资源描述：
《高速逆流色谱快速分离制备贯叶连翘中的金丝桃素_陈峰阳》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、第27卷第12期中华中医药学刊Vo.l27No.122009年12月CHINESEARCHIVESOFTRADITIONALCHINESEMEDICINEDec.2009高速逆流色谱快速分离制备贯叶连翘中的金丝桃素陈峰阳,李晓誉,叶益萍,徐世芳(浙江省医学科学院药物研究所,浙江杭州310013)摘要:目的:建立从贯叶连翘中快速分离制备高纯度金丝桃素的方法。方法:市售贯叶连翘提取物经聚酰胺树脂预处理后直接进行高速逆流色谱分离纯化,以正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水(3B5B3B5)为溶剂系统,所113得产
2、物化学结构由HNMR和CNMR鉴定,纯度经高效液相色谱外标法检测。结果:在此条件下,经一步分离从300mg预处理粗提物中可得到13.6mg纯度为95%的金丝桃素。结论:该法简便、快速、所得产物纯度高,适合于高纯度金丝桃素的制备。关键词:高速逆流色谱;金丝桃素;贯叶连翘中图分类号:R285文献标识码:A文章编号:1673-7717(2009)12-2587-03PreparativeIsolationofHypericinfromSt.John'sWortbyHigh-SpeedCounter-Cu
3、rrentChromatographyCHENFeng-yang,LIXiao-yu,YEY-iping,XUSh-ifang(InstituteofMateriaMedica,lZhejiangAcademyofMedicalSciences,Hangzhou310013,Zhejiang,China)Abstrac:tThepresentpaperdescribesaneffectiveapproachfortheisolationofhypericinfromthecommercialdri
4、edextractofSt.John.swort(HypericumperforatumL.),whichinitiallypreparedbysolid-phaseextractiononpolyamideandfurtherseparatedandpurificatedwithone-stepprocessbyhigh-speedcounter-currentchromatography(HSCCC)byusingn-hexane-ethylacetate-methanol-water(3B5
5、B3B5,v/v/v/v)asthetwo-phasesolventsystem.Theexperimentyielded13.6mgofhypericinfrom300mgofcrudeextractinone-stepseparationwiththepurityof95%asdeterminedbyhigh-performanceliquidchromatography(HPLC).Thestructuresoftheisolatedcompoundwasidentified113byHnu
6、clearmagneticresonance(NMR)andCNMR.Keywords:high-speedcounter-currentchromatography;Hypericin金丝桃素(hypericin)是贯叶连翘Hypericumperforatum物进行分离纯化,目前已在生物碱、黄酮、蒽醌、香豆素、苷类[1][2][13]L.中最具生物活性的物质,具有抗抑郁、抗肿瘤和抗等天然产物的分离中得到十分广泛的应用。本研究先对艾滋病毒(HIV)、肝炎病毒、疱疹病毒(HSV-1,HSV-2)、
7、市售贯叶连翘提取物(含总金丝桃素0.3%)采用聚酰胺树[3-4]禽流感病毒等多种逆转录病毒的作用。近年来其关注脂进行预处理,并进而用HSCCC进行一步分离,经NMR结度和需求量都急剧增大。目前制备金丝桃素的方法主要由构鉴定和HPLC外标法检测,得到高纯度的金丝桃素。[5-7]化学合成和从贯叶连翘及其同属植物中经传统的硅1仪器与材料[8-9]胶、凝胶色谱和制备型高效液相色谱分离,这些分离方CCC-1000高速逆流色谱仪(Pharma-TechResearch法样品吸附严重,成本高昂,分离时间长,有机
8、溶剂消耗巨Corporation)配有3个聚四氟乙烯分离线圈(内径1.6mm,[10-11]大,加上金丝桃素对光、热、氧及PH不稳定使得其分分离柱总体积325mL和进样环20mL)、SeriesÒ恒流泵离纯化过程艰难而繁杂,且难以得到高纯度产物。(LabAlliance)、V520紫外可变波长检测器(LabAlliance)、高速逆流色谱(High-speedCountercurrentChromatog-SF-2100自动部分收集器(ToyoKaisha)和N2000色谱工rap
