结核病实验室生物安全及菌株运输

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1、结核病实验室生物安全及菌株运输内容一、结核病实验室生物安全二、结核菌株或样本运输三、风险评估一、结核病实验室生物安全结核杆菌的生物学性状1、结核杆菌为细长略带弯曲的杆菌，约1-4×0.3-0.6µm，常聚集成团，牛型比人型略粗短；2、分枝杆菌属的细菌细胞壁脂质含量较高，约占干重的60%，特别是其中的大量分枝菌酸可影响染料的穿入；3、一般用萋-尼（ZiehlNeelsen）抗酸性染色法，以5%石炭酸复红加温染色后可以染上，但着色后不易被盐酸酒精脱色；结核杆菌的生物学性状4、若再加用美蓝复染，则分枝杆菌呈红色，而其它细菌及背景中的物质为蓝色；5、专性需氧，最适温度为37℃，低于30℃或高于42

2、℃均不生长；营养要求较高，生长缓慢，初次分离需要营养丰富的培养基。常用的有Lowenstein-Jensen培养基，内含蛋黄、甘油、无机盐和孔雀绿等。6、细胞壁的脂质含量较高，影响营养物质吸收，故生长缓慢，在一般培养基中每分裂一代需要10多个小时，在人体内需24-36小时；结核杆菌的生物学性状7、一般10-30天可见菌落生长，菌落呈颗粒、结节或花菜状，乳白色或米黄色，不透明；8、结核杆菌细胞壁中含有大量脂质，可防止菌体水分的丢失，故对干燥的抵抗力特别强，沾附在尘埃上保持传染性8-10天，在干燥痰内可存活6-8个月；9、结核杆菌对湿热敏感，在液体中加热62-63℃后15分钟或煮沸即被杀死；结

3、核杆菌的生物学性状10、结核杆菌对紫外线敏感，直接日光照射数小时可被杀死，可用于结核患者衣服、书籍等的消毒；11、结核杆菌的抵抗力与环境中有机物的存在有密切关系，如痰液可增强结核杆菌的抵抗力，因大多数消毒剂可使痰中的蛋白质凝固，包在细菌周围，使细菌不易被杀死；12、5%的石炭酸在无痰时30分钟可杀死结核杆菌，有痰时需要24小时；5%的来苏儿无痰时5分钟杀死结核杆菌，有痰时需要1-2小时；结核杆菌的生物学性状13、结核杆菌对酸（3%HCL）或碱（4%NaOH）有抵抗力，15分钟不受影响，可在分离培养时用于处理有杂菌污染的标本和消化标本中的粘稠物质；14、结核杆菌对1：75000结晶紫或1：1

4、3000孔雀绿有抵抗力，加在培养基中可抑制杂菌生长；15、结核杆菌对链霉素、异烟肼、利福平、环丝氨酸、乙胺丁醇、卡拉霉素、对氨水杨酸等敏感，但长期用药容易出现耐药性，而吡嗪酰胺的耐药性<5%。实验室安全操作—原则1、实验室应按等级要求完善实验设施，如生物安全柜的抽风排风功能、紫外灯消毒、生物安全柜内的除菌滤膜定期更换等；2、普通实验室应注意气流方向，实验过程中尽量避免强气流变化而产生气溶胶（如：人员走动等）；3、易产生气溶胶或出现溅出的操作,如涂片、离心或其它操作，应在BSL-2实验室的Ⅱ级生物安全柜中进行，并使用个体防护设备；4、尽可能减少使用注射器针头，实验中使用注射器时，用过的针头切

5、勿再重新入套或拔开注射器与针头，应直接放入锐气收集器，以免划破皮肤造成接种感染；5、试验结束后，操作过程中所有可能与生物危险物接触或被污染的实验器械或物品，能够高压的必须进行高压消毒；6、实验中发生意外污染情况，应立即报告。实验室安全操作—原则实验室安全操作-意外事故处理1、实验过程中，如标本或含标本的前消化处理液被打翻，污染操作台或地面，应以吸满75％乙醇溶液的卫生纸覆盖污染区，15分钟后卫生纸方可移去；2、实验过程中，如污染物溅落到身体表面，或有割伤、刺伤、烧伤、烫伤等情况发生，应立即停止实验并进行紧急处理；更换被污染的工作服，皮肤表面用消毒液清洗，伤口以碘酒及酒精消毒，眼睛用无菌生理

6、盐水冲洗；3、被污染的器械等立即浸泡于含氯消毒剂或75％乙醇等溶液中，实验完成后再进行高压消毒处理；4、如果发生气溶胶污染或大面积污染，应立即停止实验并关闭实验室，对实验区域和实验室进行紫外灯照射消毒2小时以上；对污染区域进行空气熏蒸消毒。实验室安全操作-绝对禁止的处理方法1、有可能造成污染面积扩大，如使用75％乙醇或甲酚皂液擦洗被污染的区域；2、直接用火焰对未经任何处理的污染地面、操作台、器械进行烧灼处理；3、使用消毒效果未经证实的消毒剂进行消毒；4、使用低浓度的消毒剂和紫外灯进行短时间、长距离照射消毒。实验室消毒与灭菌1、物理消毒：紫外线、高压灭菌2、化学消毒：乙醇、过氧乙酸、苯酚、含

7、氯消毒剂3、注意事项物理消毒—紫外线1、紫外线对结核杆菌有一定的杀灭作用，用辐射强度在100μw/cm2以上的30W紫外线灯、相对湿度50%～70%的条件下，照射40min以上，对空气中结核杆菌的杀灭效果可达99.9%以上；2、在液层厚度3mm含菌107～108cfu/ml的结核杆菌的菌悬液，用10W紫外线灯在距离0.5m处持续照射3分钟，在距离1m处持续照射10分钟后，菌悬液经培养无活菌生长；3、紫外线穿透力弱，通常用