料科学活［1］成为近代科学研究中的热门专题。该技术集跃发展的产物，应用范围非常广泛，如在生物检流式技术、荧光微球、激光、数字信号处理和传统测、疾病诊断

4、、免疫检测、液相芯片技术、高通量药化学技术为一体，已被广泛应用于代谢过程分析、物筛选等方面都有很重要的应用，而目前我国应［13］药物发明、高通量分析、疾病诊断等许多领域。但用的荧光微球基本上依赖进口。因此，本文作是该技术的实现通常需要一种绝对计数试剂，而者所研究的荧光微球将对我国生物医学等领域的许多流式细胞仪的绝对计数产品是用带有荧光素发展提供重要的理论支持和实验依据。的聚苯乙烯微球，且要求其粒径范围为1～［2－4］1仪器与材料10μm。目前，微米级单分散聚合物微球的制备方法BS124S万分之一电子天平(北京赛多利斯仪［5］较多，包括乳液聚合法、悬浮聚合法和分散聚器系

5、统有限公司)，KQ-250B超声波清洗器(昆山［6－8］合法。乳液聚合法只能制备粒径小于1μm超声仪器有限公司)，DZF系列真空干燥箱(上海的颗粒，悬浮聚合法制备的聚合物微球粒径则在跃进医疗器械有限公司)，DF-101S集热式恒温加50～1000μm内，且均为多分散性。分散聚合法热磁力搅拌器(巩义予华仪器有限责任公司)，荧是一种特殊的沉淀聚合方法，由于其适用于多种光显微镜DM4000B(德国徕卡公司)，傅里叶变换单体且容易控制，容易得到分散均匀的聚合物微红外光谱仪Nicolet6700(赛默飞世尔科技有限公球，已成为制备单分散、微米级聚苯乙烯微球的主司)，环境扫描电镜

6、Quanta250(荷兰FEI公司)，［9－11］要方法。Facscaliber流式细胞仪(美国BD公司)，V-630双本实验设计了一种绝对计数试剂—聚苯乙烯光束紫外可见分光光度计(日本JASCO分光公荧光微球的制备方法。通过单分散聚合法制备了司)。收稿日期:2012-05-08基金项目:国家自然科学基金青年基金资助项目(81102765)作者简介:聂微(1988-)，女(汉族)，湖南益阳人，硕士研究生，E-mailweiwei8jiajia@126．com;*通讯作者:赵春杰(1960-)，男(汉族)，吉林农安人，教授，博士，主要从事体内药物分析及中西新药开发研究，

7、Tel．024-23986299，E-mailzcjjljj@sina．com。330沈阳药科大学学报第30卷苯乙烯(styrene，天津瑞金特化学品有限公2.3荧光素吸附量考察司)用质量分数10%NaOH水溶液洗涤2次，再用按“2.2”条方法分别用AO和R101对PS微蒸馏水洗至中性，无水硫酸镁干燥过夜，过滤减压球染色，当所有溶剂挥发后用乙醇洗涤微球至洗蒸馏备用;偶氮二异丁腈(azodiisobutyronitrile，天涤液无色，合并洗涤液并定容至一定体积，测定。津博迪化工有限公司)用体积分数95%乙醇溶液3结果与讨论重结晶后使用;聚乙烯吡咯烷酮