高效液相色谱法测定菠萝中多酚类化合物_易湘茜

高效液相色谱法测定菠萝中多酚类化合物_易湘茜

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1、DOI:10.13995/j.cnki.11-1802/ts.2006.02.027圈砚落纽圈侧高效液相色谱法测定菠萝中多酚类化合物关易湘茜韦保耀滕建文高程海(广西大学轻工与食品工程学院,南宁,530004)、、。摘要利用高效液相色谱法(HPLC)分析了多酚类物质在菠萝果皮果肉果心中的含量及分布情况色谱条件:色谱柱为DinislCI,柱(250mmX4.6,5拜m),流动相为乙睛和.3%,,~~0醋酸溶液柱温为25℃流速为.,1omL,280n。,。,而in线性梯度洗脱检测波长为m在此色谱条件下各组分均得到良好分离经测定菠萝果皮

2、,、、、,中含有4种酚类物质为没食子酸儿茶素表儿茶素阿魏酸含量较高;果肉及果心中酚类物质为表儿茶素和阿魏酸,含量较低。关键词菠萝,多酚,高效液相色谱,,菠萝是我国热带和亚热带地区四大名果之一,除用真空泵(郑州长城科工贸有限公司)pH计组织捣,、。,,aters6aters鲜食外目前主要用于罐头果汁及浓缩汁的加工但碎机w00高效液相色谱(美国W公司),,-由于酚类物质参与的酶促反应及其自身的化学氧化聚自动进样器9%紫外二极管矩阵检测器Milenin,,。。合常常造成果汁的褐变影响果汁的外观和品质um犯色谱管理软件常用的测定酚类物质

3、的方法有紫外分光光度法、1.3色谱条件、,:.,薄层色谱法高效液相色谱法和毛细管电泳法等其色谱柱DiamonsilC18柱(250mmX46mm5拜;:25℃:.n;:.中紫外分光光度法和薄层色谱法只能测定总酚或某m)柱温;流速10mL/mi进样体积100,。::n。一类酚的含量不能确定具体的种类和含量由于高拼L;检测器紫外检测器;检测波长280m流动效液相色谱具有流动相消耗少,,相:(,B.3%醋酸溶液;分析时间短结果准A)乙睛()质量分数0采用的、,。,..,确可靠等特点近几年来得到了迅速发展目前国梯度洗脱程序:0一5min

4、20%A;501一1000min,、、、内外已有文献对苹果[’2〕梨〔’〕葡萄〔4〕柑橘[5]等水;1..n,,..90%A001一1500mi10%A1501一2500,,。果及其果汁中的酚类物质进行了测定但未见有采用min20%A液相色谱法对菠萝中酚类的测定。1.4样品前处理2j[,菠萝皮(或果肉或果心)509加入1mL6mol几实验部分,的HCI在组织捣碎机内匀浆几分钟;加50mL的蒸.11材料与试剂馏水,用6mol几HCI调pH至2.0;然后每次加人的:,。新鲜菠萝成熟的卡因品种市场购买,,5min,,50mL的乙酸乙醋

5、萃取2次搅拌离心分离,乙睛色谱纯(iFhser;;1mola公司)水为石英亚沸蒸馏出醋相和水相将水相用几的NOH调pH至水并用MilliQ50(美国Millipore公司)超纯水仪处.,,70每次加人50mL的乙酸乙醋萃取2次分离出,·、、、理电阻率)18Mnem;醋酸HCINaOH乙酸乙醋。,一Zh,,醋相将醋相合并在18℃下冷冻脱水用脱,,,,均为分析纯;没食子酸阿魏酸表儿,,绿原酸儿茶素脂棉过滤将醋相在30℃下旋转蒸干再用5mL的,,a;茶素标样(纯度)9%iSgm公司)儿茶酚黄酮标。甲醇定容,。ua品(纯度)97%Flk

6、公司)1.5测定方法1.2仪器准确称取一定量的标准品用乙睛配置成不同浓一,一电子分析天平(MettertoledoGroup)UV1601。度的溶液进行标准谱图及回归曲线的测定经前处,一紫外可见光分光光度计(日本岛津)RE52AA旋转理的样品用.拼m,045针头过滤器过滤后在最佳测,一蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)SHB班A循环水多。,定条件进行HPLC分析进样量为10拼L根据测得,第一作者:硕士研究生(韦保耀为通讯作者)。各组分保留时间及紫外吸收谱图与标准图谱对比对.!o05370一7一;,广西科技攻关项目资助(N桂科攻07l)

7、所含酚类物质进行定性分析依据峰面积利用外标:2005一08一22,:2005一01一04收稿日期改回日期。法由各标准品的回归方程计算样品浓度20必年第32卷第2期(总第2,8期)}992.3标准图谱结果与讨论2,。,按分离条件得到标准图谱如图l所示可见7分离条件的选择种酚类物质均达到2了基线分离。用乙睛一水作流动相时有些色谱峰稍拖尾,且有目门ǎln90703()50l0。些物质(如黄酮)不出峰这可能是因为酚经基易产澎遥咨à二V生电离,在固定相表面有双重的保留机制叫。改用.乙睛一0,3%醋酸溶液作流动相可使酚的电离被抑制,成为中性

8、分子在反相条件下的疏水缔合物使分离效`。·’“-,打该不百。瑞寸万了了而洁i矿屯。卞果和峰型得到较大改善酸浓度对其中一些酚类物。rl保留时丫l1]/j,,,质(尤其是对绿原酸)的出峰时间和峰型有很大的影l一没食子酸2一儿茶素3一表儿茶素。,,.n,,,响最后综合

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