苯系物的高效液相色谱分析

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1、苯系物的高效液相色谱分析色谱技术色普技术是指借在两相间分配原理而使混合物中各组分分离的技术。其中一相是不动的称之为固定相；另一相是携带混合物流过此固定相的流体称为流动相分离原理在色谱分析过程中，当流动相携带者混合组分流经色谱柱的固定相时就会与固定相发生作用，由于各组分在结构和性质上的差异与固定相发生作用的大小、强弱也有差异，于是在同一推动力作用下，各组分在固定相中的滞留时间不同，当经过适当长度的色谱柱以后，各组分就会按先后不同的次序流出色谱柱，从而获得分离。样品组分分离示意图色谱图检测信号和时间的关系图不同的色谱峰对应相应的组分可以得到相应组分的保留时间和峰面积信息。保留时间–定性分析峰面积

2、–定量分析液相色谱法以液体为流动相的色谱分析方法高效液相色谱法二十世纪六十年代中期发展起来，在经典液相色谱基础上，引入气相色谱塔板理论，技术上采用高压输液泵，高效固定相和高灵敏度检测器，实现了分析速度快、分离效能高和操作自动化，故称之为高效液相色谱。不受样品挥发性和稳定性的限制而适于分离：生物大分子离子型化合物不稳定的天然产物各种高分子化合物特点反相色谱法流动相极性大于固定相极性的分离体系固定相：C18、C8等流动相：水或缓冲溶液与有机溶剂（甲醇、乙腈）的混合液分离机理：被分离物质与固定相疏水作用力的差别特点：操作系统简单、色谱分离过程稳定、分离技术灵活多变高效液相色谱仪（VARIANPro

3、star)高压输液系统进样系统分离系统检测记录系统储液灌高压输液泵梯度淋洗装置六通阀进样器色谱柱紫外检测器（UV）计算机保留值定性色谱保留值（保留时间或保留体积）是色谱定性的依据保留时间：组分从进样到出现峰最大值所需的时间归一化法定量使用条件：样品中所有组分都要流出色谱柱，并给出信号。特点：简便、准确、对进样量的要求不苛刻不足：对某些不需要测定的组分也必须测出其信号及校正因子实验内容1保留值定性2归一化法定量实验条件固定相：C184.6×100mm流动相：甲醇：水＝87：13进样量：10μl流量：1.0ml/min检测器波长：254nm实验注意事项1开机，待柱压稳定后进样分析2分析下一个样品

4、之前用待测液洗针3分析结束后激活WashA方法冲洗色谱柱60min4StopPump待柱压降为零后依次关机实验要求1严格按照仪器操作规程操作2认真做好原始实验数据记录3实验后进行卫生清扫