地龙活性蛋白的分离提取

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1、单位代码10006学号10101048分类号R284.2毕业设计(论文)地龙活性蛋白的分离提取学院名称生物与医学工程学院专业名称生物医学工程学生姓名李秦指导教师荣龙2014年6月地龙活性蛋白的分离提取李秦北京航空航天大学北京航空航天大学本科生毕业设计（论文）任务书Ⅰ、毕业设计（论文）题目：地龙活性蛋白的分离提取Ⅱ、毕业设计（论文）使用的原始资料（数据）及设计技术要求：1.根据文献,学习各种地龙活性蛋白的提取方法，如回流法，超声法，微波法，闪提法等；2.查阅文献，确定各方法的影响因素，学习正交实验的设计思路;

2、3.根据实验室的实验条件，进行闪提法提取地龙活性蛋白的试验,探索工艺流程，优化工艺条件；4．进行正交实验，确定最优条件；5.根据所得的最优条件完成蚯蚓多肽、地龙活性蛋白的联合提取实验。Ⅲ、毕业设计（论文）工作内容：（1）根据地龙研究的相关文献，进一步查阅资料，了解国内外对地龙活性蛋白提取分离的研究状况；（1月-3月）（2）翻译所查得的文献，根据文献和实际情况制定实验方案；（3月上旬）（3）进行闪提法的提取实验，探索工艺流程；（3月-4月上旬）（4）进行正交实验，确定最优工艺条件；（4月中旬）（5）按照确定的

3、最优工艺条件，进行重复实验，检测地龙活性蛋白的含量；（4月下旬）（6）完成地龙多肽和地龙活性蛋白的联合提取；（5月上旬）（7）撰写毕业设计论文和PPT，准备答辩。（5月-6月）Ⅳ、主要参考资料：[1]廖怡,荣永海,荣龙.从蚯蚓中联合提取抗氧化酶SOD,CAT的方法研究[J].天然产物研究与开发,2012,24(11):1538-1544.[2]商桂娜,荣永海,荣龙.蚯蚓GSH—Px提取与纯化的研究[J].天然产物研究与开发,2013,25(1):76-82.[3]WenliLi,ChongWang,Zhen

4、junSun.Vermipharmaceuticalsandactiveproteinsisolatedfromearthworms.Pedobiologia-InternationalJournalofSoilBiology.Pedobiologia54S(2011)S49-S56;[4]ProcházkováP,DvořákJ,ŠilerováM,etal.MolecularcharacterizationoftheironbindingproteinferritininEiseniaandrei

5、earthworms[J].Gene,2011,485(2):73-80.[5]毛泉明,张宁,王忆勤,等.地龙中蛋白质的提取工艺研究[J].上海中医药杂志,2010,44(3):74-77.[6]杨丰云,付廷明,郭立玮,等.响应面分析法优化湿法超微粉碎地龙活性蛋白的提取工艺[J].中国实验方剂学杂志,2012,18(10):33-37.生物与医学工程学院生物医学工程专业类101012班学生李秦毕业设计（论文）时间：2014年3月1日至2014年6月6日答辩时间：年月日成绩：指导教师：兼职教师或答疑教

6、师（并指出所负责部分）：系（教研室）主任（签字）：注：任务书应该附在已完成的毕业设计（论文）的首页。北京航空航天大学毕业设计(论文)第页本人声明我声明，本论文及其研究工作是由本人在导师指导下独立完成的，在完成论文时所利用的一切资料均已在参考文献中列出。作者：李秦签字：时间：2014年6月北京航空航天大学毕业设计(论文)第III页北京航空航天大学毕业设计(论文)第III页地龙活性蛋白的分离提取学生：李秦指导教师：荣龙摘要地龙(Geosaurus)，又名蚯蚓，属环节动物门寡毛纲类，在我国是一种非常传统的动物类中

7、药材。10年版的《中华药典》中，记载着它的功效为清热定惊，通络，平喘，利尿。地龙体内富含蛋白质，含有胶原酶、纤溶酶、蚓激酶、核酸、微量元素等多种成分，具有改善微循环、溶解血栓等作用。本实验的目的是探索并优化一种地龙体内活性蛋白的分离与提取方法，并使工艺更适合大批量的、药用的生产。传统的地龙蛋白提取方法主要有匀浆法，浸泡煎煮法等。这些提取工艺、提取条件等都还不成熟，主要缺点包括提取时间长，提取效率低，获得的蛋白质纯度低并且不适于大量的工业生产。因而本实验在提取工艺流程中综合性的应用了闪提、超声与离心等工艺手段

8、，缩短了提取时间并提高了提取效率，再与一些纯化处理过程互相配合，提取出含有多种地龙活性蛋白的蚓多酶。本实验通过单因素实验与正交试验设计，对影响蛋白质收率的一些因素，包括固液比，pH值和闪提时间进行了优化。本实验得到的最佳工艺条件是：固液比1:4，pH值7.7，闪提时间30s；得到的蛋白质含量为13.52%。关键词：地龙，活性蛋白，提取工艺，正交试验，蚓激酶北京航空航天大学毕业设计(论文)第III页Extracti