微生物培养基制备的质量控制

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1、!2"00"#7年第!29$卷第1期ChinaPoultryVol.29,No.1.2007基础知识养基制备的质物培量生控微制1,222李新华,沈磊明,芮早兵(1.中国农业科学院家禽研究所,江苏扬州225003;2.浙江荐量生物工程有限公司,浙江杭州310018)随着生物技术的迅猛发展,微生物对工业、断改进,种类在不断增加。一般以培养基的成分、农业、环境、医药、食品卫生、畜牧兽医等事业发用途、性质等加以分类。挥着愈来愈重要的作用。由于各类微生物有着1.1根据培养基的组成成分分类不同的营养要求以及对微生物培养的各自工作1.1.1合成培养基目的,促进了微生物培

2、养基的研究、生产、使用合成培养基的各种成分完全是已知的各种技术的不断改进。作为兽医微生物工作者,深感化学营养物质。这种培养基的化学成分清楚,组我国在兽医病原研究方面已取得不少成绩,但成成分精确,只要配制过程严格操作,能做到各同时也应看到,不少病原微生物的培养检验可批培养基的质量稳定,重复性强,但价格较贵,而重复性不够,在培养基的制造及使用技术上明且微生物在这类培养基中生长较慢。一般在研究显欠缺,培养基对微生物培养的实用效果研究工作中使用。常用于研究某种营养物或药物对微不够,检验检疫部门的检验误差时有发生,生物生物代谢的影响。制品产品批次间的差异等等。都提示

3、我们要重1.1.2天然培养基视培养基的改进提高,逐步实现培养基质量控由化学成分不完全明了的天然物质制成,如制标准统一。牛肉汤、牛肉膏、蛋白胨、血清、马铃薯等。此类培1微生物培养基的分类养基的化学成分不恒定,也不易确定,难以做到培养基是医学研究、抗菌药物生产、临床检不同批次间质量的一致。但成本较低,配制方便,验、流行病学调查、生物制品制造等多项领域的营养丰富,细菌繁殖较好,所以常被采用。重要基础,由于各种微生物所需要的营养不同,1.1.3半合成培养基导致培养基种类繁多,各行业常用的培养基总数在天然有机物的基础上适当加入已知成分达1800多种,随着生物技术的发

4、展、培养基的不的无机盐类,或在合成培养基的基础上添加某些天然成分,如培养霉菌用的马铃薯葡萄糖琼脂培收稿日期:2006-09-06-52-!20""07#年第2!$9卷第1期ChinaPoultryVol.29,No.1.2007基础知识养基。这类培养基能更有效地满足微生物对营养水1000mL。将猪胃除去脂肪后绞碎,按比例加物质的需要。入至65℃温水中混合搅匀,盐酸调节pH至1.6~1.2根据培养基的不同用途分类2.0,51~55℃消化18~24小时,前12小时至少搅1.2.1基础培养基拌6~10次,后静置。除去浮物抽清液煮沸10~20一些微生物所需要的营养

5、物大部分是共同分钟,冷却。的,应就配成一种基础培养基,再按某微生物的配方三,马丁肉汤:牛肉汤500mL、猪胃消化特殊需要添加某营养物即可。液500mL、氯化钠2.5g。按成分混合后以氢氧化1.2.2选择性培养基钠溶液调整pH为7.6~7.8,煮沸20~40分钟,补充含有增菌剂(营养物)和抑菌剂(选择性)的失去的水分,冷却沉淀,取上清,按需要量分装灭培养基,由于抑菌剂的选择性抑制作用,使得所菌。要分离的病原菌能较好繁殖,将所需要的微生物各种类型培养基制备程序不同,同一配方在从混杂的微生物中分离出来。不同实验室或车间,由于各自经验与熟练程度原1.2.3鉴别培养

6、基料差异等也有不少区别。建议批量制作前进行小在培养基中加入某种试剂或化学药品,使培量预试。介绍基本程序如下:养后会发生某种变化,从而区别不同类型的微生①器具准备与原料计算:玻璃器具要求为中物。性硬质料耐高温高压,不锈钢器具最好为316L材1.3根据培养基的性质分类质经焊缝射线检测,切勿使用铜质或铁质容器。1.3.1固体培养基器具经严格去污清洗并高压或干烤灭菌。计量器固体培养基是在培养基中加入凝固剂,有琼具要经过计量验证。原料计算由配方规定含量和脂、明胶、硅胶等,常用于微生物分离、鉴定、计数需要制备的培养基数量精确计量取用,当主要原和菌种保存等方面。料更换牌

7、号、批号时须重新预试挑选。1.3.2液体培养基②投料配制:按配方次序逐一投料,溶化有液体培养基中不加任何凝固剂。这种培养基关粉剂可用少许温水加热搅拌,如发生焦化现象的成分均匀,微生物能充分接触和利用培养基中应废弃重配。用于配制培养基的容器应充分大于的养料,适于作生理等研究,由于发酵率高,操作培养基最终体积,以保证充分混合的空间。小量方便,也常用于发酵工业。配制可用油炉气炉电炉等加温,大量配制可用夹1.3.3半固体培养基层不锈钢锅蒸汽加温。半固体培养基是在液体培养基中加入少量③pH值调节:各类培养基配方标明pH值为凝固剂而呈半固体状态。可用于观察细菌的运该培

8、养基使用时的pH值,且为室温条件下的最终动、鉴定菌种和测定噬菌体的

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