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《青、草、鲢、镰四大家鱼的血红蛋白和红细胞乳酸脱氢酶同工酶分析 1)》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、遗传HEREDITAS(Beijing)8(2)"25-271986青、草、FJlt四大家鱼的血红蛋白和红细胞乳酸脱氢酶同工酶分析‘’阎景智王国恩2)严绍颐（中国科学院发育生物学研究所，北京）过去对物种的分类一般沿用形态特征的比述生理盐水洗2次。按红血球体积的1-1.5体较分类法。随着生物学中各种新技术的应用及积加无离子水，振荡破碎红血球。然后再在40C各学科间的相互渗透，用生物化学等方法来鉴以每分钟3,000转离心30分钟。所得红色透别物种的特异性和它们在进化上的亲缘关系已明的上清液即含Hb及各种酶。日益多见［[1,73。特别是对某
2、些基因的特定产物（二）淀粉凝胶的制备所用的淀粉是—一些特异性蛋白和酶有了可靠的鉴别方加拿大（ConnaughtLaboratorisLimited,Ontario,法，所以它们已被用于鉴别生物遗传特征或器Willowdale）出‘品的马铃薯水解淀粉。凝胶按官特异性的标记［s1012外的浓度(W/V）配制。电极缓冲液为Tris-_血红蛋白（Hb）和乳酸脱氢酶(LDH）同硼酸缓冲液，pH8.7。把配好的淀粉液加热，待工酶均为特定基因的产物，并在其分子结构的淀粉液成透明糊状并出现气抱时立即离开火不同水平上显示某些种类或器官特异性[2,4,5
3、,730焰，减压抽气2分钟，倒在电泳槽内，将预热到在鱼类中，研究Hb和LDH同工酶的电泳图谱‘80℃左右的玻璃板迅速盖在胶液上。室温冷凝已有若干报道(8,9,107本文主要是用淀粉凝胶电泳后放到4℃冰箱里继续冷却2小时以上。凝胶法分析了青、草、继、缩四种鱼的Hb和红血细厚约5mm，面积为30X17.5cmzo胞LDH同工酶的电泳行为特征，以便在生化（三）电泳在上述离心好的万清液中水平上进一步为形态分类提供佐证。取样，每孔点样25川。点样后用凡士林油封好点样孔。用美国出品的Buehler3-1500电泳仪材料和方法在4℃的冰箱里进行电泳
4、。电泳时间为16小青鱼（Mylopharyngodon沙。，）、草鱼时左右。电压梯度为?-10V/cm,(Ctenopharyngodonidellus),鱼（Hypophthal-（四）染色电泳后，Hb的谱带即出现，mickt妙molitrix）和缩鱼（Aristic抑；nobilis)应马仁拍照记录。取下胶片，按纵向用镍铬丝均为取自北京西郊万泉庄渔场的两年龄以上的成鱼。每种鱼取10尾。YanJingzhieta1:AnalysisofStarchGelElectra-phoresisPatternsofHemoglobinandR
5、edBlood（一）Hb和LDH同工酶的提取主要CellLDHIsozymesofFourKindsofFreshWater参考牛满江等的方法闭，并做了某些改进。用Telcost(Mylopharyngodonpiceus,Ctenopharyngo-donidellus,Hypophthalmichthysmolittix,Arisu-灭菌的注射器从鱼尾静脉取血1-2ml，放在预）chthy，nobiiis),先盛有5ml含0.1务肝素的生理盐水的刻度离1)山东大学1983届毕业生郑小民、卢清显参加了部分工作。心管中，用K,型离心机
6、（东德产）在4℃以每2)东北师范大学生物系（长春市）。分钟1.00。转离心，分钟，收集红血球，并用上本文于1984年9月3日收到．25割胶器把胶片切割成均匀的上下两片，揭下其图谱，If,3,4为草鱼（Ci）的图谱，11,5,6为中的一片放在染色盒里，倒人染色液，放在370C鲤鱼（Hy）的图谱,II,7,8为墉鱼（Ar）的图的培养箱里反应1-2小时，即可看到蓝紫色的谱。其中青鱼显示分布在靠阳极的、间距中等同工酶谱带。LDH同工酶的染色液，其每100的5条带，自阳极至阴极端依次为ml里含：辅酶I(NAD)50mg,硝基氮蓝四哇LDH(My
7、)1,z,3,4,s;(NBT)30mg,吩嗦甲醋硫酸盐（PMS)2mg,草鱼显示分布在从点样孔开始的间距较宽的，0.5MpH7.2的Tris-HCI缓冲液15m1,1.OM乳条带，自阳极至阴极端依次为LDH(Ct)1,2,3,4,sl酸钠lOml和O.IMNaCl5m1。染色完毕，把染鳞鱼和蟾鱼则显示为间距紧密而相似的，条色液倒掉，用水冲洗两次，再用70乙醇固定。带，自阳极至阴极端依次为LDH(Hy)1,Z,3A,，和LDH(Ar)1,z,3,4,so结果和讨论比较它们的图谱可以看出，青鱼的LDH(My)4青、草,链.蟾是我国淡水渔
8、业中有名的四带、草鱼的LDH(Ct)，带、链鱼的LDH(HY)s大家鱼，这四种鱼均属鲤科（Cyprininae）鱼类。带和靖鱼的LDH(AO，带均占相同迁移率的位WfA-和草鱼同属雅罗鱼亚科（Leuciscinae)，各
