高等植物抗病突变体细胞水平选择

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1、ill传HrI'llaDl'I'As(Beijing)5(6）：96一481983石白少乎＼高等植物抗病突变体的细胞水平选择丰、对小立周嘉平～（中国科学院遗传研究所，北京）高等植牧伉病突变体的细胞水平选择是一门较新株的愈伤组织、细胞悬浮液、原生质体等。最好是单倍的技术，是高等峨物抗病育种微生物化的一种尝试，其体，但也可以使用二倍体。最大优点是能在较小的空间繁殖大量的个体（每毫升2.诱变对高等植物有效的物理诱变可用，射105-100个红吃），并在精密控制的环境及营养条件下线、紫外线（限于细,lvl?悬浮液或小的愈伤组织）等。化进行定量接利，严

2、格地选出杭病的细胞，使之迅速形成学诱变剂有乙基硝r.脉、乙烯亚胺、甲基磺酸乙醋植株，因而在一定程度上节约了空间与时间。这一课

3、菌灵活运用。分为选择压力，体外进行选择抗病突变休。离出在含毒素培养基上生长较好、较快的细胞团后，在（一）病原I,}]致病毒素真菌毒素或细菌毒素原浓度或在含更高浓度毒素的培养基上进行复筛，或是由某些真首或细菌在培养过程中或在与其寄主的相转移到其它毒素的培养基上，以期获得能兼抗多种病互作用中产登的，在低浓度时就会使寄主产生典a;[;定害的突变体。状。一般是刁」It物质，而为塘昔（或多糖）、菇类、酚类、4.将抗病的愈伤组织移人2,4-D含量较少的植株氨基酸的一种或以上几类物质的结合物。致病毒素有分化培养基，使其迅速生根，再转到壮苗培养基，得到寄主

4、专化性（或选择性）毒素和非寄主专化性毒素两正常的植株。种，寄主专化性毒素只对病菌的寄主有高度的生物活，．接种病菌，重复测定植株的抗病性。性，这一类包括很多著名的毒素，如〔1)蠕虫菌系统6.抗病系如为单倍体，可在愈伤组织阶段或幼苗(HelminthosporilmsPP.）的玉米小斑病菌(H.maydis,期加倍成二倍体，测定其农艺性状，选择优良的株、系共有斗个专化性毒素，其中3个与四环三菇类化合物继续进行产景、品质鉴定。相似）及甘蔗限斑病菌(H.sacchari）等。(2）某些链格（三）抗毒素选择法的实例抱(Allernariaspp.)，

5、包括苹果叶斑病菌（A.mali）及1．用专化性毒素进行选择明尼苏达大学的柠檬叶斑病荀(A.citri）等。(3)细菌性烟草野火病菌Gengenhach等在玉米小斑病石Helnzinthospo，二，，，，；maydts)(Pseudomonastabaci)，为极毛杆菌，产生烟草野火毒的试验中，根据病菌T小种产生Hmt毒素，并对含“T"素，其相似物为2一丝氨酸一烟毒素，也能在烟草上诱发细胞质的雄性不育系有高度毒性、但对含N细胞质的失绿斑，并具(T与烟草毒素相同的寄主专化活性。雄性可育的一般玉米却毒性较低的情况，进一步发现非寄主苦化性毒素也是

6、病菌产生的一种代谢物了含Hmt毒素的固体培养基可以完全抑制T细胞质质，可以危害奇主和一些分类上近似的非寄主，其中包愈伤组织的生长，对N细胞质诱生的愈伤组织却全无括（1)真菌类：如马铃薯晚疫病菌(Phytophthorainfe-影响。这就是玉米小斑病菌毒素选择的实验根据。具stans),毒索为多精类；棉黄萎病菌(Verticilliumalbo-体过程是首先培养玉米幼胚，获得愈伤组织，然后将该alrt‘二），毒索为蛋白质、醋类、多糖；另一些细链格抱菌菌的培养液浓缩20倍。在选择阶段，毒素液使用浓度（刀，。二。八tentris),毒素为链格苑

7、醇甲基}P}(2)细菌为0.5-1%以体积计）。在3个半月中每隔1-1.5类二如烟草r-枯病菌和马铃薯青枯病菌(Pscudom。二二个月转移到新的含毒素培养基上。再经5个月的复测，solanaccaru），毒素为高分子多糖类。烟草青枯病菌毒素浓度提高到4-5%,梅隔1-2个月转移1次，共也可以危害补;iuo（二）抗、索选择法的步骤ZhouJiapzng:SelectionofDiseaseResistantMutants1．准备供选择用的培养材料可应用能再生植inHigherPlant;ttCellLevel46计转移7-8次，约经12个月

8、，始得到稳定的抗病细胞病突变体出现的机率并不显著高于未诱变处理组。因团。再生成植株后，经接菌测定仍然抗病。提取抗病而有人认为在组织培养过程中，细胞本身会发生突变，突变系的线粒体进