《AES显色培养基》PPT课件

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1、新型食源性致病菌检测显色培养基华粤行仪器有限公司邹黎明传统培养基方法微生物分析的主要方法原理:糖发酵Ex:乳糖发酵用于大肠菌群检测氧化还原Ex:如H2S基础培养基用于Salmonellaspp.缺点:大部分生化反应只是用于检测微生物种群(属).需要转代浪费金钱和时间:大部分需要确认实验传统培养基方法显色及荧光底物技术显色及荧光底物:由化学及合成技术获得特殊酶天然裂解成相似结构的分子酶裂解时释放发色及荧光混合物专一性酶活性，目视观察应用:鉴定板快速酶测试接加至培养基中(固体和液体)减少和降低确认测试量显色及荧光底物技术底物结构共价键(糖苷的,肽聚,磷酸二氢聚…)由酶进行专一性识别糖类脂类蛋白胨

2、色原底物结构共价键结合专一酶糖类脂类蛋白胨色原非裂解底物:不显色糖类脂类蛋白胨色源游离或二聚物可显色ALOA®:L.monocytogenesdetectionandenumerationinfoodsamples食品中单增李斯特菌检测CHROMOGENICCULTUREMEDIANEWAPPLICATIONSASAP®:Salmonelladetectioninfood,veterinaryandclinicalsamples食品、兽药及临床样品中沙门氏菌检测ESIA®:Enterobactersakazakiidetectionindehydratedfoodandenvironment

3、alsamples脱水食品及环境样品中阪崎肠杆菌检测ALOA®AgarListeriaacc.Ottaviani&AgostiChromogenicmedium单增李斯特菌检测和计数培养基ALOA®原理:Beta-glucosidaseactivityBluecoloniesΒ-葡萄糖苷酶活性，蓝色PhospholipaseactivityOpaquehalo磷酸酶活性，混浊晕Listeriaspp.ListeriamonocytogenesAloa单增李斯特菌的选择性ListeriainnocuaListeriamonocytogenes相同的菌落L.mListeriamonocytoge

4、nes可非常清晰地分辨单增李斯特菌L.i混合李斯特氏菌存在的问题单增李斯特菌和其它无毒李斯特菌在LEB培养基中生长对比(MacDonaldandcoll.-1996)种类繁殖一代的时间总代数.(24H-LEB)L.mono70min21L.innoc55min26例如:在225mL增菌培养基中各有1个细胞24小时增菌后-在5µl(在PAL/OXF上的接种量):5个L.mono(单增李斯特氏菌)和150个L.innocua(无毒李斯特菌)混合李斯特氏菌存在的问题假如随机挑取5个菌落确认，在X个无毒李斯特菌中有1个单增李斯特菌，被检出的可能性如下：可能性66%1/415%5%X=ratioL.i

5、/L.m4192999ALOAOneDayalternativemethod:分析方法图25g食品样品+225mlHALFFRASERBROTH24H/30°C涂布0.1mlonALOA24H/37°C存在典型菌落:不存在典型菌落:确认*不存在单增李斯特氏菌*:糖/溶血试验ALOA®认证AFNORvalidation(ALOAONEDAYMETHOD-France)CompendiumCanadaregisteredBAMregistered(FDAapproval)NMKLapproval(Sweden)ISO:preferredreferenceculturemediaforLi

6、steriamonocytogenesdetectionandenumeration(ISO11290–1&2revision–publicationinJanuary2005)ASAP®食品、兽药及临床样品中沙门氏菌检测ASAPPrinciple:C8酯酶活性Beta-葡萄糖苷酶活性粉红及紫色菌落Salmonella蓝色菌落Klebsiella,Enterobacter白色不透明琼脂增强颜色对比易读数ASAP®Examples:C8-酯酶检测Beta-葡萄糖苷酶活性C8-酯酶和葡萄糖苷酶活性检测白色菌落粉红至紫红菌落Salmonellaspp.蓝至菌绿色菌落Klebsiella蓝紫色菌落S

7、erratia其它类型E.coli,Citrobacter,Proteus,Pseudomonas…ESIA®阪崎肠杆菌分离培养基Principle:α葡萄糖苷酶蓝色菌落紫红色菌落其它大肠菌群E.sakazakiiESIA®ESSB/ESIA®E.sakazakii检测流程25gsample+225mlESSB18/24H–37°CIsolation–ESIA18/24H–44°C48H内出阴性结果和阳性初筛