水稻醋酶同工酶Est3基因的表达

水稻醋酶同工酶Est3基因的表达

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1、遗传(Beijing)9(5);1-41987研究报水稻醋酶同工酶Est3基因的表达告黄炳权(华南师范大学生物系遗传教研室,广州)同工酶作为生化标记正广泛应用于研究发李继耕等的方法t0育过程的基因调控。研究报道较多的是玉米的醋酶同工酶染色按Kahler的方法[67略加修过氧化氢酶基因Cat,,Cat,和Cat3,以及乙醇脱改,底物醋酸一a蔡醋和醋酸节茶醋用量比例为氢酶基因Adh:和Adh:的遗传调控和表达[7-9102:to水稻各种同工酶基因的表达的报道尚少,Ento酶谱用GNT-200分光光度计扫描、波长研究了水稻酸性磷酸酶Acp、位点控制的酸性为5

2、20nmo磷酸酶在纯合体和杂合体发育中的变化151,其结果和讨论它酶系统的基因表达未见详细的报道。我们在研究水稻醋酶Est3位点遗传[41的同时,对其所测定的139个水稻品种胚乳的醋酶同工控制的酶带在整个水稻生育期的表现和变化进酶,在阳极迁移率0.818和0.876位置上表现3行了研究,以进一步了解其基因的调控机理,为种酶带类型(图1),它们分别为12A,13A和无Est,基因作为水稻的标记基因在遗传育种中之酶带型。经遗传分析,12A和13A分别受Est3应用提供理论依据。位点上两个共显性等位基因控制[470材料和方法(一)实验材料处理选用139个栽培

3、水稻品种,分别测定授粉10天后胚乳的醋酶同工酶。测定方法采用单粒制样,即切除单个籽粒的胚后,挤出胚乳,然后加人50川声7.2的磷酸缓冲液研磨,取上清液随即测定。j244s8组配两套正反交组合,即逗紫X131和青图1部分水稻品种胚乳醋酶同工酶谱四矮16-4X桂朝13的正反交组合。对它们的(聚丙烯酞胺凝胶电泳)亲本和杂种的各主要器官,从授粉后5天起,追1.青四矮16-4;2.广农矮;3.桂朝13;4.透紫;5.珍汕97;‘.引54,踪测定其整个生育期的醋酶同工酶。对营养器官的测定,则取同一时期的营养从授粉第五天开始,对两个正反交组合青器官,克,加人1毫升磷

4、酸缓冲液冰冻研磨,离四矮16-4X桂朝13和逸紫X131的亲本和心20分钟,取上清液测定,每个样品量为50娜。HuangBingquan:TheExpressionofEstsLocusin(二)实验方法Rice采用垂直平板聚丙烯酞胺凝胶电泳,参照本文丁1986年4月21日收到。1备OA乃12A图2透紫X1引正反交当代胚乳醋酶同工酶陇潜和光密度扫描图型1·逻紫(13A);2,3.透紫X131(12A/13A);4-6.131X逞紫(12A/13A);7.1引(12A),杂种整个生育期各器官的醋酶同工酶进行测的酶带12A和13A的变化。结果表明,在杂交定

5、,以观察共显性等位基因Est3和Est3所控制组合当代,授粉第五天开始,Est,基因便开始图3J'四矮16-4(12人)X桂朝13(”人)的亲本和F,在不同发育时期和器官的mm同工酶酶潜左:1-3.发芽2天胚右:7-9.二叶期根1.肯四矮16-4;2.青四矮16-4X桂朝13;7.青四矮16-4;8.青四矮16-4X桂朝3.桂朝13,13;9.桂朝13,4-6发芽10天的苗10-12二叶期叶片4.青四矮16-4;5.宵四矮16-4X桂10.青四矮16-4;11.青四矮16-4X桂朝朝13;6.桂朝13,13;12.桂朝13,13-15·二叶期叶鞘13.

6、杳四矮16-4;14.肯四矮16-4X桂朝13;15.往朝13,.2.表达。亲本逸紫和桂朝13表现13A酶带,131顺序表达的过程,不同的同工酶基因所编码的和青四矮16-4表现12A酶带。逸紫X131和酶带在生育期间是变化的;此外环境条件的变青四矮16-4X桂朝13的杂种当代胚乳已表现化和个体间的差异也有可能出现修饰酶带。因互补酶带,在授粉后10-15天,胚乳中12A和13A酶带的活性最强,到乳熟期开始,逐渐减弱。值得注意的是,在正反交的杂种当代胚乳中,表现明显的基因剂量效应(图,2)。在逸紫011If峨16-4(12A)X桂朝13(13A)亲本及其F

7、,(13A)X131(12A)的正反交杂种当代胚乳的在不同生育期和铃官的农现互补酶带中,无论从酶带深浅、宽窄以及光密度基因型}EsteEst3Est3Est犷EstiF.sts扫描分析,都可以看出与母本同位的酶带活性表现型12A/13A大于父本同位的酶带,由于水稻胚乳是草倍体,发芽第二天杂种中的胚乳两倍基因荆量来自母本,一倍来胚自父本。因此,基因型为Est到肠t盯Est3的杂种胚乳}_户!+_中互补酶带的13A活性应大于12A酶带;反发芽第十天之,基因型为Est封Est封Est3的杂种中,12A酶苗胚乳带活性应大于13A酶带。由于杂种当代的胚乳十L二_

8、{十二_二叶期一五叶期在母体中表现互补酶带,并且活性高,因此可以叶+++利用Est,基因研究早

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